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一株羊源A型产气荚膜梭菌的分子生物学诊断: 2025年; 为查明河南省邓州市某羊场病死羊病因,尽快控制病情,采集病羊肝脏、肺脏和脾脏等器官组织样本进行细菌16S rDNAPCR扩增测序,并利用MEGA7.0软件构建系统进化树,PCR鉴定毒素基因分型。结果表明,在病料中分离鉴定出一株分离菌;对该分离菌株进行16S rDNA基因扩增,得到1400 bp阳性条带,与产气荚膜梭菌核苷酸同源性均在99.6%以上,进行核苷酸同源性比对,与产气荚膜梭菌参考菌株相似性在99.6%以上,表明为产气荚膜梭菌;PCR毒素基因分型得到324 bp阳性条带,符合α毒素基因特征,证实其为A型产气荚膜梭菌,命名为DENGZHOU202409;构建遗传进化树进行分析,发现DENGZHOU202409菌株与上海人源218002-301、印度豹源ATCC 13124处于同一小分支,亲缘关系较近。综上所述,DENGZHOU202409分离菌株为此次羊群感染致病的病原菌,为A型产气荚膜梭菌。; 王奎; 关键词：产气荚膜梭菌

信阳地区散养土鸡禽白血病病毒和马立克病病毒混合感染的分子生物学诊断: 2025年; [目的]了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus, MDV)混合感染及其遗传进化情况。[方法]对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增,并对J亚群ALV(ALV-J)gp85基因与MDV meq基因进行扩增测序,使用MegAlign软件进行核苷酸、氨基酸序列相似性比对以及氨基酸变异位点分析。利用Mega 11.0软件构建gp85、meq氨基酸序列系统进化树。[结果]送检发病鸡腺胃、脾脏肿大,肝脏出现弥漫性肿大并伴有灰白色结节。ALV-J gp85与MDV 132-bpr基因PCR扩增结果均为阳性,分别获得545、317 bp目的条带。测序比对结果显示,扩增序列分别与ALV-J分离株GX12NN04 gp85基因(登录号:KT598488)和MDV-1型分离株YLO40920 meq基因(登录号:DQ174459)高度相似,相似性分别为94.6%和99.9%,初步确定分离株为ALV-J和MDV,并分别命名为HN23XY01-ALV、HN23XY01-MDV。核苷酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85基因与13株ALV-J参考毒株核苷酸序列相似性为92.1%~94.6%;HN23XY01-MDV meq基因与14株MDV参考毒株的核苷酸序列相似性为99.3%~99.9%。氨基酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85与13株ALV-J参考毒株氨基酸序列相似性为87.4%~91.4%,HN23XY01-MDV与14株MDV参考毒株的氨基酸序列相似性为97.9%~99.7%。系统进化树结果显示,HN23XY01-ALV与ALV-J亲缘关系较近,处于同一进化分支;HN23XY01-MDV与广西分离株GXY2、YLO40920、GX20NN2和河南分离株HNSC105处于同一个分支,与疫苗株CVI988、814和CU-2亲缘关系较远。氨基酸变异位点分析结果显示,HN23XY01-ALV存在D(E)65Y、Q(K/R)75L、A(T)76S、R(T)119K、T(M/A)219K氨基酸位点突变;HN23XY01-MDV存在K77E、D80Y、T139A、P176R和P217A氨基酸位点突变,且含有疫苗株所缺失的第193位脯氨酸,与MDV-1型强毒株的特征相符合。[结论]本研究从信阳地区散养土鸡群中检测到ALV-J与MDV混合感染,�; 李迎晓尹磊赵瑜董建国何书海曲哲会焦凤超; 关键词：GP85基因 MEQ基因

分子生物学诊断技术在诊断乙型肝炎病毒中应用: 2024年; 探究分子生物学诊断技术在诊断乙型肝炎病毒中的应用。方法纳入2021年5月至2023年5月的100例确诊为乙型肝炎病毒患者进行调查,通过对所有患者进行分子生物学诊断,分析在分子生物学诊断下的检验准确率,并统计诊断后的具体诊断结果、抗原和抗体检验结果。结果于检验准确率统计调查中可见:分子生物学诊断技术可保持于临床诊断相当的检验准确率,无较大差异(P>0.05);于检验结果统计中,分子生物学诊断的准确度为98.00%、敏感度为98.88%;特异性为90.91%;分子生物学诊断结果与临床检验的结果对比中,乙型肝炎病毒的各项抗原和抗体检验准确性相当,无较大差异(P>0.05)。结论在乙型肝炎病毒的诊断中,基于分子生物学诊断技术的使用,可为病症的诊断提供科学的数据支持,其诊断准确性与临床病症诊断无较大差异,且于抗原和抗体诊断结果中也可保持较高的诊断精确度,综合分析下可见分子生物学诊断技术在诊断乙型肝炎病毒中应用价值较高,具有较高的使用效果。; 马秀英; 关键词：分子生物学诊断技术乙型肝炎病毒准确率抗原抗体

