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小鼠乳腺表达抗PD-1抗体对其脾脏T细胞的影响: 2023年; 为从细胞水平研究小鼠乳腺表达抗PD-1抗体对转基因鼠脾脏T细胞表面抗原蛋白、细胞因子表达、脾脏CD4+T细胞增殖以及增殖相关通路的影响,将8周龄未经历过怀孕的和18周龄经历过哺乳的表达抗人PD-1抗体的转基因小鼠分成两组,每组以转基因阴性鼠为对照,提取脾脏淋巴细胞,检测脾脏淋巴细胞的变化。与转基因阴性小鼠相比,乳腺表达抗PD-1抗体的转基因小鼠的免疫系统中的脾脏T细胞的效应T细胞比例上升,Treg细胞比例下降,CD4^(+)T细胞表达的IFN-γ、IL-17以及IL-2有不同程度的增加。IL-4、IL-10以及TGF-β都没有发生变化。与T细胞刺激相关的一些细胞表面的蛋白分子也没有引起变化。转基因阳性鼠和转基因阴性鼠中T细胞增殖没有显著性差异,转基因阳性鼠中PI3K/Akt/mTOR和Ras/MEK/ERK这两条通路上的磷酸化蛋白只有部分表达上调,整个通路没有完全上调。结果表明,转基因小鼠作为表达抗PD-1抗体这类免疫系统相关单克隆抗体的宿主是可行的。; 张子寒龚桂花谢丽萍胡又佳; 关键词：转基因小鼠

GSDMD-N基因重组质粒及在乳腺表达的方法和应用: 本发明公开一种GSDMD‑N基因重组质粒及在乳腺表达的方法和应用，通过构建GSDMD‑N基因的表达重组质粒，使其在乳腺组织及乳腺细胞内特异性表达，从而达到对金黄色葡萄球菌感染的乳腺炎的防治目的，属于基因工程领域。GSDM...; 杨勇军颜世卿马超颖潘志明马轲陈巍; 文献传递

减毒沙门菌介导防御素-3乳腺表达及对乳腺炎主要病原菌的抗菌效果被引量：3: 2014年; 探讨减毒沙门菌介导的人HNP-3原前肽和前肽基因乳腺表达及其表达产物对牛乳腺炎主要病原菌的抗菌效果。构建人HNP-3原前肽和前肽基因的乳腺表达载体pEGFP-WAP-prepro-HNP-3和pEGFP-WAP-pro-HNP-3,电转化导入减毒沙门菌ΔcrpC78-1,构建重组菌ΔcrpC78-1（pEGFP-WAP-prepro-HNP-3）和ΔcrpC78-1（pEGFPWAP-pro-HNP-3）,重组菌分点注射到怀孕后20~22d母兔腹部乳腺分布区,收集兔分娩后不同时间的泌乳,Western-blot和荧光检测乳中HNP-3融合蛋白表达情况,ELISA检测乳中HNP-3融合蛋白的表达水平,常规方法分离乳腺炎主要病原菌,活菌计数法检测泌乳中HNP-3融合蛋白抑菌效果。结果显示,乳汁中分别在40 000和35 000处有prepro-HNP-3和pro-HNP-3融合蛋白阳性杂交信号,且在488nm处有黄绿色荧光;母兔在分娩后第5dHNP-3融合蛋白表达量最高,分别可达584μg/L和470μg/L,及至第25天表达量仍可达到277μg/L和213μg/L。活菌计数法结果表明分娩后第5d含prepro-HNP-3融合蛋白兔乳对牛乳腺炎主要病原菌大肠埃希菌、溶血巴氏杆菌、无乳链球菌、乳房链球菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的抑菌率分别为92.0%、54.8%、46.4%、48.8%、86.9%和74.9%;含pro-HNP-3融合蛋白乳的抑菌率分别为84.9%、46.5%、40.6%、40.4%、71.1%和58.4%。结果表明,减毒沙门菌能够介导人HNP-3融合蛋白基因在乳腺上皮细胞中定位表达,表达的preproHNP-3和pro-HNP-3具有较强的生物学活性,对牛乳腺炎主要病原菌具有明显的抑制作用,为乳腺炎的生物防控及生物源性抗菌肽的研究提供了参考。; 陈慧敏李银聚张鹏程相朝张春杰余宁杨惠王晓利; 关键词：乳腺表达乳腺炎

