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一种重组人触珠蛋白β亚基表达纯化方法及其在横纹肌溶解相关急性肾损伤中的应用
本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种重组人触珠蛋白β亚基表达纯化方法及其在横纹肌溶解相关急性肾损伤中的应用。该重组人触珠蛋白β亚基(Hpβ)基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO...
龚燕华李宁韩露 王鑫跃
有氧运动上调AKAP150基因特异性敲入小鼠动脉平滑肌BK_(Ca)通道β1亚基表达
2024年
目的:探究血管平滑肌AKAP150在动脉血压调节中的作用,并进一步阐明血管平滑肌AKAP150在有氧运动诱导高血压动脉平滑肌大电导钙激活钾通道(large-conductance calcium-activated potassium channel,BK_(Ca))逆重构中的作用。方法:采用ES细胞打靶技术建立AKAP150基因平滑肌特异性敲入小鼠(AKAP150 gene smooth muscle specific knock-in model mouse,AKAP150 smKI)。3月龄野生型(Wild type,WT)小鼠和AKAP150 smKI小鼠,随机分为野生型安静对照组(WT-SED)、野生型运动组(WT-EX)、AKAP150 smKI安静对照组(AKAP150 smKI-SED)和AKAP150 smKI运动组(AKAP150 smKI-EX);运动组进行中等强度有氧跑台训练。12周后,尾动脉监测血压,取肠系膜动脉,采用膜片钳记录技术、Western Blot和qPCR检测BK_(Ca)通道功能和表达情况等。结果:1)3、6、9和12月龄的AKAP150 smKI小鼠的SBP、DBP以及MAP均显著高于同龄WT小鼠。2)有氧运动后,AKAP150 smKI-EX和WT-EX组SBP、DBP以及MAP下降。3)AKAP150 smKI-SED组BK_(Ca)通道最大电流密度下降,AKAP150 smKI-EX组BK_(Ca)通道最大电流密度上调。4)与WT-SED组相比,AKAP150 smKI-SED组BK_(Ca)通道NPo减小,To缩短,Tc延长;有氧运动后,WT-EX组NPo增加,To无差异,Tc缩短;AKAP150 smKI-EX组NPo增加,To增长,Tc缩短。5)与WT-SED相比,AKAP150 smKI-SED组的AKAP150表达增加,p-NFATc3S165表达减少,β1亚基蛋白和mRNA表达减少,β1/α比值下调。有氧运动后,AKAP150 smKI-EX组逆转上述情况;且WT-EX组,β1亚基增加,β1/α比值上调。结论:有氧运动可能抑制动脉平滑肌AKAP150表达,上调p-NFATc3S165表达,抑制AKAP150介导的兴奋-转录耦联途径,上调β1亚基表达,改善BK_(Ca)通道功能,使动脉血压下降。
刘霜徐召霞张严焱石丽君
关键词:有氧运动动脉平滑肌细胞
推拿对坐骨神经慢性压迫性损伤模型鼠脊髓背角胶质纤维酸性蛋白和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基表达的影响被引量:4
2023年
目的通过观察推拿对坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury of the sciatic nerve,CCI)模型鼠脊髓背角胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体2B亚基(NR2B)表达的影响,探讨推拿治疗神经病理性疼痛的镇痛机制。方法建立CCI模型,将大鼠分为假手术组、模型组、推拿组,每组12只,采用按摩推拿手法模拟仪定性、定量模拟点法、拨法、揉法,对推拿组大鼠右侧的殷门、承山、阳陵泉穴进行干预,通过机械缩足反射阈值和累计疼痛评分评价大鼠机械痛敏反应和疼痛强度变化;通过透射电镜对大鼠脊髓背角突触超微结构进行观察;采用免疫荧光双重标记法观察脊髓背角GFAP、NR2B的共定位表达。结果推拿可以提高CCI模型鼠机械缩足反射阈值、降低累计疼痛评分(P<0.01);同时也能改变大鼠脊髓背角突触的形态结构:与模型组相比,推拿组脊髓背角突触形态结构恢复,膜较完整、线粒体肿胀程度轻、突触后致密区变长。干预20天后,与模型组比较,推拿组大鼠脊髓背角GFAP、NR2B平均荧光强度显著降低(P<0.05)。结论推拿可以改善大鼠的行为学和形态学结果,改变脊髓背角突触可塑性来抑制痛觉敏化;还可以通过抑制星型胶质细胞活化,降低脊髓背角GFAP和NR2B的表达来镇痛。
官乾刘志凤于天源王厚融张英琦徐亚静杨震杰萨出拉张润龙陈金平
关键词:推拿痛觉敏化
麻射安金丸对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌大鼠模型气道炎症及黏蛋白5AC和γ-氨基丁酸A受体α亚基表达水平的影响被引量:1
