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利用虫草素在低氧条件下培养的肝细胞在制备治疗肝脏损伤的药物中的应用
本申请的一种利用虫草素在低氧条件下培养的肝细胞在制备治疗肝脏损伤的药物中的应用,其中,所述肝细胞的培养液包括基础培养基、5‑15μmol/L的虫草素,0.5‑4μg/mL的间充质干细胞条件性外泌体,培养条件为1%~6%的...
张莹彭青周树勤金美先
低氧条件下M2型巨噬细胞外泌体对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响机制
2025年
目的探究低氧条件下M2型巨噬细胞外泌体对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响机制。方法将鼠源性巨噬细胞系(RAW264.7)与鼠源性BMSCs系CP-M131细胞培养至第3代,用白细胞介素-4诱导巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞,提取并鉴定常氧与低氧培养条件下M2型巨噬细胞的外泌体。将CP-M131细胞分为PBS组、N-M2 exo组与H-M2 exo组,分别与PBS、90 ng/mL N-M2 exo及90 ng/mL H-M2 exo共孵育72 h。孵育结束后,通过免疫荧光观察BMSCs系CP-M131细胞对不同氧气条件下M2型巨噬细胞外泌体的摄取情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与Western blotting检测BMSCs中摄取不同实验组外泌体后骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、碱性磷酸酶(ALP)、成骨特异性转录因子(Runx)基因和蛋白表达,以及细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)的蛋白表达。采用ALP染色评估不同氧气条件M2型巨噬细胞外泌体对BMSCs成骨能力的影响。结果成功诱导巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞,且提取到不同处理组的外泌体。qRT-PCR和Western blotting结果表明,与N-M2 exo组比较,H-M2 exo组的CP-M131细胞BMP-2、ALP、Runx基因和蛋白表达均上调(P<0.05);H-M2 exo组的ERK与p-ERK蛋白表达均上调(P<0.05)。ALP染色观察到低氧条件下M2型巨噬细胞外泌体促进CP-M131细胞成骨分化。结论低氧条件下M2型巨噬细胞外泌体可以促进BMSCs成骨分化。
吕梦姣杨毅田晓寒廖礼彬阿不都热西提·库提彼丁王梦慈周晓丹袁孙强白生宾
关键词:骨髓间充质干细胞M2型巨噬细胞外泌体
利用虫草素在低氧条件下培养的肝细胞在制备治疗肝脏损伤的药物中的应用
本申请的一种利用虫草素在低氧条件下培养的肝细胞在制备治疗肝脏损伤的药物中的应用,其中,所述肝细胞的培养液包括基础培养基、5‑15μmol/L的虫草素,0.5‑4μg/mL的间充质干细胞条件性外泌体,培养条件为1%~6%的...
张莹 彭青 周树勤 金美先
一种脐带间充质干细胞扩增的低氧条件培养装置
本实用新型公开了一种脐带间充质干细胞扩增的低氧条件培养装置,包括培养箱体、安装盒和两个固定框架,所述培养箱体内转动设置有玻璃门,所述培养箱体前端转动设置有箱门,所述箱门前端面固定开设有视窗,所述箱门两侧内壁上均固定开设有...