以腺病毒为载体乳腺表达生产转基因蛋白药物的方法: 本发明公开一种以腺病毒为载体乳腺表达生产转基因蛋白药物的方法。其特征是：利用复制缺陷型腺病毒骨架质粒载体携带不同种目标蛋白基因序列，在含有Ad5型腺病毒基因组E1A区序列的包装细胞系获得重组蛋白基因载体，在动物乳腺，获得...; 李青旺韩增胜; 文献传递

牛αs1-casein乳腺表达载体及金属硫蛋白在转基因小鼠乳腺中的表达: 金属硫蛋白是一类富含半胱氨酸、无芳香族氨基酸的低分子量蛋白，可分为四种亚型MT-I、MT-II、MT-III、MT-IV，每分子MT可以结合7分子的Zn2+或Cd2+。对金属离子与自由基具有很高亲和力的特性使得MT在对金...; 王雁良; 关键词：金属硫蛋白乳腺生物反应器; 文献传递

重组人IFNα2b乳腺表达载体及其构建方法和应用: 本发明公开了一种重组人IFNα2b乳腺表达载体，该乳腺表达载体是pBCN-IFN-pA-EGFP，它是由扩增所得的beta-酪蛋白启动子和ployA序列、人IFNα2b基因、EGFP的表达盒按顺序ployA-IFNα2b...; 石德顺李辉刘庆友崔奎青; 文献传递

SB转座系统介导的hLF乳腺表达载体的构建及其表达研究: 宋洋著

SB转座系统介导的hLF基因乳腺表达载体的构建及其表达研究: “睡美人”'(Sleeping Beauty, SB)转座系统,作为Tcl超家族中的一员,是对斑马鱼基因组进行了分子水平的重建,逐步恢复其ORF、核定位活性、DNA结合活性以及整合活性,并对其进行改造,使之恢复跳跃能力,...; 宋洋; 关键词：人乳铁蛋白 Β-乳球蛋白基因; 文献传递

SB转座子介导的hLF乳腺表达载体的构建及鉴定: 2011年; 构建了以睡美人(Sleeping beauty,SB)转座子为载体元件、β-乳球蛋白质(β-lactoglobulin,BLG)为调控区的人乳铁蛋白质(Human lactoferrin,hLF)乳腺表达载体及增强型绿色荧光蛋白质(EGFP)表达载体,便于验证SB转座子的转座效率,为hLF乳腺表达载体成功转染乳腺上皮细胞(GMC)奠定基础。采用PCR法从绵羊基因组中扩增5'、3'BLG,经TA克隆,在中间载体pcDNA3.1(-)的作用下,与hLF连接,得到pcDNA3.1(-)-BLG-hLF,然后与pT2连接,构建pT2-BLG-hLF;此外,还构建了pT2-BLG-EGFP。采用测序、酶切、PCR 3种方法鉴定阳性克隆,并用脂质体法将pT2-BLG-EGFP转染至GMC细胞中进行观察。分子鉴定结果:5'BLG、3'BLG克隆成功,pT2-BLG-hLF及pT2-BLG-EGFP构建正确;细胞鉴定结果:SB转座子介导的EGFP能在GMC细胞中高效表达。成功克隆了5'BLG、3'BLG调控区,并成功构建了乳腺表达载体pT2-BLG-hLF。; 宋洋王子玉张艳丽钟部帅张国敏孟立黄荣王昌龙闫益波王锋; 关键词：Β-乳球蛋白乳腺上皮细胞

Lysostaphin乳腺表达载体构建及转基因细胞制备: 本研究以pEGFP-C1为载体骨架,通过PCR扩增牛2.8kb的β-酪蛋白5'调控区及0.6 kb的3'侧翼区(poly A)序列作为调控序列,制备成含有绿色荧光和新霉素筛选标记的牛乳腺特异表达载体(PEPB),经PCR...; 上官陶; 关键词：乳腺表达转基因细胞原核表达; 文献传递

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