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氧化应激对人 胃 上皮细胞 DNA甲基化、组蛋白乙酰化及甲基化修饰模式的影响及其机理研究 胃 肠道容易受到外界环境的影响并经历氧化应激(oxidative stress,OS)。胃 酸过多、长期饮酒、幽门螺旋杆菌等会刺激胃 上皮细胞 ,影响细胞 内活性氧物质(reactive oxygen species,ROS)的水... 左梦娜关键词:人胃上皮细胞 氧化应激 DNA甲基化 组蛋白甲基化 组蛋白乙酰化 槲皮素配伍芹菜素对顺铂诱导人 胃 上皮细胞 损伤作用的研究 被引量:2 2022年 目的研究槲皮素配伍芹菜素抗顺铂诱导人 胃 上皮细胞 (GES-1)损伤作用。方法运用分子对接技术将槲皮素和芹菜素与肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)蛋白对接。采用细胞 实验方法,将GES-1细胞 随机分为空白组、顺铂组、槲皮素+芹菜素组(40μmol/L槲皮素配伍4μmol/L芹菜素干预顺铂诱导GES-1细胞 损伤)。噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞 存活率;Hoechst 33258染色剂测定细胞 凋亡染色;线粒体膜电位探针(JC-1)测定细胞 线粒体膜电位;活性氧探针(DCFH-DA)测定细胞 内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;微板法测定谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量;硫微量操作法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;钼酸铵法测定过氧化氢酶(catalase,CAT)含量;WST-1法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量;ELISA法测定TNF-α、IL-1β表达。结果与空白组比较,顺铂组能升高GES-1细胞 凋亡荧光度值、ROS和MDA含量、TNF-α和IL-1表达,降低线粒体膜电位、GSH、CAT、SOD含量(P<0.05或P<0.01);与顺铂组比较,槲皮素+芹菜素组能降低顺铂诱导的GES-1细胞 凋亡荧光度值、ROS和MDA含量、TNF-α和IL-1表达,升高线粒体膜电位、CAT、GSH、SOD含量(P<0.05或P<0.01)。结论顺铂能诱导GES-1细胞 损伤,槲皮素配伍芹菜素能拮抗顺铂诱导GES-1细胞 损伤,其作用与抑制GES-1细胞 氧化应激、炎症反应和凋亡有关。 周志华 李耀伟 王志琪 李跃辉 李跃辉 丛梦静关键词:槲皮素 芹菜素 顺铂 GES-1细胞 IGF2BP3在MNNG致人 胃 上皮细胞 恶性转化中的作用及机制 2022年 [背景]N6-甲基腺苷(m6A)RNA甲基化修饰在环境致癌物诱发细胞 恶性转化的过程中发挥着重要作用,但其作用及机制有待进一步探索。[目的]探究m6A结合蛋白中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)在N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)致人 胃 黏膜上皮细胞 GES-1恶性转化细胞 中的作用及机制。[方法]基于MNNG致GES-1恶性转化细胞 模型MC-30,应用转染慢病毒技术构建稳定敲低IGF2BP3的MC-30细胞 株(MC30-shIGF2BP3,简写MC30-shI3),并设置阴性对照组(MC30-NC)。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting实验分别检测IGF2BP3 mRNA和蛋白表达水平,RNA结合蛋白免疫沉淀技术(RIP-qPCR)验证恶转细胞 MC-30中IGF2BP3蛋白与MYC mRNA的结合,放线菌素D实验检测MYC mRNA的稳定性。CCK-8、Transwell分别检测细胞 增殖、迁移和侵袭能力,Western blotting实验检测EMT关键蛋白(N-cadherin、Vimentin、α-SMA、Snail)的表达。通过在MC30-shI3细胞 中转染质粒过表达MYC的挽救实验,进一步观察细胞 表型(增殖、迁移、侵袭)和EMT关键蛋白表达的变化来阐明下游靶基因MYC的作用。[结果]与对照组相比,5、10、20、40μmol·L–1 MNNG染毒GES-1细胞 后,IGF2BP3 mRNA表达均上调(P<0.05)。20μmol·L–1 MNNG染毒GES-1细胞 后,IGF2BP3 mRNA表达水平随染毒时间的延长呈上调趋势(P<0.05)。5μmol·L–1 MNNG恶转第10、20、30代IGF2BP3 mRNA和蛋白表达水平均上调(P<0.05)。