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弥漫性大B细胞淋巴瘤患者外周血T细胞受体Vα与T细胞受体Vβ亚家族T淋巴细胞的分布与克隆性增殖特点被引量：1: 2015年; 目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者外周血T淋巴细胞表达的T细胞受体（TCR）Vα与TCR Vβ亚家族基因谱系及克隆性增殖情况.方法选取2006年4～5月及7月,于广州医科大学附属第一医院肿瘤血液科收治的3例DLBCL患者作为研究对象,并纳入研究组;选取同期于本院体检的3例健康个体纳入对照组.本研究遵循的程序符合广州医科大学附属第一医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书.两组受试对象性别与年龄等一般临床病历资料比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.通过本院检验科采集研究组与对照组血液10 mL,采用实时聚合酶链式反应（RT-PCR）方法扩增两组受试者外周血T淋巴细胞中29个TCRVα与24个TCR Vβ亚家族基因的互补决定区（CDR）3,采用基因扫描分析两组RT-PCR产物的CDR3序列及其长度.回顾性分析研究组和对照组的临床数据：对比分析TCR Vα与TCR Vβ亚家族基因在两组受试者T淋巴细胞中的表达情况,以及分析研究组T淋巴细胞克隆性增殖的特点.结果 ①与对照组外周血T淋巴细胞表达全部的29个TCR Vα与24个TCR Vβ亚家族基因不同,研究组3例DLBCL患者外周血T淋巴细胞表达TCR Vα亚家族基因成员的数量为20～22个,表达TCR Vβ亚家族基因成员的数量为9～17个.②3例DLBCL患者均存在寡克隆、双克隆或克隆性增殖趋势的T淋巴细胞,其中克隆性增殖T淋巴细胞表达TCR Vα亚家族基因成员主要为TCR Vα6、Vα8、Vα14、Vα15、Vα21、Vα22、Vα23及Vα25.克隆性T淋巴细胞表达TCR Vβ亚家族基因成员主要为TCR Vβ1、Vβ3、Vβ13、Vβ15及Vβ16.表达TCR Vα6、Vα8、Vα14、Vα15、Vα23及TCR Vβ13、Vβ15亚家族基因的T淋巴细胞均全部为克隆性增殖T淋巴细胞.TCR Vα6、Vα23亚家族T淋巴细胞与TCR Vβ3、Vβ13亚家族T淋巴细胞呈明显; 叶静梅谭获李扬秋; 关键词：T淋巴细胞

bcr-abl多肽诱导健康人外周血αβ^+T细胞克隆性增殖: 2011年; 目的分析bcr-abl多肽诱导健康人外周血T细胞TCR Vα和TCR Vβ基因选用和克隆性增殖情况,了解bcr-abl多肽相关的αβ+T细胞克隆。方法利用T细胞液体培养法,应用bcr-abl多肽(KQSSKALQR)联合IL-2+抗CD3单抗+抗CD28单抗体外诱导T细胞(HLA-A0201限制性)扩增,同时设不含多肽诱导为对照组。收集诱导后第10、18天的细胞,RT-PCR-基因扫描分析其TCR Vα和Vβ基因谱系变化特点。结果①诱导前健康成年供者的PBMCs可检测到20个TCR Vα亚家族(其中Vα6、Vα14、Vα16亚家族呈寡克隆性)和22个TCR Vβ亚家族(其中Vβ21亚家族呈寡克隆性);②与诱导前相比,TCR Vα亚家族数目无明显变化,诱导第10、18天对照组中TCR Vα亚家族均表达21个亚家族,实验组中分别检测到22、18个TCR Vα亚家族;而TCR Vβ亚家族在诱导后则明显减少,诱导第10、18天对照组中分别检测到15、12个TCR Vβ亚家族,实验组中分别检测到13、11个TCR Vβ亚家族;③bcr-abl多肽诱导后,TCR Vα11呈克隆性增殖趋势,Vβ22和Vβ24亚家族T细胞由多克隆性演变为寡克隆性增殖趋势。结论获得bcr-abl多肽诱导的特定正常αβ+T细胞(HLA-A0201限制性)克隆性增殖,这些选择性增殖的T细胞可能是具有针对bcr-abl抗原特异的T细胞。; 李闯杨力建陈少华李扬秋; 关键词：T细胞基因扫描克隆性

急性髓细胞白血病患者外周血T细胞TCRVβ亚家族表达及克隆性增殖分析: 目的:探讨AML患者在初发、治疗缓解、复发等不同疾病状态下外周血T细胞及AML细胞体外诱导自体T细胞的TCR Vβ亚家族利用及克隆性增殖情况,为利用AML细胞特异性TCRVβT细胞进行细胞免疫治疗以清除微小残留病变/(M...; 罗畅如; 关键词：急性髓细胞性白血病 VΒ亚家族克隆性

