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制备猴痘病毒M1R抗原分泌蛋白的方法及其所用核酸分子: 本发明公开了一种制备猴痘病毒M1R抗原分泌蛋白的方法及其所用核酸分子。本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种制备猴痘病毒M1R抗原分泌蛋白的方法及其所用核酸分子。本发明提供的方法包括如下步骤：(A1)将核酸分子导入宿主细胞...; 邢体坤张静静安文琪宋路萍

布鲁氏菌分泌蛋白BspC的生物信息学分析、多克隆抗体制备及互作蛋白筛选: 2025年; 目的本研究旨在探究BspC蛋白在布鲁氏菌感染中的作用机理。方法通过在线预测软件分析BspC蛋白的生物学功能,通过化学合成法构建pET-28a-BspC原核融合表达载体并转化大肠埃希菌BL2感受态细胞,经IPTG诱导后大量表达和纯化BspC蛋白。利用纯化的蛋白进行动物免疫并收集抗血清,通过ELISA检测抗血清效价。纯化抗体并通过Western blot进行鉴定。构建RAW264.7细胞的cDNA文库和BspC蛋白的诱饵质粒,对诱饵质粒自激活和毒性进行检测,筛选与BspC互作的宿主蛋白,利用回交验证实验对互作蛋白进行验证。结果BspC蛋白具有信号肽,有6个抗原决定簇,二级结构以α-螺旋为主;成功构建pET-28a-BspC载体,且诱导表达后重组蛋白大小约为16.7 ku;ELISA检测发现兔抗血清效价为1:512000;Western blot检测结果显示制备的多克隆抗体可以特异性结合体外表达的BspC蛋白;利用NCBI的BLAST对7个阳性克隆测序结果比对分析,获得潜在互作宿主蛋白FDX1、DNAJA1、HSPA5、PTPN2。结论本研究成功制备BspC多克隆抗体和筛选获得BspC蛋白的互作蛋白,为进一步研究BspC蛋白在布鲁氏菌感染过程中的功能和机制奠定基础。; 印双红刘虹燕邓肖玉杜昌青刘阳李寅翠孙馨王书利张俊波张俊波; 关键词：布鲁氏菌生物信息学分析多克隆抗体酵母双杂交

辣椒炭疽病病原菌中分泌蛋白的预测及特性分析: 2025年; 由辣椒炭疽病病原菌引起的辣椒炭疽病严重危害着中国辣椒产业的健康发展。分泌蛋白作为炭疽病病原菌中重要的致病因子,能帮助病原菌侵入寄主组织、分解寄主细胞壁,为病原菌生存和繁殖提供条件。然而,学术界尚缺乏对辣椒炭疽病病原菌中分泌蛋白的深入解析和研究。本研究基于前期获得的辣椒炭疽病病原菌强致病菌株TJNH1全基因组序列,充分利用SignalP、ProtComp等生物信息学分泌蛋白预测软件,对该病菌中13 419条蛋白质氨基酸序列进行预测,同时,基于转录组测序数据,对上述分泌蛋白的功能及特性展开研究。结果表明,辣椒炭疽病病原菌菌株TJNH1中含有388个分泌蛋白,占总蛋白质数量的2.89%,分泌蛋白氨基酸序列长度介于55 aa至730 aa,非极性氨基酸丙氨酸(Ala)在分泌蛋白里使用频率最高,分泌蛋白信号肽长度集中于17 aa至21 aa,信号肽切割位点为A-X-A型。分泌蛋白均为亲水性蛋白,高亲水性氨基酸和高疏水性氨基酸数量最多的分别是天冬酰胺(Asn)和丙氨酸(Ala),分泌蛋白大多为稳定、酸性蛋白。同时运用SMART、eggNOG、STRING V11.5等软件对上述分泌蛋白的保守结构域、COG功能分类、蛋白质互作关系等进行分析,有152个分泌蛋白具有明显的保守结构域,163个分泌蛋白获得了功能注释,32个分泌蛋白存在互作关系。该研究结果为明确分泌蛋白的功能和辣椒炭疽病病原菌的致病机理提供了理论支撑,也为筛选以分泌蛋白为靶标的新型农药和辣椒炭疽病绿色防控提供了理论依据。; 李明瑾霍建飞韩长志姚玉荣贲海燕郝永娟王万立; 关键词：分泌蛋白生物信息学分析