qRT-PCR和Western blotting表明,与MC30-NC组相比,MC30-shI3组的细胞 IGF2BP3 mRNA表达和蛋白表达水平明显下调(P<0.01);CCK8、Transwell表明,与MC30-NC组相比,MC30-shI3组的细胞 增殖、迁移以及侵袭能力明显降低(P<0.01);Western blotting实验表明,与MC30-NC组相比,MC30-shI3组的EMT关键蛋白N-cadherin、Vimentin、α-SMA、Snail蛋白表达水平均明显下调(P<0.01);RIP-qPCR结果显示,在MC-30细胞 中,与IgG组相比,IGF2BP3组中富集的MYC的mRNA水平更高(P<0.01);放线菌素D实验表明, 任艺艺 杜丹丹 刘桐 尹立红 浦跃朴 梁戈玉关键词:GES-1细胞 恶性转化 人 胃 上皮细胞 系GES-1在不同pH环境下的串联质谱标签定量蛋白质组学分析被引量:1 2022年 胃 是人 体重要的消化器官,胃 部环境pH改变可能引发多种疾病。本研究探究了不同pH环境对胃 上皮细胞 系GES-1蛋白质组的影响。将GES-1放置在酸性(pH 6.8)、碱性(pH 9.4)和对照(pH 7.4)培养基中,培养7 d后收集细胞 沉淀,进行串联质谱标签(tandem mass tags,TMT)定量蛋白质组学测序,选择差异表达蛋白进行KEGG富集分析。结果表明,胃 上皮细胞 GES-1最适生长pH为7.4,在强碱环境(pH 9.4)中细胞 能保持较好的状态,在弱酸环境(pH 6.8)中难以维持正常细胞 形态。与对照组相比,136个蛋白在酸性(pH 6.8)样品中显著差异表达,其中96个蛋白上调,40个蛋白下调。KEGG富集结果显示,差异蛋白与胆汁分泌、丙酮酸代谢、抗原加工呈递、铁死亡等103个生物学过程相关;与对照组相比,15个蛋白在碱性(pH 9.4)样品中显著上调,1个蛋白显著下调,差异蛋白被富集到47个生物学过程,包括霍乱弧菌感染、补体与凝血级联、内质网中的蛋白质加工、蛋白质输出等。本研究揭示了GES-1细胞 响应pH环境改变的蛋白质组特点,为探究因环境pH变化引发的胃 部病变提供了新的思路。 施韵 何坪 涂旭东 张玉娟幽门螺杆菌感染新型原代人 胃 上皮细胞 模型的建立 2021年 目的培养三维(3D)人 胃 黏膜上皮 类器官,转为二维(2D)原代胃 黏膜细胞 培养,并建成人 2D原代胃 上皮细胞 的幽门螺杆菌感染模型。方法(1)从正常人 胃 上皮 组织中分离胃 腺,在含有多种生长调节和凋亡抑制等混合因子的培养基中,依附于基质胶而培养成3D类器官;(2)利用免疫荧光技术鉴定胃 上皮 类器官的相关分子标记;(3)研究正常原代胃 上皮细胞 被幽门螺杆菌感染后的形态学变化,利用免疫印迹技术鉴定幽门螺杆菌感染相关蛋白的表达水平。结果成功培养出可长期传代的人 胃 上皮 3D类器官,具有典型的人 胃 黏膜上皮 分子标记。而且3D类器官转为2D平面培养的原代胃 上皮细胞 ,可作为幽门螺杆菌的体外原代细胞 感染模型。结论3D胃 上皮 类器官,可作为2D原代胃 上皮细胞 的持久来源,为研究幽门螺杆菌感染人 体胃 上皮 的分子机制带来个体化的新模型。 米阳 高爽 刘行凡 任飞飞 刘斌 郑鹏远关键词:胃腺 幽门螺杆菌 幽门螺杆菌感染新型原代人 胃 上皮细胞 模型的建立和应用 目的: 培养三维(3D)人 胃 粘膜上皮 类器官,转为二维(2D)原代胃 上皮细胞 培养,建成人 2D原代胃 上皮细胞 的幽门螺杆菌感染模型。继而应用该模型研究幽门螺杆菌感染和胃 癌发生发展有关的分子机制。 方法: 1.从正常人 胃 上... 高爽关键词:胃癌 疾病进展 幽门螺杆菌感染 酱香型白酒中生物活性物质抗幽门螺杆菌代谢物诱导的人 胃 上皮细胞 炎症作用研究 被引量:13 2020年 研究酱香型白酒中吡嗪类物质(BQL)对幽门螺杆菌代谢物(Helicobacter pylori Metabolites,HpM)诱导人 胃 上皮细胞 (GES-1)炎症的抑制作用。参照Leunk等人 的方法制备HpM并刺激GES-1细胞 ,建立炎症模型。ELISA法检测BQL对HpM诱导的GES-1细胞 活性及白细胞 介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞 介素-8(Interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)炎症因子分泌的影响。Western Blotting检测BQL-1对NF-κB,MAPK等信号通路的影响。BQL-1(2,3,5,6-四甲基吡嗪)组(0.08 mg/mL)逆转了由HpM诱发的细胞 活性降低(P>0.05),同时显著降低IL-8和TNF-α的分泌,促进IL-4的表达,减弱HpM对NF-κB,MAPK信号通路的影响。酱香型白酒中含有的吡嗪类物质具有一定的抗炎活性,可通过调控NF-κB和MAPK等信号通路、降低HpM诱导的炎症因子分泌发挥抗炎作用。 罗强 刘杰 刘志刚关键词:酱香型白酒 MAPK 姜黄素对人 胃 上皮细胞 GES-1放射性损伤的保护作用及其机制研究 目的: 研究姜黄素对人 胃 上皮细胞 GES-1的放射性损伤的影响,并对其抗氧化损伤及抗细胞 凋亡途径的机制进行探索,为胃 的放射性损伤的治疗提供新的可能治疗思路。 