禽白血病的病理及分子生物学诊断: 2024年; 【目的】了解新疆某市鸡群E型禽白血病(E-avian leukosis)的感染情况及基因分子特征,为禽白血病的诊断和防控提供参考。【方法】本研究通过病理剖检、病理组织学观察、PCR检测、克隆载体连接等对疑似禽白血病病例进行实验室诊断,并通过DNAStar软件将分离株与参考毒株进行env基因核苷酸序列相似性比对、系统进化树构建和变异位点分析。【结果】发病鸡肝脏、心脏、脾脏、肾脏、肺脏等器官肿大,有大小不一的白色结节状病灶。病理组织学观察病灶为大小一致的成淋巴细胞,呈局灶性、弥漫性分布。禽白血病病毒(Avian leukaemia virus, ALV)基因组PCR扩增结果显示,获得大小为302 bp的目的条带,为ALV阳性;对阳性样品进行分型鉴定,阳性样品出现大小为1 074 bp的ALV-E特异性条带,分别命名为AKS2101和AKS2102。序列分析结果显示,分离株与E亚群毒株序列相似性为91.6%~98.6%。系统进化树显示,所得序列与ALV-E亚群参考株处于同一分支,与A、B、C、D、J、K亚群参考株处于不同进化分支,进一步说明该鸡群存在ALV-E感染。基因变异分析显示,分离株存在24处核苷酸变异和17处氨基酸位点变异,且可变位点位于序列高变区。【结论】新疆某市鸡群存在ALV-E感染,本试验为明确该地禽白血病流行情况提供基础数据。; 肖静万金隆杨江宇杨梦娇焦海宏; 关键词：病理基因序列

山羊痘的病理学、血清学及分子生物学诊断被引量：1: 2024年; [目的]建立山羊痘的病理学、血清学及分子生物学诊断方法。[方法]选择山东省临沂市某大型养殖场感染山羊痘病毒的50例奶山羊作为观察组,同期未感染的健康奶山羊50例作为对照组,采集血液及相关病变组织材料进行病理学、血清学和分子生物学检测。[结果]病理剖检显示,山羊痘病的奶山羊皮肤、口腔、鼻腔、喉头、气管黏膜及肝脏、肾脏、肺脏及胃组织等多处出现较多典型疹痘。琼脂糖扩散试验显示,山羊痘沉淀抗原与阳性血清发生反应,琼脂糖凝胶孔出现白色沉淀线;健康奶山羊对照抗原则没有任何沉淀线出现。高敏荧光检测显示,感染山羊痘的奶山羊血清抗体效价显著高于健康奶山羊(96.24±5.73 vs 4.01±0.26,P<0.05)。PCR鉴定结果显示,鼻拭子样本、眼拭子样本、肺组织样本和阳性对照样本可扩增出455 bp特异性电泳条带。[结论]成功建立一种针对山东省临沂地区奶山羊感染山羊痘病毒的诊断方法,为后期该地区各类型养殖场山羊痘病控制和临床防治提供科学的参考依据。; 李西康孟庆华; 关键词：奶山羊山羊痘病理学

