公共文化服务平台

搜索到567篇“ 体外定向“的相关文章

人诱导多能干细胞来源功能性胰岛β细胞的体外定向分化方法的建立: 2024年; 1型糖尿病是由胰岛β细胞功能受损、胰岛素分泌不足所致,目前,主要通过外源性胰岛素补充来治疗,但外源性胰岛素无法精准调控血糖,严重低血糖可危及生命。胰岛移植是一种替代疗法,但面临器官供体不足和异种来源胰岛β细胞存在人畜共患病交叉感染风险的问题。因此,获得足量且安全的胰岛β细胞是1型糖尿病细胞治疗面临的难题。本研究旨在通过人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)在体外向胰岛β细胞分化,提供一种潜在的1型糖尿病治疗新策略。为实现这一目标,我们采用了结合2D和3D培养系统的分化策略,模拟胰岛β细胞的体内发育环境,并使用多种生长因子调节在胰腺发育和β细胞分化中发挥重要作用的关键信号包括Notch信号通路(Notch signaling pathway)、Wnt信号通路(Wnt signaling pathway)、TGF-β/Smad信号通路(TGF-β/Smad signaling pathway)等,在体外将hiPSC定向诱导分化至胰岛β细胞。结果显示,在2D、3D结合的培养条件下,分化过程中定型内胚层细胞,胰腺祖细胞,胰腺内分泌细胞及胰岛β细胞阶段的特异性基因的表达显著提高(P<0.05),并在胰岛素含量及葡萄糖刺激后表现出显著增强的胰岛素分泌能力(P<0.05)。总之,本研究成功建立了一种从hiPSC到功能性胰岛β细胞的分化策略,为1型糖尿病提供了一种新的细胞治疗途径。这种方法不仅为研究胰岛β细胞的发育生物学提供了新的工具,也为临床应用提供了一种潜在的胰岛β细胞来源,有望解决现有治疗方法的局限性。; 陈馨雅陈龙王玉姣薛群航冯志伟刘志贞周冰蕊解军; 关键词：体外诱导分化胰岛Β细胞

甘草酸应用及可体外定向获得免疫细胞的方法: 本发明公开了甘草酸应用及可体外定向获得免疫细胞的方法，通过甘草酸体外诱导小鼠造血干细胞(HSC)向T/B细胞分化的中，发现其可以显著提高HSC向CD8+T细胞分化的数量和B细胞的数量，在体内，通过尾静脉短期注射12月小鼠...; 刘海亮

人多能干细胞向成熟肝细胞体外定向分化的高效方法: 本发明提供了一种人多能干细胞向成熟肝细胞体外定向分化的高效方法，该方法分化得到的肝细胞更具备原代肝细胞的形态特征，ALB阳性细胞占95%以上，CYP3A4表达超过80%，说明在诱导效率得到保证的前提下，实现肝细胞的高成熟...; 吴芬芳吴迪陈小妮

人多能干细胞向成熟肝细胞体外定向分化的高效方法: 本发明提供了一种人多能干细胞向成熟肝细胞体外定向分化的高效方法，该方法分化得到的肝细胞更具备原代肝细胞的形态特征，ALB阳性细胞占95%以上，CYP3A4表达超过80%，说明在诱导效率得到保证的前提下，实现肝细胞的高成熟...; 吴芬芳吴迪陈小妮

草生欧文氏菌中酪氨酸酚裂解酶的体外定向进化及结构模拟: 2023年; 以来源于草生欧文氏菌(Erwinia herbicola)的酪氨酸酚裂解酶(Eh-TPL)为目的基因,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,利用高通量筛选方法获得了比酶活提高的突变体S20C和E202R,再通过定点突变得到突变体S20C/E202R/N161S。经摇瓶发酵培养发现,突变体S20C/E202R/N161S比野生型Eh-TPL的比酶活提高了30.61%;酶学性质研究结果表明,突变体S20C/E202R/N161S的最适温度仍为37℃,最适pH值从8.2升至8.5,热稳定性、pH稳定性均得到明显提高;结构模拟结果表明,突变体S20C/E202R/N161S的三维结构无明显变化,突变位点附近氢键和表面电势有所变化。体外定向进化技术能有效提高Eh-TPL的催化效率,对酶法生产L-酪氨酸具有重要应用价值。; 郭小雷; 关键词：易错PCR 定向进化 L-酪氨酸