方法: 实验分为空白对照组、姜黄素组、辐照模型组、辐照+姜... 陈明道关键词:姜黄素 放射性损伤 文献传递 腹水草对人 胃 上皮细胞 GES-1的保护作用及其对PKA、CREB、AQP1的调控研究 被引量:4 2016年 [目的]研究腹水草(Veronicastrum axillare,V.axillare)含药血清对乙醇损伤的人 胃 上皮细胞 (gastric epithelial cells-1,GES-1)的保护作用及其对环腺苷酸依赖性激酶(protein kinase A,PKA)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP-response element binding protein,CREB)、水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)表达水平的调控作用。[方法]20只雄性SD大鼠随机分为5组(n=4),连续灌胃 给药14d,制备正常组(生理盐水20 m L·kg-1)、雷尼替丁组(0.027g·kg-1)以及V.axillare低、中、高剂量组(0.7、1.4、2.8 g·kg-1)含药血清。MTT法检测体外培养的GES-1细胞 的活性,研究V.axillare含药血清及PKA抑制剂H-89(25μmol·m L-1)预处理对5%乙醇诱导GES-1细胞 活力的影响。荧光定量RT-PCR检测PKA、CREB及AQP1 m RNA的表达水平,Western blot检测AQP1蛋白表达水平。[结果]模型组和H-89组GES-1细胞 活性低于正常组,差异有统计学意义(P<0.01);乙醇造模处理显著上调PKA、CREB及下调AQP1的表达水平,差异有统计学意义(P<0.01);H-89处理显著抑制PKA和CREB m RNA表达水平(P<0.01);加入各剂量V.axillare含药血清不能显著改善H-89对PKA、CREB和AQP1 m RNA表达水平的抑制作用。V.axillare中、高剂量含药血清细胞 活性高于模型组,PKA、CREB m RNA表达水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01),而V.axillare中、低剂量含药血清AQP1表达水平高于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]V.axillare含药血清显著减轻乙醇对GES-1细胞 的损伤,对GES-1细胞 具有保护作用,其保护机制与下调PKA、CREB及上调AQP1的表达有关。 徐艳山 赵伟春 王丹依 陈刚关键词:V. GES-1 AQP1 表达硫氧还蛋白1的幽门螺杆菌对人 胃 上皮细胞 株GES-1生长的影响 被引量:4 2015年 背景:幽门螺杆菌(Hp)感染在胃 癌的发生过程中发挥重要作用,细菌毒力因子是导致不同胃 疾病的重要因素。目的:研究高、低表达硫氧还蛋白1(Trx1)的Hp对人 胃 上皮细胞 株GES-1生长的作用。方法:按1∶50、1∶100、1∶200的细胞 /细菌比例分别加入GES-1细胞 和高、低表达Trx1的Hp菌株共培养,并设不加菌株的空白细胞 作为对照组,分别于培养24 h和48 h时采用倒置相差显微镜观察细胞 形态变化,MTT法检测细胞 存活率。收集1∶100浓度组和对照组GES-1细胞 ,采用流式细胞 术检测细胞 周期。结果:高、低表达Trx1的Hp对GES-1细胞 有损伤作用,细胞 存活率降低,且呈时间和浓度依赖性,在Trx1高表达组中尤为明显。流式细胞 术显示Trx1高表达组GES-1细胞 进入S期的比例在24 h和48 h均明显高于Trx1低表达组。结论:高、低表达Trx1的Hp对GES-1细胞 生长具有抑制作用,高表达Trx1的Hp具有更强的致病性,与致胃 癌作用有关。 刘琳娜 丁士刚 石岩岩 贾淑娟关键词:幽门螺杆菌 GES-1 细胞增殖 细胞周期
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朱丽华 作品数:79 被引量:241 H指数:7 供职机构:天津医科大学 研究主题:EB病毒 GES-1 人胃上皮细胞 EBV感染 胃肿瘤 李淑英 作品数:48 被引量:92 H指数:6 供职机构:河北联合大学 研究主题:EB病毒 EB病毒感染 胃癌患者 食管癌 人胃上皮细胞 周天戟 作品数:45 被引量:103 H指数:6 供职机构:江苏大学临床医学院 研究主题:EB病毒 EB病毒感染 胃肿瘤 GES-1 胃癌患者 习瑾昆 作品数:7 被引量:4 H指数:1 供职机构:华北煤炭医学院 研究主题:人胃上皮细胞 GES-1 GES-1细胞 BCL-2基因转染 胃上皮细胞 章广玲 作品数:77 被引量:189 H指数:7 供职机构:华北理工大学基础医学院 研究主题:大黄酸 肺癌 EB病毒 GES-1 医学微生物学