2023年
目的 探讨麻射安金丸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌大鼠模型气道炎症及黏蛋白5AC(MUC5AC)和γ-氨基丁酸A受体α亚基(GABAARα)表达水平的影响。方法 将102只体重(195±20)g的7周龄雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、氨溴索阳性对照组及中药低、中、高剂量组,每组17只。除正常组外,其余各组均采用脂多糖滴入联合香烟烟雾暴露方式建立COPD气道黏液高分泌大鼠模型。造模成功后,氨溴索阳性对照组给予氨溴索溶液[54 mg/(kg·d)],中药低、中、高剂量组分别给予4.375、8.750、17.500 g/(kg·d)麻射安金丸(汤剂),正常组和模型组以等容量生理盐水灌胃,六组均连续灌胃28 d。实验结束后采用苏木精-伊红染色、过碘酸希夫染色观察各组肺组织病理学变化,酶联免疫吸附试验检测各组血清炎症因子水平和肺泡灌洗液细胞因子水平,采用蛋白质印迹法检测各组肺组织中MUC5AC、GABAARα含量。结果 模型组气道及肺组织病理变化较重,白细胞介素-1β(IL-1β)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MUC5AC、GABAARα水平均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。中药低、中、高剂量组气道及肺组织病理变化轻于模型组,IL-1β、NE、TNF-α、TGF-β1、TIMP-1、MMP-9、MUC5AC、GABAARα水平均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。中药中剂量组IL-1β、NE、MMP-9、GABAARα均低于中药低剂量组;中药高剂量组IL-1β、NE、TNF-α、TGF-β1、TIMP-1、MMP-9、MUC5AC、GABAARα表达均低于中药低、中剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 麻射安金丸能改善COPD气道黏液高分泌状态,抑制气道重塑,可能与其减轻炎症损伤,抑制MUC5AC、GABAARα表达有关。
尚艳花邓敬华张晓阳马真王玉栋
关键词:慢性阻塞性肺疾病黏蛋白5AC
激活小麦沉默的Glu-1Ax亚基表达的方法及其相关生物材料
本发明提供一种利用基因编辑激活小麦Glu‑1Ax‑null亚基表达的方法,所述方法包括:设计靶向Glu‑1Ax‑null基因中的提前终止密码子的特异sgRNA;将所述特异sgRNA克隆至pEtRNA载体BsaI位点间,构...
李吉虎李根英李玉莲高洁宋国琦张淑娟张荣志李玮林延祥
大鼠小脑浦肯野神经元发育过程中Na_(v)亚基表达与电生理特性的发育成熟具有相关性
2023年
目的通过免疫组化和电生理记录来探讨大鼠小脑浦肯野神经元发育过程中电压门控钠通道亚基表达差异特性及其与电生理特性发育成熟的相关关系。方法将大鼠根据发育阶段分为4组:出生后5~7 d(婴幼儿组)、12~14 d(幼年组)、21~24 d(青少年组)、42~60 d(成年组)。运用免疫组化染色方法检测Na_(v)1.1、1.2、1.3、1.6在浦肯野神经元发育过程中的表达变化,并分析不同年龄段的平均光密度值量化发育过程中各亚基的差异变化特性。同时,运用离体脑片全细胞膜片钳技术记录自发性电活动研究发育过程中浦肯野神经元电生理基本特性变化。结果Na_(v)各亚基在大鼠浦肯野神经元发育过程中表达差异明显。Na_(v)1.1亚基在整个发育阶段呈高表达,且随发育时间增加而增加(P<0.05)。Na_(v)1.2在整个发育阶段无表达(P>0.05)。Na_(v)1.3随发育表达量降低(P<0.05),青少年期后无表达。Na_(v)1.6婴幼年期无表达,随发育时间增加,表达量增多(P<0.05)。神经元发育早期主要表达Na_(v)1.1和Na_(v)1.3,而随发育增加,Na_(v)1.3消失,Na_(v)1.6增加。青少年期后主要表达Na_(v)1.1和Na_(v)1.6。Na_(v)蛋白总量随发育逐渐增加(P<0.05),青少年期后趋于成熟。浦肯野神经元自发放频率和兴奋性随发育逐渐增强,到青少年期达到成熟水平。Na_(v)亚基的发育表达变化与放电频率呈正相关(r=0.9942,P<0.05),与阈值变化呈负相关(r=-0.9891,P<0.05)。结论Na_(v)亚基在浦肯野神经元表达发育变化与神经元高频电生理特性的发育成熟具有相关性,提示Na_(v)亚基表达成熟是电生理特性不断成熟的基础。
傅鸣宇纪晓宏钟磊吴琼李海福王宁黔
新型硫化氢供体上调小胶质细胞KATP通道亚基表达抑制癫痫发作的炎症机制
背景与目的:癫痫的发生发展与神经炎症密切相关,开发可减轻神经炎症的药物也是一种有前景的抗癫痫策略。本课题组在前期工作中首次发现自主研发的新型硫化氢(H2S)供体可使小胶质细胞向抑炎表型转化并抑制癫痫发作,但其具体机制尚不...