一种用于四肢骨折盲锁髓内针的体外定向装置: 本实用新型公开了一种用于四肢骨折盲锁髓内针的体外定向装置，其包括手把、内螺纹旋钮和导杆，导杆上等距开有多组一级导向孔，导杆前后两侧均开有滑槽，手把呈L型并且倒置，手把顶部固定连接有两组与一级导向孔契合的限位螺柱，两组限位...; 钱冬晨

甘草酸应用及可体外定向获得免疫细胞的方法: 本发明公开了甘草酸应用及可体外定向获得免疫细胞的方法，通过甘草酸体外诱导小鼠造血干细胞(HSC)向T/B细胞分化的中，发现其可以显著提高HSC向CD8+T细胞分化的数量和B细胞的数量，在体内，通过尾静脉短期注射12月小鼠...; 刘海亮

转座酶TN3体外定向进化研究概况被引量：1: 2020年; Tn3是存在于生物体内的一种非常重要的转座酶,其是基因组中具有一段特异的转位特性的独立的DNA序列,从而对目的基因起调控作用。转座酶Tn3具有基因敲除的功能,Gal4能识别DNA启动子上游两端保守的17bp长的一段序列,因此将Tn3与Gal4相组合,实现靶向敲除目的基因的目的。论文综述了转座酶Tn3的结构及其转座机制、Gal4的结构及其机制、Tn3-Gal4系统的简介和酶分子的定向进化,旨在为今后靶向基因的敲除以及靶向基因的修复提供研究思路。; 马围围曾素先宋尚桥王睿敏严瑾孙翠翠李鑫黎宗强; 关键词：转座酶基因敲除定向进化

转座酶Tn3体外定向进化和酶活力提高方法的建立: 2020年; 试验旨在对转座酶Tn3的酶活力提高和进化进行初步探索。采用PCR扩增、限制性酶切、DNA连接、重组质粒的转化、易错PCR的优化及构建、D值的测定、酶切鉴定方法对转座酶Tn3进行体外定向进化研究。结果表明,用SacⅠ和XbaⅠ对重组质粒进行酶切,得到了450 bp的酶切产物;在含有卡那霉素的LB培养基培养菌体24 h,测量其D值,经过3轮重复性的研究,其D值和增殖能力从开始的0上升至0.18、0.42、0.60,说明Tn3活性有了明显的提高;将筛选得到的进化型重组质粒进行质粒抽提,用内切酶XhoⅠ和XbaⅠ进行双酶切鉴定,发现进化型重组质粒酶切产物条带相对较小;之后对进化型重组质粒进行基因测序分析,发现Tn 3基因序列的多个位点发生了突变以及Tn3-Gal4靶向序列中间的CCR5-delta32基因被切除。说明成功完成了转座酶Tn 3基因的克隆;确立了易错PCR的最优反应体系;选择卡那霉素作为筛选标记对进化型Tn3进行筛选,初步验证利用含有卡那霉素的LB培养基和对菌液D值的测定来进行筛选是可行的;Tn 3基因序列突变和基因敲除,说明不论是在功能上还是在基因序列上Tn3都发生了改变,这种变化正是向着需要的方向进行的。; 宋尚桥马围围李晓剑曾素先李鑫严瑾孙翠翠黎宗强; 关键词：易错PCR 定向进化基因序列

体外定向诱导EVT及环孢素A对其功能影响的初步探讨: 背景绒毛外滋养细胞（Extravillous trophoblast,EVT）在母胎界面中起着至关重要的作用。尽管大量研究发现EVT发育异常和/或迁移和侵袭功能异常与子痫前期（Pre-eclampsia,PE）发生发展密...; 汪佳星; 关键词：绒毛外滋养细胞人胚胎干细胞环孢菌素A; 文献传递

加载更多 ∨

相关作者

用户反馈

相关作者

用户登录

用户反馈