公共文化服务平台

搜索到4523篇“ 人源性抗体“的相关文章

A型肉毒神经毒素轻链人源性抗体的筛选、表达与检测被引量：4: 2016年; 目的从全合成人源性噬菌体单链抗体库中筛选抗A型肉毒神经毒素轻链(Bo NT/A LC)特异性单抗,并进行全抗的表达、纯化与鉴定。方法根据大肠杆菌密码子偏好性优化并合成Bo NT/A LC序列,克隆至p TIG质粒,转化BL21(DE3)plys S感受态细胞,IPTG诱导表达后Ni-NTA亲和层析纯化目的蛋白。利用纯化的轻链蛋白从噬菌体抗体库中经"吸附-洗脱-扩增"程序淘选富集抗体并进行特异性筛选。PCR扩增抗体轻重链可变区分别连入L293-CL和H293载体,瞬时共转染293-F细胞,培养上清经Protein A柱纯化,通过SDS-PAGE、Western印迹和ELISA检测抗体纯度和特异性。结果可溶性表达的Bo NT/A LC占全菌蛋白的36.8%,纯化后蛋白纯度达99%。从噬菌体抗体库中筛选到10株单抗,选择其中特异性最好的两株单抗Lab1、Lab2制备了全抗,Western印迹和ELISA检测结果显示其可特异性识别结合Bo NT/A LC蛋白。结论该研究得到了两株特异性的Bo NT/A LC抗体,可能用于A型肉毒毒素检测和肉毒中毒治疗。; 赵鹏胡颖安佳佳韦娜熊向华汪建华张惟材徐威; 关键词：噬菌体抗体库

针对前列腺特异性膜抗原（PSMA）的人源性抗体偶联药物研究: 研究背景:前列腺癌是严重威胁男性健康的常见泌尿系肿瘤。前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)特异性地高表达于前列腺癌细胞表面,是理想的治疗靶分子。抗体偶联药物...; 吴介恒; 关键词：PSMA 人源性抗体肿瘤靶向治疗; 文献传递

表达抗G250人源性抗体腺病毒对肾癌细胞的影响: 2013年; 目的检测腺病毒Ad-G250表达的G250全长人源性抗体的生物学活性及其对肾癌细胞的影响。方法扩增纯化腺病毒Ad—G250、Ad—EGFP（对照病毒）。病毒感染LO-2细胞，ELISA法检测细胞培养液中抗体的表达量。收集病毒感染后的细胞上清液进行纯化，Westernblotting检测纯化抗体的相对分子质量及其与细胞表面G250抗原的结合能力。免疫组化法检测Ad—G250表达的抗体是否具有生物学活性。CCK-8法检测Ad—G250对肾癌Ketr-3及ACHN细胞增殖的影响。AnnexinV—PE／7-AAD法检测Ad—G250对‘肾癌Ketr-3及ACHN细胞凋亡的影响。结果病毒Ad—G250感染LO-2细胞后G250抗体的表达量随着感染天数的增加而增加。Westernblotting实验显示Ad—G250能够表达G250抗体的轻链和重链，电泳图上该抗体能使G250抗原阳性的Ketr-3和786-O细胞在相对分子质量58×10’附近出现反应条带，而G250抗原阴性的ACHN和HK-2细胞在相应位置无反应条带。细胞免疫组化实验显示Ketr-3细胞膜被染成棕黄色，而ACHN细胞未见着色。CCK-8实验结果显示，Ad—G250对Ketr-3细胞有抑制作用，而对ACHN细胞的抑制作用不明显；Ad—G250抑制Ketr-3细胞增殖存在浓度及时问依赖性。凋亡实验显示，Ad—G250诱导Ketr-3细胞凋亡作用和ACHN细胞相比差异具有统计学意义，Ad—G250诱导Kert-3凋亡作用和Ad—EGFP相比差异有统计学意义。结论腺病毒Ad—G250成功表达出具有生物学活性的人源性G250抗体，且Ad—G250可抑制表达G250抗原的肾癌细胞增殖，诱导其凋亡。; 方琳程乾李望刘俊杰郑骏年; 关键词：G250 放射免疫显像

表达抗G250人源性抗体增殖缺陷型腺病毒的构建: 2013年; 目的构建表达抗G250人源性抗体的增殖缺陷型腺病毒。方法通过重叠延伸PCR、常规PCR方法，分别获得G250重链的可变区和恒定区（GH）eDNA序列及G250轻链（GL）eDNA序列，并克隆至pCLON12-IRES载体上，构建质粒pCLON12-GL-IRES—GH。酶切质粒pCLON12-GL—IRES—GH回收GL—IRES—GH片段，克隆至腺病毒载体pDC315，构建pDC315-GL—IRES—GH（pDC315-G250）。将pDC315-G250与腺病毒包装骨架质粒pBHGE3共转染HEK293细胞，重组包装表达G250抗体的增殖缺陷型腺病毒AdDC315一G250。纯化病毒表达的G250抗体，免疫印迹实验检测该抗体能否与细胞表面抗原特异性结合。结果PCR及测序结果表明成功构建质粒pCLON12-GL—IRES—GH及腺病毒穿梭质粒pDC315-G250。PCR鉴定表明重组腺病毒AdDC315-G250含有目的基因，病毒包装成功。免疫印迹实验结果显示，纯化的抗体在G250抗原阳性的细胞中能检测到目的条带。结论成功构建表达抗G250人源性抗体的增殖缺陷型腺病毒。; 方琳程乾李望刘俊杰郑骏年; 关键词：肾肿瘤 G250 抗体重组腺病毒

