搜索到1082篇“ 假病毒“的相关文章
- 一种假病毒颗粒的制备方法
- 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种假病毒颗粒的制备方法。本发明将狂犬病毒糖蛋白G的胞外结构域的一部分和整个跨膜结构域与VSV‑G融合得到新的包膜质粒,发现这可以显著提升狂犬病毒假病毒的包装效率和稳定性。得到的假病毒...
- 林婧雍雪青范宇辰张雨晨
- 一种口蹄疫假病毒细胞培养系统及其应用
- 本发明公开了一种口蹄疫假病毒细胞培养系统及其应用。本发明属于生物技术领域。本发明提供的一种细胞培养系统,可用于生产具有转录和复制能力的口蹄疫假病毒(FMDV‑trVLPs),但其不具有活病毒的感染性。该系统由Nluc替换...
- 孙世琪郭慧琛周海纤任玫吴金恩谭书桢张韵董虎滕志东白满元周静静穆素雨
- 高产HPV33亚型假病毒的重组质粒及其应用
- 本申请属于基因工程技术领域,具体涉及高产HPV33亚型假病毒的重组质粒及其应用。本申请提供了经过密码子优化后的能够提升HPV33亚型假病毒产量的衣壳蛋白L1和L2的编码基因序列,分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID...
- 田宁王东波廖建宇
- 一种HCoV-NL63假病毒及其制备方法和用途
- 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种HCoV‑NL63假病毒及其制备方法和用途,通过对几种含有缺失部分C端氨基酸的截短型S蛋白的HCoV‑NL63假病毒(NL63pp)进行了比较分析。本发明发现,删除S蛋白C端14个氨基...
- 王学军王升启邵丽婷王明明李恬王飞
- 高产HPV52亚型假病毒的重组质粒及其应用
- 本申请属于基因工程技术领域,具体涉及高产HPV52亚型假病毒的重组质粒及其应用。本申请提供了经过密码子优化后的能够提升HPV52亚型假病毒产量的衣壳蛋白L1和L2的编码基因序列,分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID...
- 田宁王东波廖建宇
- 一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法
- 本发明提供了一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法,通过在293T、293T‑CD4、293T‑ACE2等不同细胞系中分别接种狂犬病毒、HIV病毒、新型冠状病毒假病毒并进行梯度稀释试验,结合改进型Reed‑Muench...
- 林婧张雨晨雍雪青范宇辰
- 一种基于重组型VSV载体的新型登革假病毒及其制备方法
- 本发明提供了一种利用重组水疱性口炎病毒载体(rVSV)制备的新型登革假病毒,还公开了该类假病毒的制备方法,包括:4种血清型登革病毒的NS1基因的选择,全部4种嵌合蛋白标签的NS1基因DNA片段的获得,NS1基因DNA片段...
- 王海燕
- 一种禽黄病毒NS1反式互补的假病毒系统和应用
- 本发明中公开了一种禽黄病毒NS1反式互补的假病毒系统和应用。本发明中的假病毒系统利用慢病毒包装法构建了稳定表达携带V5标签的USUV‑NS1蛋白的BHK21细胞系,即BHK21‑NS1稳转细胞系;同时,本发明在USUV的...
- 陈舜贺煜石炎凡吴震王涛程安春汪铭书
- 内含赤羽病病毒S基因假病毒的构建、鉴定及初步应用
- 2025年
- 为制备赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)核酸诊断试剂中的阳性对照品,本研究首先合成AKAV S全基因,然后构建重组慢病毒穿梭载体pLenti-GIII-CMV-CBH-GFP-2A-Puro-AKAV,并将测序鉴定成功的重组慢病毒穿梭载体与包装载体共转染293T细胞;收获纯化的细胞培养液上清,进行核酸质粒残留检测;将上清感染293T细胞,观察绿色荧光蛋白基因表达情况,并采用RT-PCR和荧光定量RT-PCR试验检测上清中是否存在AKAV S基因片段,最终通过数字RT-PCR方法进行绝对定值。结果显示;纯化的细胞培养液上清中无核酸质粒残留,在培养72 h的293T细胞中可观察到绿色荧光;采用RT-PCR和荧光定量RT-PCR试验均可扩增出AKAV S基因目的片段;采用数字RT-PCR方法,将制备的假病毒溶液拷贝数浓度定值为3.36×10^(3)copies/μL。结果表明,本研究成功构建了含AKAV S全基因片段的假病毒,可作为AKAV核酸检测的阳性对照品,为后续研发AKAV核酸诊断试剂盒奠定了基础。
- 李超潘俊慧王素春隋金钰魏世萌祁倩吴发兴李博文王楷宬
- 关键词:赤羽病病毒S基因
- AAV载体-HPV16-HPV18-HPyV假病毒的构建及其在干细胞人源病毒检查中的应用
- 2025年
- 目的:以腺相关病毒为载体设计和制备同时含有多种DNA病毒基因片段的假病毒,作为阳性对照品用于分子检测领域的人源病毒检测,弥补病毒分子检测方法缺少野生型病毒对照的不足。方法:采用腺相关病毒载体作为假病毒的骨架,分别将人乳头瘤病毒16型(HPV16)、18型(包括HPV18-1、HPV18-2)和人多瘤病毒HPyV 3种病毒共4个目的基因片段插入到1个病毒载体,通过多质粒共转染的方法进行腺相关病毒假病毒的包装。通过细胞感染实验确认假病毒的感染活性并应用荧光定量PCR法对假病毒基因组进行定量分析。结果:荧光定量PCR检测,假病毒中HPV16、HPV18-1、HPV18-2和HPy V基因组滴度分别为7.77×10^(8)、6.77×10^(8)、7.04×10^(8)、1.24×10^(9)copies·mL^(-1)。假病毒感染293T/17细胞48 h后,用荧光定量PCR可检测到细胞内假病毒包装的HPV16、HPV18-1、HPV18-2和HPy V的病毒基因序列,其拷贝数分别为1.30×10^(6)、6.59×10^(5)、6.27×10^(5)、4.17×10^(6)copies·mL^(-1)。平行实验制备的报告基因假病毒感染293T/17细胞48 h后,该细胞在荧光显微镜下可观察到明显的绿色荧光,进一步表明该假病毒具有感染活性。假病毒作为阳性对照在人间充质干细胞进行适用性验证,4种病毒基因片段的核酸提取荧光定量PCR回收率分别为94.4%、70.7%、83.1%和90.9%。结论:本研究腺相关病毒包装方法可以产生具有感染活性的多病毒基因假病毒,该假病毒在干细胞样品病毒荧光定量PCR检查中可作为阳性对照代替多种野生型病毒,不仅降低了阳性对照制备成本,而且更具有生物安全性,在提高检测效率的同时,还能够更好地对qPCR方法从基因提取到基因扩增整个流程进行质量控制。
- 张峒陈晓菲董莹莹曹译丹王艳辉李慧婷刘明月王新乐崔梦姗付欣悦张瑞瑞庞琳饶春明
- 关键词:滴度
相关作者
- 王佑春

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- 聂建辉

- 作品数:91被引量:104H指数:5
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- 黄维金

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- 高福

- 作品数:474被引量:1,557H指数:15
- 供职机构:中国科学院微生物研究所
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- 吴星

- 作品数:100被引量:229H指数:8
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