武文杰苏相相冯蕊郑灿
慢性间歇性低氧条件下靶向封闭大麻素受体1对小鼠脾脏免疫功能及炎症反应的调节作用
2024年
目的观察靶向封闭大麻素受体1(CB1R)对慢性间歇性低氧(CIH)小鼠脾脏免疫功能及炎症反应的影响,探讨其调节作用。方法2021年5—8月,于山西医科大学第二医院实验动物中心选取40只4~5周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠,随机数字表法随机分为常氧对照组(NC组)、CIH 6周组(6w CIH组)、CIH 10周组(10w CIH组)、CIH+CB1R靶向封闭6周组(6w CIH+AM251组)、CIH+CB1R靶向封闭10周组(10w CIH+AM251组),使用高级可编程间歇低氧仓建立CIH小鼠模型。苏木精-伊红(HE)染色观察CIH小鼠脾脏组织的形态结构;免疫荧光检测小鼠脾脏M1、M2型巨噬细胞表面标志物CD86、CD206的表达,qRT-PCR技术检测脾脏组织中CB1R、CD86、CD206等基因的mRNA表达水平,以及辅助性T细胞(Th)17和调节性T细胞(Treg)特征性转录调节因子维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)和叉头框蛋白p3(Foxp3)的相对表达量。ELISA法测定炎症因子IL-6、IL-10的表达。采用SPSS 26.0和Graphpad prism 8.3软件分析数据。结果(1)与NC组相比,CIH组小鼠脾脏组织结构紊乱,纤维组织增生,小动脉周围淋巴鞘中淋巴细胞增生、排列紊乱;CIH组CB1R表达较NC组高(P<0.05),且10w CIH组较6w CIH组表达高(P<0.05),CIH+AM251组CB1R表达均低于对应的CIH组(均P<0.05);(2)与NC组比较,CIH组巨噬细胞CD86表达水平高于NC组;6w及10w CIH组RORγt相对表达量分别为0.76±0.03、0.91±0.04,均高于NC组的0.65±0.06(均P<0.05),炎症因子IL-6的相对表达量分别为10.80±1.73、14.86±0.01,均高于NC组的6.69±0.23(均P<0.05);6w及10w CIH+AM251组巨噬细胞CD206表达水平均高于对应的CIH组(P<0.05),6w及10w CIH+AM251组Foxp3相对表达量分别为0.62±0.05、0.32±0.21,均高于6w CIH组的0.28±0.02及10w CIH组的0.02±0.01(均P<0.05),抑炎因子IL-10相对表达量分别为668.45±15.71、379.15±56.84,表达水平均高于对应的CIH组(均P<0.05)。结论靶向封闭CB1R可通过调节小鼠脾脏巨噬细胞极化和炎性相关因子的表达,�
程晓倩石云霞巩艳平韩剑星王蓓
关键词:炎症慢性间歇性低氧大麻素受体
提高在冷冻保存及低氧条件下的存活率的心肌细胞聚集体制备技术
本发明涉及提高心肌细胞聚集体的长期保存有效性的方法,在利用本发明的方法的情况下,可以冷冻保存心肌细胞聚集体,从而可以扩大利用多能干细胞的类器官制备及利用类器官的新药开发等三维细胞结构体研究范围,不仅如此,在向体内移植后发...
文盛焕朴顺贞郑泽喜潘基沅
小分子药物联用在增强低氧条件下NK细胞的代谢、杀伤能力中的应用
本发明公开了一种小分子药物联用组合物在增强低氧条件下NK细胞的代谢、杀伤能力中的应用,所述联用组合物包含和厚朴酚和烟酰胺核苷,本发明首次发现和厚朴酚和烟酰胺核苷联合对NK细胞低氧条件下调节具有协同效果,能够显著增强NK细...
王毅金晶 颜培栋 李昀佳
甘草黄酮A对低氧条件下胃癌细胞增殖和糖酵解的影响
2024年
目的:探讨低氧条件下甘草黄酮A对胃癌细胞增殖和糖酵解的影响。方法:筛选人胃癌AGS细胞予以5%O2低氧环境培养48 h,分为5组:常氧组、低氧组、甘草黄酮A高、中、低浓度组(100、50、25μmol·L^(-1))。细胞增殖与活性检测(CCK-8)法和克隆形成实验检测甘草黄酮A对低氧条件下AGS细胞增殖的影响;划痕实验检测细胞迁移情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测AGS细胞中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、丙酮酸激酶M2(PKM2)、己糖激酶Ⅱ(HK2)的蛋白及mRNA表达水平。试剂盒检测葡萄糖摄取和HK的活性的表达情况。结果:CCK-8法实验结果表明,与低氧组比较,24 h时,甘草黄酮A高、中浓度组AGS细胞的增殖率显著降低(P<0.01),48 h时,甘草黄酮A高、中、低浓度组AGS细胞的增殖率显著降低(P<0.01)。