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稀土元素钇对体外 培养 成骨细胞 增殖、分化、矿化及凋亡的影响 被引量:1 2022年 目的:探讨稀土元素钇对成骨细胞 增殖、分化、矿化及凋亡的影响,为研究稀土元素钇对骨 质疏松的病理性发展提供一定理论指导。方法:⑴将成骨细胞 MC3T3-E1分为对照组(给予PBS)和给药组(给予YCl_(3)至各梯度最终浓度为1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6),1×10^(-5),1×10^(-4) mol·L^(-1)),利用CCK-8试验检测成骨细胞 增殖活力;⑵选取3个浓度梯度YCl_(3)(最终浓度为1×10^(-8),1×10^(-6),1×10^(-4) mol·L^(-1))处理成骨细胞 。采用NBT/BCIP试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)表达,根据吸光值分析ALP活性;采用茜素红S染色法检测细胞 矿化程度;采用AO/EB双染法测细胞 凋亡,利用荧光显微镜观察凋亡细胞 形态,分析荧光强度和凋亡情况。结果:稀土元素钇在低剂量(1×10^(-9) mol·L^(-1))时可促进MC3T3-E1细胞 增殖,且随着剂量的升高,钇细胞 增殖能力活性表现为抑制作用。在浓度为1×10^(-5) mol·L^(-1)时,钇可显著抑制细胞 增殖活性。同时,稀土元素钇对细胞 ALP活性也表现为低促高抑现象,在浓度为1×10^(-8) mol·L^(-1)时,钇提高了ALP活性,而在浓度高于1×10^(-6) mol·L^(-1)时,ALP活性显著降低。钇显著抑制细胞 矿化、诱导细胞 凋亡,呈剂量依赖性。结论:稀土元素钇对体外 培养 MC3T3-E1细胞 增殖、分化、矿化及凋亡具有一定的毒性作用,呈剂量依赖性。 唐春芳 刘喆豪 吴龙火关键词:钇 ALP活性 细胞矿化 松脂醇二葡萄糖苷促进体外 培养 成骨细胞 骨 形成 的作用研究 被引量:7 2021年 目的探讨松脂醇二葡萄糖苷对体外 培养 成骨细胞 骨 形成 的作用。方法应用分次酶消化法得到大鼠乳鼠颅骨 成骨细胞 ,随机分为空白组和实验组,通过不同浓度松脂醇二葡萄糖苷处理检测成骨细胞 碱性磷酸酶活性,确定最佳作用浓度后行钙化结节染色,检测成骨细胞 成 骨 相关蛋白和基因表达情况。结果松脂醇二葡萄糖苷处理成骨细胞 的最佳作用浓度为1×10^(-6) mol/L(P<0.01)。1×10^(-6) mol/L松脂醇二葡萄糖苷处理成骨细胞 后钙化结节形成 程度明显高于空白组。与空白组相比,1×10^(-6) mol/L松脂醇二葡萄糖苷处理后成骨细胞 BMP-2、RUNX-2和OSX基因和蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论1×10^(-6) mol/L松脂醇二葡萄糖苷可以促进体外 培养 成骨细胞 的骨 形成 ,增加钙化结节面积,并可升高成 骨 相关蛋白基因表达水平。 吴思敏 孙薇 高玉海 任莉 陈克明关键词:成骨细胞 松脂醇二葡萄糖苷 成骨活性 碱性磷酸酶 松脂醇二葡萄糖苷对体外 培养 成骨细胞 成 骨 性分化的影响与机制研究 骨 质疏松症(Osteoporosis,OP)是一种严重困扰中老年健康的代谢性骨 病,目前还没有理想的治疗药物,虽然双膦酸盐已非常普及,但其口服的吸收性不好,并且有明显的副作用。因此,寻找新的安全有效的抗骨 质疏松药物仍是一项... 吴思敏关键词:骨质疏松症 成骨细胞 松脂醇二葡萄糖苷 碱性磷酸酶 成骨性分化 脉冲群电磁场对体外 培养 成骨细胞 增殖与矿化的影响 被引量:1 2021年 目的研究脉冲群电磁场对体外 培养 大鼠成骨细胞 (ROBs)增殖与矿化的影响。方法将原代培养 大鼠乳鼠颅骨 成骨细胞 随机分为对照组、脉冲组、脉冲群组,对照组:将ROBs放入线圈内90 min/d,但不通电;脉冲组:ROBs予50 Hz、0.6 mT、占空比为50%的脉冲电磁场处理90 min/d;脉冲群组:ROBs予主脉冲频率10 Hz、子脉冲频率500 Hz、0.6 mT的脉冲电磁场处理90 min/d。分别检测3组细胞 增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、钙化结节数量和面积及骨 形成 相关因子ALP、BMP-2、RUNX-2、OSX的基因表达情况。结果处理3 d后,与对照组相比,脉冲组和脉冲群组均可显著刺激细胞 增殖(P<0.01)。处理6、9 d后脉冲组ALP活性显著高于对照组(P<0.01),而处理3、6、9 d后脉冲群组ALP活性均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。处理12 d后,脉冲群组和脉冲组钙化结节数量多于对照组,钙化结节面积大于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。