单细胞多分泌蛋白组技术及其在肿瘤和感染性疾病中的应用和展望: 2025年; 基于IsoLight平台的单细胞多分泌蛋白组技术(single-cell multiplexed secretome proteomics,SCMSP)是在微流控芯片上利用液滴分离技术实现单细胞分离,通过荧光酶联免疫吸附测定法对单细胞层面的分泌蛋白进行定性定量的分析技术。在肿瘤研究中,SCMSP已被广泛用于开发与评估免疫治疗方案、预测疾病相关生物学标志物和探索肿瘤进展与预后机制,但SCMSP在感染性疾病中的应用仍处于起步阶段。本文详细叙述了SCMSP在肿瘤领域的应用场景,并进一步在感染性疾病中展望了SCMSP的应用前景。总之,先进的SCMSP可用于发现鉴别诊断或预后预测的生物学标志物,其联合多组学系统地研究病程中宿主免疫系统的变化规律并建立精准的免疫干预方案,对疾病的机制探索和临床诊疗能力的提升有重要意义。; 周妍阳胥萍; 关键词：肿瘤感染性疾病生物学标志物

分泌蛋白Dickkopf家族在结直肠癌中的研究进展: 2025年; 结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是目前第三大最常见的肿瘤,也是肿瘤相关死亡率的第二大原因。Wnt/β-catenin信号通路异常是导致CRC发生发展的关键信号通路之一。Dickkopf家族由分泌蛋白组成,作为该信号通路的拮抗剂,显著影响CRC的进展。该家族包括Dickkopf-1~Dickkopf-4,每个成员在CRC中表现出不同的作用。本文就分泌型Dickkopf家族在CRC中的作用的研究进展作出综述。; 方云王应辉周响; 关键词：结直肠癌 WNT/Β-CATENIN信号通路

毕赤酵母全蛋白质组信号肽及分泌蛋白分析被引量：3: 2024年; 信号肽是影响毕赤酵母异源蛋白分泌效率的关键因素之一。目前最常使用的信号肽是来自酿酒酵母的α交配因子(α-mating factor,MFα)的信号肽,利用这个外源信号肽已经成功分泌表达了多种异源蛋白。然而,MFα可能不适用于所有外源蛋白的分泌表达。毕赤酵母分泌蛋白中具有许多典型的信号肽序列,这些内源信号肽可以提供除MFα信号肽之外更为广泛的信号肽选择。因此,有必要分析预测所有内源信号肽引导外源蛋白分泌效果。本研究利用SignalP、TMHMM、Phobius、WoLF PSORT和NetGPI等生物信息工具对毕赤酵母GS115(ATCC 20864)的全蛋白组进行内源蛋白信号肽及分泌特征的预测,得到了信号肽分布、长度、氨基酸比例和保守性等规律,同时筛选得到69个分泌蛋白及其信号肽,并通过分泌蛋白组验证给出了10条可能用于外源蛋白表达的内源性信号肽。本研究获得的内源性信号肽或许为毕赤酵母表达外源蛋白提供了新的有力工具。; 朱淩宣崔鑫胡善桐王诗卉张桂敏; 关键词：毕赤酵母蛋白质组信号肽分泌蛋白生物信息学分析

提高分泌蛋白表达水平的信号肽mRNA及其mRNA工程化方法和应用: 本发明公开了提高分泌蛋白表达水平的信号肽mRNA及其mRNA工程化方法和应用。本发明属于生物技术领域，具体涉及提高分泌蛋白表达水平的信号肽mRNA及其mRNA工程化方法和应用。本发明提供编码分泌蛋白的核酸分子，分泌蛋白从...; 李斌吴嘉彩周伯平