克隆形成实验结果表明,与常氧组比较,低氧组AGS细胞克隆形成数显著升高(P<0.01);与低氧组比较,甘草黄铜A高、中、低浓度组AGS细胞的克隆形成数显著降低(P<0.01)。划痕实验表明,与常氧组比较,低氧组的AGS细胞迁移的能力升高(P<0.01);与低氧组比较,甘草黄酮A高、中、低浓度组的AGS细胞各个时间段迁移细胞的能力显著降低(P<0.01)。Real-time PCR表明,与常氧组比较,低氧组GLUT1、LDHA、PKM2和HK2 mRNA明显升高(P<0.05,P<0.01);与低氧组比较,甘草黄酮A高浓度组GLUT1、LDHA、PKM2、HK2 mRNA,甘草黄酮A中浓度组GLUT1、LDHA、HK2 mRNA、甘草黄酮A低浓度组HK2 mRNA明显降低(P<0.05,P<0.01)。Western blot表明,与常氧组比较,低氧组HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2和HK2蛋白的表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与低氧组比较,甘草黄酮A高浓度组的HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2和HK2蛋白的表达明显降低(P<0.05,P<0.01),甘草黄酮A中、低浓度的HK2蛋白的表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。试剂盒检测葡萄糖�
董焕成苏韫龚红霞曹旺杰袁敏捷刘永琦黄勇
关键词:胃癌低氧糖酵解增殖
低氧条件下HIF对间充质干细胞成骨分化影响的研究
2024年
骨不连和骨缺损是创伤骨科的重要问题。通过干细胞成骨分化来修复骨缺损及骨不连,将彻底改变传统的通过创伤较大的手术方式修复骨缺损的现状,迈入无创伤修复的新阶段。研究表明,氧环境切换可能会影响干细胞分化潜能,本文综述了近年来关于缺氧诱导因子(HIF)对于缺氧条件下的细胞调控,得出了HIF-2α可能是MSCs成骨分化的新解决方案这一结论。HIF-2α作为与慢性低氧环境调节相关的核心转录因子,在间充质干细胞增殖和分化中发挥重要作用。
王进王军宫明智
关键词:HIF间充质干细胞低氧
低氧条件下HIF-1α对骨生理中成骨和破骨的影响被引量:1
2024年
骨的吸收、生成及稳态的维持是建立在成骨和破骨事件基础上的,上述这些过程是由多种因子共同参与调控。其中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)作为低氧的标志物,已被证实参与了多种成骨及破骨过程。各种体内外低氧模型也提供了HIF-1α直接或间接调控成骨及破骨过程的相关证据,但其对成骨及破骨的影响及机制并未得到系统性总结。所以本文对HIF-1α参与成骨、破骨的调控机制及其所涉及的相关临床事件进行了综述。总的来说,低氧条件下HIF-1α主要是通过与成骨及破骨相关基因的缺氧反应元件(hy-poxia response element,HRE)结合从而直接参与成骨及破骨过程。除此之外,HIF-1α还可以通过增强糖酵解从而维持成骨及破骨能量的需求,但与此同时酸化的环境会进一步刺激破骨的产生。通过文献回顾,我们发现低氧条件下HIF-1α调控的成骨及破骨两种不同事件可能与低氧的持续时间和浓度有着密切联系,而不同氧条件下所导致的糖酵解的酸化程度可能是决定HIF-1α介导成骨和破骨走向的关键因素。低氧持续时间作为“低氧剂量”的一个组成部分对骨生理反应有着重要影响,同时其激发的HIF亚型转化这一现象对骨生理的影响也至关重要。据此本文通过对低氧下HIF-1α在成骨破骨进程的调控作用进行综述,以期为低氧下骨生理调控的相关机制提供一定的理论参考。
范智博魏绵兴李胜鸿(综述)徐晓梅(审校)
关键词:低氧缺氧诱导因子-1Α成骨破骨

相关作者

崔淑芳
作品数:199被引量:423H指数:14
供职机构:第二军医大学
研究主题:鼹鼠 体外细胞培养 低氧条件 生物学机制 纯化培养
杨文静
作品数:40被引量:14H指数:2
供职机构:第二军医大学
研究主题:体外细胞培养 生物学机制 低氧条件 纯化培养 功能活性
孙伟
作品数:150被引量:258H指数:10
供职机构:第二军医大学
研究主题:鼹鼠 体外细胞培养 生物学机制 低氧条件 纯化培养
汤球
作品数:142被引量:349H指数:12
供职机构:第二军医大学
研究主题:鼹鼠 纯化培养 体外细胞培养 生物学机制 低氧条件
丛薇
作品数:36被引量:10H指数:2
供职机构:第二军医大学
研究主题:体外细胞培养 低氧条件 生物学机制 纯化培养 分离培养方法