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- 缺氧触发的人工转录因子、转录控制系统及其应用
- 本发明提供了一种缺氧触发的人工转录因子。本发明还提供了一种缺氧触发的转录控制系统,所述转录控制系统包含编码HATF的核酸序列和RE。根据本发明所述的缺氧触发的转录控制系统,其中所述缺氧触发的转录控制系统包括上下游连锁的两...
- 徐建青张晓燕廖启彬丁相卿
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- 经工程化以克服内涵体截留的人工转录因子
- 本发明涉及经工程化以在转导至细胞内之后克服内涵体截留的人工转录因子,其包含特异性靶向基因启动子的多指锌指蛋白。这种人工转录因子包含融合至激活性或抑制性蛋白结构域的多指锌指蛋白、核定位序列,蛋白转导结构域和内涵体特异性蛋白...
- 艾伯特·诺伊特茨纳约瑟夫·弗拉默尔爱丽丝·赫胥黎
- 文献传递
- 治疗由OPA1单倍剂量不足引起的疾病的人工转录因子
- 本发明涉及人工转录因子,其包含融合至激活性蛋白结构域的特异性靶向OPA1启动子的多指锌指蛋白和核定位序列。针对OPA1启动子的人工转录因子可用于治疗与OPA1单倍剂量不足相关的疾病,诸如常染色体显性视神经萎缩,综合征性常...
- 艾伯特·诺伊特茨纳约瑟夫·弗拉默尔爱丽丝·赫胥黎
- 文献传递
- 应用人工转录因子技术抑制乙型肝炎病毒复制
- 2015年
- 目的设计与构建特异性结合乙型肝炎病毒增强子1(HBV Enh1)的锌指蛋白人工转录因子(ZFP-ATF),检测在Hep G2.2.15细胞内的表达、对细胞生长影响及观察其抑制HBV DNA复制与表达的作用。方法构建含结合结构域ZFP与抑制性效应结构域Krüppel相关盒(KRAB)的人工转录因子(ATF),进行相关修饰、优化后,将人工合成ATF核酸序列插入真核表达质粒载体pc DNA3.1(^+),测序鉴定其正确性,X-treme GENE HP转染Hep G2.2.15细胞,共聚焦显微镜下观察ATF蛋白表达情况,CCK-8法检测ATF对细胞生长的影响,ATF转染24、48、72 h后,采用实时定量PCR、ELISA、Western blot法检测对HBV DNA复制与表达的抑制作用。结果成功构建pc DNA3.1-ATF(nls-ZFP-KRAB-FLAG)真核表达载体,ATF在Hep G2.2.15细胞中能正常表达,且对细胞生长无明显的影响,ATF具有抑制HBV DNA复制与表达的作用,在转染72 h后抑制作用达最高,抑制率达68.0%。结论构建的ATF在Hep G2.2.15细胞中能够正常表达且无毒性作用,可特异性结合HBV Enh1靶序列并具有抑制HBV DNA复制与表达的作用。
- 李中堂罗伟付愚蒋清虎刘济铭吴忠均
- 关键词:锌指蛋白人工转录因子乙型肝炎病毒增强子
- 基于靶点Osx的人工转录因子设计及miRNA筛选与功能研究
- 一、研究背景: 骨骼的发育和稳态依赖于骨形成与骨吸收两个过程,其中骨吸收由单核细胞来源的破骨细胞来介导,未分化间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)来源的成骨细胞则在骨骼发育及骨的形成过程中...
- 杨明福
- 关键词:成骨细胞人工转录因子
- 文献传递
- 特异性结合HBV EnhI的人工转录因子在体外抑制HBV的实验研究
- 目的:设计可特异性识别并靶向作用于HBV增强子I (Enh I)的人工转录因子(Artificial Transcription Factor, ATF),通过ATF靶向作用于HBV Enh I来抑制HBV DNA的复制...
- 李中堂
- 关键词:人工转录因子真核表达增强子
- 乙型肝炎病毒HBx基因的人工转录因子及其应用
- 本发明公开了能够特异结合乙型肝炎病毒HBx基因转录调控区的C2H2型三锌指蛋白和六锌指蛋白,以及融合了能够抑制基因转录的效应功能域的人工转录因子,本发明还公开了所述转录调节因子在制备治疗乙型肝炎病毒感染性疾病药物中的应用...
- 陈薇赵兴卉黄培堂朱旭东周晓巍徐俊杰付玲
- 文献传递
- HBV人工转录因子的制备及其抑制HBV复制的实验研究
- 目的:构建可靶向性识别HBV增强子的锌指蛋白(zinc fingerprotein,ZFP)人工转录因子(Artificial Transcription Factor,ATF)真核表达载体,检测其在真核细胞内的表达、对...
- 罗伟
- 关键词:锌指蛋白人工转录因子乙型肝炎病毒增强子
- HBV人工转录因子的制备及其靶向抑制HBV增强子活性研究被引量:2
- 2014年
- 目的构建可靶向性识别HBV增强子的锌指蛋白人工转录因子真核表达载体,检测其在真核细胞内的表达、对细胞增殖影响及生物学活性分析。方法应用锌指蛋白(zinc finger protein,ZFP)设计工具Zinc finger tools 3.0获取人工转录因子(artificial transcription factor,ATF)结合结构域并融合抑制性效应结构域KRAB,全基因合成ATF克隆进真核表达载pcDNA3.1(+),酶切、测序来鉴定构建载体的正确性,X-tremeGENE HP转染pcDNA3.1-ATF于HepG2细胞,采用RT-PCR、免疫荧光及Western blot检测ATF mRNA与蛋白的表达情况;CCK-8检测不同浓度的ATF表达载体转染后对细胞增殖的影响;双荧光素酶报告基因检测ATF对HBV增强子序列的靶向性抑制作用。结果成功构建pcDNA3.1-ATF真核表达载体;在HepG2细胞中能够正常表达;CCK-8检测ATF对细胞增殖生长无明显的毒性作用;双荧光素酶报告基因分析ATF能靶向性结合增强子并抑制报告基因的表达。结论通过基因工程的方法构建pcDNA3.1-ATF的真核表达载体可正常表达且无明显细胞毒性作用,可靶向性识别HBV增强子并具有相应的生物学活性。
- 罗伟蒋清虎刘济铭胡慧雯温路魏续福刘锐吴忠均
- 关键词:增强子锌指蛋白人工转录因子真核表达载体
相关作者
- 陈昭烈

- 作品数:145被引量:366H指数:8
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所
- 研究主题:细胞培养 动物细胞 微载体 无血清培养基 CHO工程细胞
- 李世崇

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- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所
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- 黄培堂

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- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所
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- 叶玲玲

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- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所
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- 刘红

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- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院
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