处理3 d后,脉冲群组和脉冲组ALP、BMP-2、RUNX-2和OSX基因表达水平均显著高于对照组(P<0.01)。脉冲群组仅处理3 d后ALP活性显著高于脉冲组(P<0.05),余指标虽高于脉冲组,但比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论脉冲群电磁场可促进体外 培养 ROBs的增殖与矿化,可为促进骨 形成 提供更为广阔的研究思路。 高玉海 何文芳 刘菁 任莉 吴思敏 陈克明关键词:电磁场 成骨细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶 骨 折合并脑外伤对体外 培养 成骨细胞 cbfa1和osterix表达的影响2020年 目的:探讨骨 折合并脑外伤对体外 培养 成骨细胞 cbfa1和osterix表达的影响.方法:取骨 折合并脑外伤或单纯骨 折患者术后人体股骨 头,进行传代培养 .实时荧光定量PCR分别检测成骨细胞 活性因子Cbfa1(核心结合因子)和Osterix(锌指转录因子)表达水平,监测成骨细胞 总RNA质量及相关基因相对表达量.结果:经分光光度计D260/D280测定,成骨细胞 总RNA值均在1.8~2.1之间.随着培养 时间的延长,BMP-2、Smad1、Smad5、Smad4、Runx2、Osterix及OCN的mRNA表达上调.经甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分析,结果提示RNA未被降解.骨 折合并脑外伤成骨细胞 cbfa1和osterix基因表达水平均显著高于单纯骨 折成骨细胞 (P<0.05).结论:脑外伤可能通过促进cbfa1和osterix基因表达,加速了骨 折的愈合过程. 董一真关键词:骨折 脑外伤 CBFA1 OSTERIX 异烟肼、利福平联合应用对体外 培养 成骨细胞 生物活性的影响 被引量:3 2019年 目的研究不同浓度的异烟肼(isoniazid,INH)、利福平(rifampin,RFP)联合应用对大鼠成骨细胞 (osteoblast,OB)增殖、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、I型胶原蛋白表达和成骨细胞 成 熟与矿化能力的影响。方法分离、培养 新生SD大鼠乳鼠颅骨 OB,分别采用CCK-8法、碱性磷酸酶试剂盒检测ALP活性、免疫荧光染色法和茜素红染色法检测,观察不同浓度INH+RFP [(10+3)μg/mL、(20+6)μg/mL、(30+12)μg/mL、(40+24)μg/mL、(50+48)μg/mL]对成骨细胞 增殖、ALP活性、Ⅰ型胶原蛋白表达以及矿化能力的影响。结果与对照组相比,当INH+RFP的浓度在(20+6)μg/mL及以上时,抑制大鼠OB增殖、I型胶原合成 、使ALP活性及矿化能力显著下降(P<0.05),且均随着浓度增加而加强抑制作用。结论 INH、RFP联合用药较低浓度对成骨细胞 有抑制作用,因此,骨 关节结核病灶清除术后,局部用药应该严格控制药物浓度。 马永海 巩栋 王伟 邵陇龙 甄平关键词:异烟肼 利福平 成骨细胞 碱性磷酸酶 地塞米松诱导体外 培养 成骨细胞 凋亡作用机制的研究 被引量:1 2018年 目的研究地塞米松对体外 培养 的成骨细胞 增殖和凋亡的影响,及其可能的作用机制。
方法体外 分离培养 SD大鼠成骨细胞 ,观察细胞 形态,应用碱性磷酸酶染色法和茜素红染色法鉴定成骨细胞 。取1~3代对数生长期细胞 ,分为空白对照组、低剂量地塞米松组(10-8 mol/L)、中剂量地塞米松组(10-7 mol/L)、高剂量地塞米松组(10-6 mol/L),分别干预12、24、48 h,运用Cell Counting Kit-8法检测细胞 增殖情况,采用Annexin V/PI双染法流式细胞 术检测细胞 凋亡率,免疫荧光法观察细胞 核的形态和caspase-3的表达,蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bad、caspase-3、磷酸化Akt的表达。采用单因素方差分析,两两比较方差齐采用LSD-t法进行统计分析。
结果10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6 mol/L地塞米松能抑制成骨细胞 增殖,以48 h最为明显(A值分别为:0.980±0.028,0.798±0.057,0.728±0.031),与空白对照组(1.143±0.017)相比,差异有统计学意义(t=5.454,11.555,13.908;P均〈0.05);不同浓度地塞米松干预48 h后,成骨细胞 凋亡率逐渐升高。