康绮芸
关键词:癫痫小胶质细胞KATP通道神经炎症
复脉康胶囊对缓慢型心律失常大鼠心肌细胞Na^(+)/K^(+)-ATP酶及α_(1)、α_(2)亚基表达的影响被引量:1
2022年
目的研究复脉康胶囊对缓慢型心律失常大鼠心肌细胞Na^(+)/K^(+)-ATP酶(NKA酶)及α_(1)、α_(2)亚基蛋白表达的影响,探讨复脉康胶囊对缓慢型心律失常的作用机制。方法采用尾静脉处注入异搏定的方法制备缓慢型心律失常大鼠模型,将造模成功的60只SD大鼠随机均分为空白组、模型组、复脉康胶囊组(低、中、高剂量组)、心宝丸组。采用NKA酶活性测定试剂盒测定各组大鼠心肌中NKA酶的活性,Western blot法检测心肌细胞内钠泵α_(1)、α_(2)亚基蛋白的表达。结果与模型组比较,复脉康胶囊组、心宝丸组的NKA酶活性明显升高。与模型组比较,复脉康胶囊组、心宝丸组的钠泵α_(1)、α_(2)亚基蛋白的表达均明显升高。结论缓慢型心率失常大鼠心肌细胞NKA酶的活性及α_(1)、α_(2)亚基蛋白的表达明显下降,复脉康胶囊能提高其NKA酶的活性及α_(1)、α_(2)亚基蛋白的表达量,提示复脉康胶囊可能通过此机制来治疗缓慢型心律失常患者。
路瑞华徐惠梅郝丽丽
关键词:缓慢型心律失常心宝丸
TSH通过上调BKCa通道亚基表达促进主动脉平滑肌增殖的初步探究
目的:甲状腺功能减退症可出现在多种甲状腺疾病自然病程或治疗后期,根据有无血清甲状腺激素的异常,可以分为显性甲状腺功能减退和亚临床甲状腺功能减退,其共同特点表现为血清促甲状腺激素(Thyroid Stimulating H...
谢林浚
关键词:促甲状腺激素血管平滑肌BKCA通道
雌激素受体β5亚基表达与子宫内膜癌变的相关性研究
背景及目的:子宫内膜癌(EC)是妇科严重危害女性身心健康和生命安全的三大恶性肿瘤之一,甚至在某些发达国家中,子宫内膜癌已成为妇科第一大恶性肿瘤。虽然传统手术及放化疗是目前EC的一线治疗方式,但其创伤大,影响患者治疗后的生...
陈晓纯
关键词:子宫内膜病变子宫内膜癌

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韩颖
作品数:94被引量:379H指数:11
供职机构:北京大学第一医院
研究主题:注意缺陷多动障碍 儿童 发热性 共患 惊厥
程少容
作品数:44被引量:168H指数:8
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研究主题:磁共振成像 320排动态容积CT 慢性复合应激 海马 X线计算机
秦炯
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供职机构:北京大学人民医院
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供职机构:北京大学第一医院
研究主题:癫痫 脑电图 基因 儿童 脑电图特征
王凯
作品数:15被引量:1H指数:1
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研究主题:心肌保护效应 蛋白激酶C 亚基表达 MRNA和蛋白 ERP