一例牛冠状病毒引起犊牛急性腹泻的分子生物学诊断与治疗被引量：1: 2024年; 2020年8月初,江西省宜春市某牛场4~5月龄犊牛暴发以急性腹泻、食欲减退并伴随便血为主要症状的传染性疾病,使用抗菌药物和驱虫药未能有效控制病情。为了确定腹泻的病原及其分子特征,试验无菌采集腹泻犊牛粪便样本,对牛冠状病毒(BCoV)、牛轮状病毒(BRoV)、口蹄疫(FMDV)病毒、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛流行热病毒(BEFV)5种常见导致牛腹泻的病原进行PCR检测,并对检测到的病原PCR产物进行序列分析,最后选用适宜的方案进行对症治疗,观察治疗效果。结果表明:腹泻犊牛粪便样本均检测出BCoV,其他病原均未检出。所测序列与BCoV N基因的核苷酸相似性在97.2%以上,将检出的病原命名为BCoV-JX。BCoV-JX株N基因的氨基酸序列与12株BCoV参考株的N基因氨基酸序列相似性均在98.9%及以上,其中与美国牦牛源分离株7-16-23、中国牦牛源分离株SWUN/A1/2018和我国奶牛源分离株DB2的N基因氨基酸序列相似性最高,均为99.8%。BCoV-JX株与美国牦牛源分离株7-16-23和我国牦牛源分离株SWUN/A1/2018处于同一分支上,亲缘关系较近。经补液、注射中药强心剂和抗菌药物,病牛逐渐康复,未见新增病例。说明导致该养牛场犊牛腹泻的病原为BCoV,该BCoV流行株可能由牦牛源BCoV变异而来。; 聂江江雷祖建吴虹瑾胡颖邬向东吴欢生; 关键词：犊牛急性腹泻牛冠状病毒 N基因进化分析

我国马流感病毒分子生物学诊断方法及基因工程疫苗的研究进展: 2024年; 马流感(Equine influenza,EI)是由马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)引起马属动物的一种高度传染性疾病,给全球马属动物产业造成重大经济损失。本文论述了我国马流感病毒分子生物学诊断方法,包括常规PCR方法、荧光PCR方法、环介导等温扩增技术等,并就其基因工程疫苗研究进行了着重阐述,以期为该病的诊断和防控提供参考。; 于新友李坤林李坤林李天芝毕研丽毕研丽; 关键词：马流感病毒基因工程疫苗

临床结核病病原体分子生物学诊断年度进展2022被引量：7: 2023年; 结核病仍然是威胁人类健康的全球公共卫生问题,快速准确的病原体检测是实现早期诊断和有效治疗的关键。近年来,结核病的病原学诊断由传统的细菌学诊断向分子诊断扩展。近1年,具有良好诊断性能的Xper MTB/RIF Ultra技术更多被应用于非呼吸道样本的检测,Xpert XDR和二代线性探针技术为MDR-TB的早期快速准确诊断提供了更多依据;基因组测序技术也被更多开发应用于非培养物样本的检测,其检测成本和所需时间已相对降低和减少;更适合初级医疗保健中心开展的Truenat技术被更广泛应用;游离DNA检测及质谱检测等新型结核病检测技术同样不断发展,有望成为结核病及耐药结核病早期快速诊断的重要手段。本文综合2021年10月1日至2022年9月30日国内外结核病病原体分子生物学诊断的重要进展成果,评估分子生物学检测技术的优缺点及应用现状,为临床选择和应用提供重要依据。; 梁晨唐神结; 关键词：早期快速诊断病原体检测分子生物学诊断细菌学诊断病原学诊断结核病

猪支原体肺炎临床病例的分子生物学诊断: 2023年; 为确诊毕节市某猪场的疑似猪支原体肺炎病例,采集病猪肺脏组织进行猪肺炎支原体(Mhp)培养、PCR鉴定及Mhp P65基因序列分析。结果:从肺脏组织分离的病原DNA扩增出Mhp 16S rRNA(436 bp)和Mhp P65基因(1 803 bp)目的片段,命名为GZ-BJ株。Mhp P65基因序列分析显示,GZ-BJ株与巴西Mhp 7448株、美国Mhp 232株、中国Mhp 168株、中国Mhp 168-L株、巴西Mhp 7422株、巴西Mhp J株的同源性达到98%以上,与中国Mhp 168-L株、Mhp 168株亲缘关系最近。结论:猪场病例存在Mhp感染,感染株与中国Mhp 168-L、Mhp 168株处于同一进化分支。; 王婕罗小芬李广松赵依琳杨利利龙秀文成虹松程振涛; 关键词：猪肺炎支原体 P65基因遗传进化分析

一例牛中华泰勒虫病的分子生物学诊断及分析: 2023年; 为确诊图们市某养殖户黄牛发病原因,对疑似泰勒虫感染的病牛进行PCR检测。方法:采用PCR方法通过泰勒虫MPSP基因通用进行扩增、测序及序列分析。结果:测序结果显示MPSP序列与中华泰勒虫新疆分离株(MG950143)同源性为99.12%,为中华泰勒虫感染;系统进化分析表明,该虫株与中华泰勒虫新疆分离株、马来西亚株亲缘关系较近。; 迟雪刘耀亮张子健李齐郭小雨邢向东田万年; 关键词：系统进化树

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