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美人鱼发光杆菌溶血素Hly_(ch)基因的原核表达及免疫血清制备被引量：3: 2018年; 为研究美人鱼发光杆菌溶血素的携带情况及溶血素的免疫原性,对前期分离的美人鱼发光杆菌的溶血素基因进行了分析,同时进行了原核表达和免疫原性分析。结果显示,该菌携带溶血素Hlych基因,生物信息学分析,该基因与美人鱼发光杆菌溶血素基因同源性达到99%以上,细胞定位预测为胞外蛋白,且具有良好的免疫原性。研究结果提示该菌携带Hlych基因,细菌毒力增强,同时Hlych蛋白有一定的免疫原性,有望用于建立ELISA诊断方法。; 吴同垒靳晓敏王洪彬陈玥张志强高桂生单晓枫史秋梅; 关键词：溶血素生物信息学原核表达

山羊IFN-γ免疫血清制备及抗体ELISA检测方法的建立被引量：3: 2016年; 摘要：为制备山羊干扰素-γ（IFN-γ）免疫血清并建立山羊IFN-γ抗体ELISA检测方法，以原核表达的山羊γIFN重组蛋白（rIFN-γ）为材料，免疫小鼠制备免疫血清；通过对测定不同的抗原包被浓度及包被时间，酶标抗体稀释度，免疫血清的孵育时间等条件的优化建立检测抗体效价的ELISA检测方法，并采用建立的方法测定免疫血清的抗体效价。结果显示，rIFN-γ抗原包被浓度为10μg／mL，4℃包被12h；酶标抗体稀释度为1：5000；免疫血清孵育时间为60min，可以得到最佳ELISA的检测结果。重复试验显示该方法变异系数（CV）在1．5％～5％之间。采用建立的方法测得免疫小鼠免疫血清效价为10^7。该ELISA检测方法灵敏高，稳定性好，为山羊IFN-γ抗体检测提供了技术支持。; 刘鹤媛周铭岳进华张洪杰陈德坤; 关键词：山羊免疫血清酶联免疫吸附试验

高效价兔抗羊免疫血清制备及其在实验教学中的应用被引量：3: 2015年; 家兔经绵羊红细胞（SRBC）免疫后血清中可出现抗SRBC的抗体,采集免疫动物血液分离血清,即可获得抗SRBC的抗血清。用SRBC与相应抗血清混合,当有补体存在时,在一定条件下,SRBC被溶解破坏,故抗SRBC抗体又称为溶血素。动物免疫血清是医学教学、科研及临床实验工作中经常要用到的试剂。; 张淑莉李妮邵明明李小峰; 关键词：免疫血清溶血素绵羊红细胞实验教学

治疗森林脑炎用人免疫血清制备被引量：3: 2011年; 目的:监测森林脑炎病毒感染人体后不同时间血清抗森林脑炎抗体水平和抗森林脑炎抗体血清体外保存(-50℃)时间,进行治疗森林脑炎用人免疫血清的制备。方法:应用间接免疫荧光抗体技术检测血清抗森林脑炎病毒抗体(IgG)滴度,确定人体感染森脑病毒后产生高滴度抗体时间和血清抗体体外保存时间。结果:人体感染森脑病毒2～3个月时血清抗森林脑炎病毒抗体(IgG)滴度最高、感染6个月抗体水平开始下降;血清体外保存6个月抗体水平保持不变,9个月后开始下降,24个月均无抗体。血清抗体滴度越高体外保存时间越长。结论:可以采集森林脑炎病毒感染后2～3个月已知高滴度抗体人群的血液,制备成治疗用免疫血清,分装冰冻(-50℃)保存。在次年森脑高发期及时用于临床病人的治疗,这将提高治疗效果,对减少该病的死亡率和致残率具有重要意义。; 杜彦丹张晓光李英智孙辉孙刚王晶祁冬冬鄂敏; 关键词：森林脑炎免疫血清滴度