急性髓系白血病患者外周血T细胞TCR Vβ亚家族表达及克隆性增殖分析: 2009年; 本研究探讨AML患者在初发、治疗缓解后、复发等不同疾病状态下外周血T细胞TCRVβ亚家族表达及T细胞克隆性增殖的情况,分析不同白血病细胞负荷对患者外周血T淋巴细胞数量及功能,尤其是对抗白血病功能的影响。应用RT-PCR扩增11例AML白血病患者不同疾病状态下及3名正常供者外周血的TCRBV24个家族的基因序列,通过基因扫描(genescan)的方法判断TCRBV家族的克隆表达、CDR3克隆性质,比较不同疾病状态下白血病患者外周血T细胞的Vβ亚家族的应用、克隆性增殖、T细胞的复杂性以及T细胞免疫表型的变化。结果表明:11例AML白血病患者初诊时外周血T细胞均表达部分TCRVβ亚家族,经体外诱导后TCRVβ亚家族表达增加;完全缓解期患者外周血T细胞TCRVβ亚家族数量明显增多,但未达到完全正常;4例患者在复发时TCRVβ亚家族表达数量明显下降;11例患者中有9例在初诊时外周血有1至2个TCRVβ亚家族T细胞克隆性增殖,缓解期克隆性增殖的Vβ亚家族T细胞有增加趋势,在多数病例观察到部分Vβ亚家族T细胞在初发、缓解、体外诱导扩增以及复发时仍维持克隆性增殖状态;AML白血病患者初发及复发时T细胞CDR3复杂性明显降低,呈偏态分布,而疾病缓解时T细胞复杂性有所改善。结论:AML白血病患者外周血T细胞TCRVβ亚家族呈限制性表达;在大多数病例中无论是疾病初发抑或缓解及体外诱导、甚至在疾病复发时均可观察到克隆性T细胞的存在;在部分病例中某些Vβ亚家族在上述不同疾病状态下始终维持克隆性增殖状态,部分Vβ亚家族的克隆性增殖同白血病细胞的存在相关;在疾病状态下,AML白血病患者外周血T细胞的复杂性有所降低,而疾病缓解后可部分恢复。; 毛平罗畅如张玉平王彩霞许艳丽应逸杜庆华谢健晋; 关键词：VΒ亚家族克隆性增殖

异基因造血干细胞移植患者外周血TCR Vβ亚家族克隆性增殖动态变化及其与GVHD的关系被引量：1: 2007年; 本研究观察异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者外周血T细胞受体(TCR)Vβ亚家族克隆性增殖的动态变化,分析T细胞的克隆性演变与GVHD的关系。利用RT-PCR方法扩增70例次allo-HSCT后患者(其中17例次出现GVHD)外周血单个核细胞中24个TCRVβ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度,确定T细胞的克隆性。结果表明:移植患者T细胞增殖一般都经历由单克隆向多克隆演变的过程,在移植后60-90天时,逐渐由单克隆转为单克隆和多克隆表达大致各占一半。120天以后,无GVHD患者大多转为多克隆性表达;而GVHD患者受免疫抑制剂和GVHD的影响,直到1年以上仍有部分呈单克隆表达趋势。GVHD患者发生GVHD或靶器官受累最明显的时候,外周血TCRVβ亚家族的表达主要呈现单/双克隆的表现,而经过免疫抑制治疗病情好转后,部分患者出现由寡克隆表达转为多克隆增殖趋势。结论:移植后早期患者尤其是合并GVHD的患者,T细胞呈克隆性增殖和T细胞受体的倾向性利用;随着造血和免疫的恢复,TCRVβ亚家族表达重新恢复趋向正常的多克隆性演变。; 贾新颜王健民李扬秋陈少华章卫平陈莉; 关键词：T细胞克隆性基因扫描

AML-M5b外周血T细胞TCR Vβ亚家族表达及克隆性增殖特点被引量：2: 2007年; 目的研究AML-M5b患者外周血T细胞TCR Vβ亚家族表达及克隆性增殖特点,并分析分选的患者T细胞经体外诱导、活化及短期培养后其TCR Vβ亚家族的利用及克隆性增殖情况。方法运用RT-PCR-基因扫描技术分析初治AML-M5b患者外周血T细胞TCR Vβ亚家族利用和克隆性增殖,免疫磁珠分选患者T淋巴细胞,体外利用自体白血病DC细胞联合CD3单抗、CD28对T细胞进行诱导、活化,并对诱导后T细胞进行TCR Vβ亚家族表达和克隆性增殖分析。结果9例患者T细胞在体外获得增殖,TCR Vβ分析显示患者外周血T细胞均表达部分Vβ亚家族,体外诱导前后的T细胞TCR Vβ亚家族表达和克隆性增殖特点不完全相同,有部分出现新的Vβ亚家族表达及克隆性增殖,有部分Vβ亚家族在诱导前后始终表现为克隆性增殖,体外杀伤性分析发现诱导后的T细胞对自体白血病细胞具有一定的识别作用。结论AML-M5患者TCR Vβ亚家族T细胞的倾斜性分布和克隆性增殖,部分Vβ亚家族T细胞在诱导前后始终保持克隆性增殖状态,可能是机体针对白血病相关抗原的特异性CTL,体外诱导活化及短期培养后患者T细胞TCR Vβ亚家族表达数量增加,并出现新的克隆性增殖Vβ亚家族T细胞,提示体外诱导活化能够产生白血病患者自体的白血病特异性CTL。; 张玉平王彩霞许艳丽王汉平王顺清杜庆华莫文健陈小卫李庆山毛平; 关键词：急性单核细胞白血病 VΒ亚家族克隆性增殖基因扫描