一种使用免疫印迹技术半定量分析人关节软骨细胞分泌蛋白质表达水平的方法: 本发明公开了一种使用免疫印迹技术半定量分析人关节软骨细胞分泌蛋白质表达水平的方法。本发明所述方法包括如下步骤：1)制备含分泌蛋白培养液；2)采集含分泌蛋白培养液的样本；3)对样本进行透析脱盐处理；4)浓缩制备含分泌蛋白培...; 丁磊毛嘉敏王全明

血清糖类抗原125、甲胎蛋白、人附睾分泌蛋白4联合癌胚抗原诊断卵巢癌的价值: 2024年; 目的分析血清糖类抗原125(CA125)、甲胎蛋白(AFP)、人附睾分泌蛋白4(HE4)、癌胚抗原(CEA)联合检测诊断卵巢癌的价值。方法选取2020年1月至2023年1月临沂沂州医院收治的85例卵巢癌患者作为观察组,另选取同期进行健康体检的76例女性作为对照组,比较两组HE4、CEA、CA125、AFP水平,并采用受试者工作特征(ROC)曲线,分析HE4、CEA、CA125、AFP单独及联合检测诊断卵巢癌的价值。结果观察组HE4、CEA、CA125、AFP水平高于对照组(P<0.05);ROC曲线显示,HE4、CEA、CA125、AFP联合检测的曲线下面积大于各指标单独检测(P<0.05)。结论卵巢癌患者HE4、CEA、CA125、AFP呈异常升高状态,联合检测对卵巢癌的诊断价值较高。; 朱庆圆; 关键词：糖类抗原125 甲胎蛋白癌胚抗原卵巢癌

血清人附睾分泌蛋白4、应激诱导蛋白2水平与脓毒症相关ARDS患者病情严重程度、预后的关系研究: 2024年; 目的探讨血清人附睾分泌蛋白4(HE4)、应激诱导蛋白2(Sestrin 2)水平与脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者病情严重程度、预后的关系。方法选取2020年2月—2023年2月广东省中医院海南医院收治的90例脓毒症相关ARDS患者为ARDS组,根据氧合指数(OI)将其分为轻度亚组(OI为201~300 mmHg,n=26)、中度亚组(OI为101~200 mmHg,n=37)、重度亚组(OI≤100 mmHg,n=27),根据入院28 d内死亡情况将其分为死亡亚组(38例)和存活亚组(52例)。另选择同期在广东省中医院海南医院体检中心进行体检的健康志愿者75例为对照组。比较ARDS组与对照组、不同病情严重程度患者血清HE4、Sestrin 2水平;脓毒症相关ARDS患者死亡的影响因素分析采用单因素分析及多因素Logistic回归分析,绘制ROC曲线以评估血清HE4、Sestrin 2水平及二者联合对脓毒症相关ARDS患者死亡的预测价值。结果ARDS组血清HE4、Sestrin 2水平高于对照组(P<0.05)。中度亚组血清HE4、Sestrin 2水平高于轻度亚组,重度亚组血清HE4、Sestrin 2水平高于轻度亚组和中度亚组(P<0.05)。死亡亚组与存活亚组脓毒症分级、病情严重程度、急性生理和慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分、机械通气时间及血清HE4、Sestrin 2水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,病情严重程度、APACHEⅡ评分及血清HE4、Sestrin 2水平是脓毒症相关ARDS患者死亡的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清HE4、Sestrin 2水平及二者联合预测脓毒症相关ARDS患者死亡的AUC分别为0.809〔95%CI(0.713~0.884)〕、0.865〔95%CI(0.777~0.928)〕、0.980〔95%CI(0.925~0.998)〕。二者联合预测脓毒症相关ARDS患者死亡的AUC分别大于血清HE4、Sestrin 2水平单独预测脓毒症相关ARDS患者死亡的AUC(P<0.05)。结论脓毒症相关ARDS患者血清HE4、Sestrin 2水平升高,且ARDS病情越严重血清HE4、Sestrin 2水平越高;血清HE4、S; 许青青林瑶瑶刘海林李绿赵冬梅麦叶; 关键词：脓毒症

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