猪CD163的分子克隆、原核表达及免疫血清制备被引量：7: 2011年; 采用生物信息学软件分析猪CD163结构,用RT-PCR从猪巨噬细胞RNA中扩增猪CD163前1 511 bp cDNA片段,再用PCR扩增抗原指数较高的697 bp cDNA片段,将其克隆入质粒载体进行序列测定;将cDNA片段克隆入含细胞毒性T细胞相关抗原4（CTLA-4）胞外区（IgV）编码序列的原核表达载体,用IPTG诱导重组菌表达;在变性条件下用镍亲和柱纯化融合蛋白,以每只50μg蛋白的剂量免疫小鼠3次,间接ELISA检测抗体效价;以表达CD163的猪巨噬细胞和不表达CD163的PK-15细胞膜为抗原,用Western blotting验证免疫血清的特异性,以获得猪CD163重组抗原和免疫血清,为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染机制研究提供检测试剂。结果表明：猪CD163的第45~297位氨基酸抗原指数较高,不含疏水性氨基酸集中区;RT-PCR扩增产物的大小与预期结果相符,与发表序列的核苷酸序列同源性为99.5%,氨基酸序列同源性为100%;重组大肠杆菌表达的CTLA-4 IgV-CD163s融合蛋白为预期的43 ku,主要以包涵体形式存在,通过亲和层析和尿素变性/复性获得了可溶性纯化蛋白;免疫小鼠血清的ELISA抗体效价为1∶300 000,能在CD163＋细胞中检测到预期的120 ku蛋白条带,而在CD163-细胞中未检测到相应的蛋白条带。结果提示获得的猪CD163重组抗原和免疫血清可用于PRRSV感染检测。; 李秀媛孙怀昌宋红芹刘文俊张钰陈阳张鑫宇夏晓莉; 关键词：分子克隆原核表达免疫血清

猪CD163和Sn的分子克隆、原核表达与免疫血清制备: 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)以妊娠母猪繁殖障碍和各年龄段猪呼吸道症状为主要特征,是对养猪业危害最为严重的一种病毒性传染病。PR...; 李秀媛; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征分子克隆免疫血清防控策略; 文献传递

开设免疫血清制备系列实验,培养学生的综合能力被引量：1: 2010年; 受学校研究性学习与创新性实验项目的资助,针对医学检验专业的学生开设了"免疫血清制备及鉴定"这一综合性开放性系列实验,收到了非常好的实验教学效果。实践证明,学生对这种综合性开放性系列实验特别感兴趣,这种实验教学模式的实施,极大地激发了学生自主学习的积极性,在巩固和拓展了理论课学习内容的基础上,培养了学生的科研素质、创新精神和动手能力。同时,制备的多种免疫血清已用于免疫学实验教学,为学校节约了实验经费。这一实验教学成果的取得,为医学免疫学实验教学模式和教学方法的改革与创新提供了宝贵的经验。; 王秋波张文卿张艳丽丁守怡吕锐孟林王斌; 关键词：免疫血清医学免疫学实验教学改革

开设免疫血清制备系列实验，培养学生的综合能力: 受学校研究性学习与创新性实验项目的资助，针对医学检验专业的学生开设了“免疫血清制备及鉴定”这一综合性开放性系列实验，收到了非常好的实验教学效果。实践证明，学生对这种综合性开放性系列实验特别感兴趣，这种实验教学模式的实施，...; 王秋波张文卿张艳丽丁守怡吕锐孟林王斌; 关键词：免疫血清医学免疫学实验教学教学改革; 文献传递

SV，Reo-3，MHV，MAd，RCV病毒免疫血清制备及ELISA等检测方法的研究: 实验动物是生命科学研究中不可缺少的实验材料，实验动物质量控制是动物实验成功重要保证，其中病毒学检测是非常重要的内容。为进一步完善大、小鼠病毒检测结果的准确性和稳定性，本课题选择SPF级大、小鼠必检的五种病毒：仙台病毒(S...; 侯丽波; 关键词：免疫血清 ELISA试剂盒仙台病毒; 文献传递

TMEV、Ect、LCMV、POLY和PVM病毒免疫血清制备及ELISA等检测方法的研究: 实验动物病毒检测是保证实验动物质量和动物实验结果的重要手段，国家标准中规定的实验动物病毒血清学检测方法主要为IFA，IEA和ELISA。目前，这些方法分散在我国为数不多的实验室中，阳性对照血清主要来自自然感染的动物血清，...; 谢军芳; 关键词：血清制备脑脊髓炎病毒痘病毒; 文献传递

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