体外诱导活化的AML-M5b患者外周血T细胞TCR Vβ亚家族表达及克隆性增殖特点: 研究、分析AML-M56患者外周血T细胞以及分选的患者T细胞经体外诱导、活化及短期培养后的T细胞其TCR Vp亚家族的利用及克隆性增殖特点。并利用白血病DC细胞结合CD3, CD28单抗体外活化AML-MSb患者自体外周...; 张玉平毛平王彩霞许艳丽王汉平王顺清杜庆华莫文健陈小卫李庆山; 关键词：外周血T细胞克隆性增殖

急性单核细胞白血病病人外周血TCR Vα基因谱系和T细胞克隆性增殖特点被引量：2: 2007年; 目的:了解急性单核细胞白血病(AML-M5)病人TCR Vα29个亚家族的分布及其克隆性。方法:利用RT-PCR分别扩增8例M5病人外周血单核细胞的TCR Vα29个亚家族基因的CDR3。阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度,了解T细胞克隆性。9例健康人作为对照。结果:RT-PCR分析显示正常人表达绝大多数Vα亚家族基因,而8例M5病人外周血仅可以检测到1-10个Vα亚家族基因,出现频率最高的是Vα3(6/8例,75%),其次为Vα12(5/8例,62.5%),有15个Vα亚家族表达缺失(Vα1、4、5、7、9、14-18、20、21、26、28和Vα29)。基因扫描分析显示:8例AML-M5病人中有6例存在克隆性增殖T细胞,其中,以Vα12亚家族出现克隆性增殖T细胞频率(3/5例)最高,有2例仅存在单一的克隆性增殖Vα3亚家族T细胞。正常人外周血各Vα亚家族T细胞主要呈多克隆性。结论:M5病人外周血Vα亚家族T细胞存在明显的选择性选用及克隆性增殖特点,这可能是机体T细胞受M5细胞刺激而引起机体产生相应的特异性免疫反应,同时T细胞TCR Vα亚家族分布及克隆性增殖情况具有个体特异性。; 严骁岑东芝陈少华杨力建李扬秋

再生障碍性贫血儿童TCRVβ亚家族T细胞克隆性增殖及其与HLA-DRB1*15的关系被引量：12: 2006年; 【目的】探讨再生障碍性贫血(再障)儿童TCRVβ24个亚家族T细胞克隆性及其与HLA-DRB1*15的关系。【方法】再障儿童17例(SAA14例,MAA3例),采用RT-PCR和基因扫描分析外周血或骨髓TCRVβ24个亚家族基因的表达和克隆性,SSP-PCR检测HLA-DR。【结果】再障儿童外周血T细胞仅表达4～22个Vβ亚家族,而正常儿童外周血T细胞几乎表达所有Vβ亚家族。12例(包括初诊SAA4例,CR4例,复发1例和MAA3例)再障儿童存在不同程度T细胞克隆性增殖,但个体间差异较大,正常外周血和骨髓均为多克隆性T细胞。5例HLA-DRB1*15(+)患儿中4例(80%)有寡克隆T细胞,而12例HLA-DRB1*15(-)患儿中仅3例(25%)见寡克隆T细胞,两组比较差异具有显著意义(P<0.05)。伴寡克隆T细胞的6例SAA儿童经免疫抑制治疗后达CR;不伴寡克隆T细胞的5例SAA儿童接受免疫抑制治疗,其中CR1例,PR2例、无效1例,死亡1例。【结论】大多数再障儿童存在T细胞克隆性增殖,寡克隆T细胞多见于SAA,尤其是HLA-DRB1*15(+)的SAA儿童。TCRVβT细胞克隆的检测对进一步了解再障免疫功能状态、预测免疫抑制治疗效果具有一定的参考价值。; 黄永兰黄绍良包蓉张绪超吴燕峰; 关键词：再生障碍性贫血 TCR T细胞克隆

再生障碍性贫血儿童TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖及其与HLA-DRB1*15的关系: 目的强化免疫抑制治疗可使多数再生障碍性贫血(再障)患儿的血液学指标恢复正常,提示再障是免疫介导性骨髓损伤,但其发病机制尚不清楚。利用T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族基因谱(repertoire)的互补决定区3(com...; 黄永兰黄绍良包蓉张绪超吴燕峰李焱; 关键词：克隆性增殖亚家族 HLA-DRB1 障碍性贫血 DRB

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