表达抗G250人源性抗体的增殖缺陷腺病毒构建: 目的：构建表达抗G250人源性抗体的增殖缺陷型腺病毒。　　方法：1．以pUC57-VH、pAT4-CH为模板，通过重叠延伸PCR方法，将G250重链的可变区和恒定区基因序列连接并在两端加入BamHI、XhoI酶切位点...; 张涛; 关键词：内部核糖体进入位点人源性抗体; 文献传递

抗SARS病毒人源性抗体IgG Fab片段: 本发明属基因工程领域，具体涉及抗SARS病毒人源性抗体。本发明应用重组蛋白技术及抗体库技术获得的抗冠状病毒人源性基因工程抗体Fab片段AS3-3，实验证实与重组冠状病毒S蛋白具有较高的亲和力，并可特异性识别冠状病毒感染的...; 刘金也胡庚熙杨小丽程训佳; 文献传递

抗bFGF人源性抗体的瞬时表达、纯化及鉴定被引量：1: 2010年; 目的:将一株人源性中和性抗bFGF单链抗体基因转入真核表达载体,进行真核瞬时表达,通过细胞试验进一步验证其中和活性。方法:将1AscFv抗体基因克隆到真核表达载体pIgG中(编码全长人源性IgG1类抗体),T4连接酶连接后,转化大肠杆菌DH5α,挑取4个克隆,经测序其中有一株含有正确的scFv序列,命名为pIgG-1A2,将pIgG-1A2转染真核细胞HEK293T进行瞬时表达,表达产物经蛋白G纯化后,SDS-PAGE检测纯化抗体的纯度;ELISA和Western blot检测抗体的特异性;MTT法检测纯化抗体对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)和人神经胶质瘤细胞株U87MG增殖的影响。结果:经酶切鉴定和测序发现pIgG-1A2含有正确的抗体轻重链基因,经293T细胞瞬时表达,表达产物经蛋白G亲和层析柱纯化后经SDS-PAGE鉴定,获得纯度为95%的电泳纯抗体,产量可以达到每升细胞培养上清10mg,交叉反应显示表达的抗体特异性针对bFGF,体外实验证实1A2能够抑制bFGF诱导的人脐静脉血管内皮细胞的增殖,同时还能抑制神经胶质瘤细胞株U87MG的增殖。结论:通过真核细胞成功地表达了抗bFGF人源性抗体,纯化后获得了高纯度的抗体,对HUVEC和神经胶质瘤细胞株U87MG具有抑制作用,为抗bFGF人源性抗体抗肿瘤研究奠定基础。; 陶俊李丹邓宁王宏龚义平向军俭; 关键词：BFGF 人源性抗体中和活性

人源性抗体在HEK293T细胞中瞬时表达条件的优化被引量：1: 2010年; 以HEK293T细胞为宿主对抗体基因的转染和表达条件进行优化。以GFP(green fluorescence protein)和人源性抗b FGF抗体1A2为报告基因,考察了3种转染试剂磷酸钙,PEI,FuGene HD的转染效率,确定FuGene HD的转染效率最高后,对DNA∶FuGene HD的比例,加入氯喹的浓度,转染后的孵育时间,最佳的低温培养温度以及加入组蛋白抑制剂的浓度进行了优化。结果显示,FuGene HD的转染效率最高,达到56.7%。当转染的DNA=2μg/4×106细胞时,DNA∶FuGene HD的最佳比例为1∶4(W/V);加入氯喹能够增强FuGene HD的转染效率,最佳浓度为100μmol/L,转染后的最佳孵育时间为6h;低温诱导能够提高293T细胞表达抗体的能力,最佳的温度为33℃;加入组蛋白抑制剂丁酸钠或丙戊酸能够明显提高抗体的表达量,丙戊酸的效果优于丁酸钠。通过对转染试剂,转染方法,培养温度,组蛋白抑制剂的加入等条件进行优化使人源性抗bFGF抗体的表达量从1.5mg/L提高到了15.1mg/L。; 陶俊向军俭王宏龚义平邓宁; 关键词：人源性抗体

抗Aβ人源性抗体的制备: 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一种多发于老年人群的中枢神经系统退行性疾病，主要临床特征为记忆衰退、认知及运动功能产生障碍等。随着全球人口老龄化的加剧，阿尔茨海默病的发病几率正在不断上升，由...; 孙超; 关键词：阿尔茨海默病免疫治疗特异性抗体

β淀粉样蛋白人源性抗体的制备: 2010年; 目的:应用噬菌体展示及抗体库技术,制备并鉴定β淀粉样蛋白(Aβ)人源性抗体。方法:应用固相筛选方法,以人工合成的Aβ1-15肽为靶标分子,在大容量全合成人源性噬菌体抗体库中筛选抗Aβ人源性抗体,并进行特异性鉴定。结果:经过3轮筛选,单克隆鉴定获得噬菌体抗体F11,竞争性ELISA表明抗体对Aβ1-42的结合位点位于1～15氨基酸残基内,ELISA结果证实抗体特异性良好。结论:以Aβ1-15肽为靶标分子获得了特异性良好的人源性抗体。; 孙超常红艳王双林建波俞炜源陈燕侠; 关键词：阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白特异性

加载更多 ∨

相关作者

用户反馈

相关作者

用户登录

用户反馈