与空白对照组[(4.1±0.8)%]相比,10-8 mol/L地塞米松组细胞 凋亡率[(4.9±1.2)%]升高差异无统计学意义(t=0.470,P〉0.05),10-7 mol/L、10-6 mol/L地塞米松组的成骨细胞 凋亡率分别为(9.8± 2.6)%、(12.4±2.6)%,呈显著性升高(t=3.508,5.140,P均〈0.05);免疫荧光检测结果显示,不同时间地塞米松作用后,成骨细胞 caspase-3表达逐渐增强,其中10-7 mol/L、10-6 mol/L地塞米松组的caspase-3表达显著增加(t=4.320,t=8.475;P〈0.05);蛋白质印迹法检测结果显示,地塞米松干预浓度为10-7 mol/L和10-6 mol/L时,Bcl-2蛋白表达分别较空白对照组减少53.8%、78.4%(t=4.109,5.988;P〈0.05),p-Akt蛋白表达分别减少37%、49.6%(t=2.067,3.491;P〈0.05),Bad蛋白表达分别增加276.9%、334.8%(t=7.342,8.872� 潘吉铭 蔡劲薇 伍龙果 梁敏关键词:地塞米松 骨质疏松 P13K/AKT 不同浓度表儿茶素没食子酸酯对体外 培养 成骨细胞 的影响 被引量:5 2018年 目的研究不同浓度表儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)对体外 培养 成骨细胞 的影响,确定最大作用浓度(最大抑制浓度或促进浓度)。方法取新生SD大鼠的颅骨 进行成骨细胞 诱导培养 ,第3代细胞 中分别加入浓度为0、1、10、20、30和40μmol/L的EGCG+含10%胎牛血清DMEM培养 基培养 。应用CCK-8法、茜素红染色和硝酸银染色法、ELISA法观察并测定EGCG对体外 培养 成骨细胞 的增殖、矿化结节形成 及血管内皮生长因子(VEGF)的影响。结果与0μmol/L浓度组比较,EGCG(10~20)μmol/L浓度组具有明显促进增殖的作用;30μmol/L及以上浓度组表现出对大鼠成骨细胞 的抑制作用;在不同浓度EGCG中培养 7 d或14 d,可以清晰观察到矿化组织形成 ,(10~20)μmol/L EGCG培养 的细胞 矿化结节形成 数量显著多于对照组;血管内皮生长因子(VEGF)检测显示EGCG(10~20)μmol/L浓度组促进成骨细胞 分泌VEGF的作用最强,30μmol/L及以上浓度对VEGF的分泌具有抑制作用。结论 EGCG(10~20)μmol/L浓度组对体外 培养 的成骨细胞 有明显的促进增殖作用,30μmol/L及以上浓度组表现出对成骨细胞 的抑制作用。 谢睿锋 李岩 王东关键词:骨质疏松 氧化应激 成骨细胞 不同浓度表儿茶素没食子酸酯对体外 培养 成骨细胞 的影响 目的: 研究不同浓度表儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate , EGCG)对体外 培养 成骨细胞 的影响,确定最大作用浓度(最大抑制浓度或促进浓度)。 方法: 取新生SD大鼠的颅骨 进行成 骨 细... 谢睿锋关键词:骨质疏松 氧化应激 成骨细胞 淫羊藿苷促进体外 培养 成骨细胞 增殖动态观察 被引量:7 2018年 目的:动态观察淫羊藿苷(ICA)对体外 培养 成骨细胞 的影响并探讨可能机制。方法:采用h FOB1.19人成骨细胞 株体外 构建人成骨细胞 系,用一定浓度淫羊藿苷干预0、24、48、72 h后,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法观察成骨细胞 增殖率,Western blotting检测OPG和BMP-2蛋白表达,实时荧光定量RT-PCR检测成骨细胞 中BMP-2、OPG、ALP m RNA的表达。结果:MTT法检测表明48 h后终浓度为30μg/m L的ICA明显促进成骨细胞 的增殖,与空白组相比有显著性差异(P〈0.01);Western blotting检测能增强BMP-2、OPG表达;PCR结果显示,随时间延长,ICA明显上调BMP-2、OPG、ALP m RNA的表达,相对表达水平是加入前的3.1-7.5倍。结论:淫羊藿苷促进体外 培养 成骨细胞 增殖,可能通过促进BMP-2、OPG蛋白表达和上调BMP-2、OPG、ALP m RNA的表达介导完成 ,为治疗各类骨 疾病提供良好方向。 谢利娜 刘艳辉 景向东关键词:淫羊藿苷 成骨细胞 增殖
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王洪复 作品数:196 被引量:1,207 H指数:18 供职机构:上海医科大学上海医学院放射医学研究所 研究主题:骨质疏松 成骨细胞 骨质疏松症 破骨细胞 骨代谢 陈克明 作品数:401 被引量:1,876 H指数:23 供职机构:中国人民解放军 研究主题:成骨细胞 淫羊藿苷 骨密度 成骨性分化 峰值骨量 周建 作品数:132 被引量:469 H指数:14 供职机构:兰州军区兰州总医院 研究主题:成骨细胞 淫羊藿苷 成骨性分化 骨密度 脉冲电磁场 葛宝丰 作品数:609 被引量:2,894 H指数:26 供职机构:兰州军区兰州总医院 研究主题:成骨细胞 骨髓基质干细胞 骨质疏松 淫羊藿苷 外科手术 季晖 作品数:292 被引量:2,645 H指数:26 供职机构:中国药科大学药学院 研究主题:一氧化氮供体 一氧化氮 骨质疏松 抗炎活性 胃肠道副作用