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两种入路建立小鼠单侧输尿管梗阻模型的比较
2025年
目的:比较经腹和经后腹两种入路建立小鼠单侧输尿管梗阻模型的效果。方法:采用数字随机表法将66只小鼠随机分为3组,正常对照组(C组,6只),经腹入路组(P组,30只)和经后腹入路组(R组,30只)。C组不做手术处理,P组经腹部正中切口入路结扎左侧输尿管,R组经后腹入路结扎左侧输尿管。比较P组和R组手术时间和切口长度的差异;术后24 h将C组6只小鼠、P组和R组随机选取的6只小鼠处死,测定并比较各组血白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)值。14 d后将剩余小鼠全部处死,比较P组和R组小鼠肾组织过碘酸雪夫染色(Periodic Acid-Schiff stain,PAS)染色评分、小鼠总生存率、并发症发生率、建模成功率和学习曲线的差异。结果:R组平均切口长度[(1.55±0.28)cm]和平均手术时间[(5.13±0.78)min]均比P组短[分别为(2.71±0.30)cm、(6.72±1.76)min],差异有统计学意义(P<0.001);P组术后24 h血IL-6浓度[(335.80±74.82)pg/ml]较R组高[(513.4±119.7)pg/ml],差异有统计学意义(P=0.02);术后14d R组小鼠存活率和建模成功率分别为100%、100%,P组分别为92%、92%,两组比较差异均无统计学意义(P值均为0.489);R组小鼠并发症发生率(4.17%)低于P组(29.17%),差异有统计学意义(P<0.05);R组手术建模学习曲线比P组短。结论:两种入路建立小鼠单侧输尿管梗阻模型均安全可行,但经后腹入路模型具有切口小、手术时间短、并发症发生率低和学习曲线短等优点,是建立小鼠单侧输尿管梗阻模型的较优方法。
陈小叶刘红红曹华林陆亚群吴洋洋沈晓丽陶元东李品周辉霞
关键词:单侧输尿管梗阻动物模型小鼠手术路径
毛蕊花糖苷改善单侧输尿管梗阻模型大鼠肾纤维化被引量:1
2023年
该研究探讨毛蕊花糖苷对单侧输尿管梗阻模型大鼠肾纤维化的作用。采用随机数字表法将24只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术(CON)组、单侧输尿管梗阻(UUO)组、UUO+毛蕊花糖苷(ACT)组和UUO+贝那普利(BZ)组,采用单侧输尿管结扎术建立肾纤维化动物模型。HE染色和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理改变。免疫组化法检测肾组织Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)、热休克蛋白(HSP)-47、结缔组织生长因子(CTGF)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、β联蛋白(β-catenin)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)和半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白的表达。Western印迹法检测肾组织葡萄糖调节蛋白(GRP)78蛋白表达。结果显示,与CON组比较,UUO组大鼠肾小管扩张,肾间质胶原纤维沉积显著增加;UUO+ACT组和UUO+BZ组大鼠肾小管扩张和间质胶原纤维沉积程度较UUO组显著减轻,但仍明显重于CON组。与CON组比较,UUO组大鼠肾组织CTGF、α-SMA、CollagenⅢ、HSP-47、β-catenin及GRP78蛋白表达量均显著较高,Bcl-2蛋白表达量显著较低(均P<0.05);与UUO组比较,UUO+ACT组和UUO+BZ组大鼠肾组织Bcl-2蛋白表达量均显著较高,而其他蛋白表达量均显著较低(均P<0.05)。该研究表明,毛蕊花糖苷可通过下调CTGF、α-SMA、CollagenⅢ、HSP-47、β-catenin及GRP78表达,上调Bcl-2表达,从而发挥改善肾纤维化的作用。
林鑫谢莹谢莹董蓉余佳丽董蓉查艳
关键词:麦角甾苷输尿管梗阻肌成纤维细胞
利用基因芯片分析单侧输尿管梗阻模型中TIF与自噬的变化
2023年
目的:利用基因芯片分析寻找单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾小管间质纤维化(TIF)的机制,并探究自噬在TIF中的变化。方法:选取GEO数据库中编号为GSE42303的基因芯片,提取其中假手术组与UUO组的肾组织基因表达谱进行分析。实验研究选取雄性SD大鼠,分成假手术组与模型组,每组各10只。在制备UUO模型14 d后取材,对梗阻肾组织进行光镜、免疫组化与透射电镜检测。结果:本研究共筛选出398个差异表达的基因,其中表达下调的有74个,上调表达的有324个。其中与自噬、炎症反应、氧化应激反应、小管离子转运、能量代谢以及胶原蛋白合成等生命活动相关的基因表达水平变化尤为显著。实验研究也进一步证实了梗阻肾组织中自噬激活与TIF的发生发展有密切联系。结论:TIF可能与自噬、小管离子转运障碍、能量代谢障碍、炎症反应、胶原合成以及腺苷通路活化有关,其中自噬可能是与TIF进展较为密切的关键机制。
范桢亮杨梦凡尹日平赵冬雪贠捷宋立群申意伟孙可
关键词:基因芯片单侧输尿管梗阻肾小管间质纤维化自噬
黄柏酮对单侧输尿管梗阻模型小鼠肾间质纤维化及铁死亡的影响被引量:5
2023年
目的研究黄柏酮对单侧输尿管梗阻(UUO)模型小鼠肾间质纤维化的改善作用,并基于核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)信号通路介导的铁死亡探讨其作用机制。方法将30只小鼠随机分为假手术组、模型组、厄贝沙坦组(阳性对照,20 mg/kg)和黄柏酮低、高剂量组(10、40 mg/kg),每组6只。除假手术组外,其余各组小鼠均通过结扎单侧输尿管建立UUO模型。术后,给药组小鼠腹腔注射相应药物,假手术组、模型组小鼠腹腔注射等体积生理盐水,每天1次,连续7 d。检测小鼠血清中肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)水平,丙二醛(MDA)含量,总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和肾脏组织中Fe^(2+)浓度;苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察小鼠肾脏组织形态和纤维化情况;免疫组化法检测小鼠肾脏组织中纤连蛋白(Fn)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、GPx4、Nrf2的表达,Western blot法和实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测小鼠肾脏组织中Fn、α-SMA、Nrf2、GPx4、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白及mRNA的表达水平。结果与假手术组比较,模型组小鼠血清中Cr、BUN水平,MDA含量,肾脏组织中Fe^(2+)浓度以及Fn、α-SMA蛋白和mRNA的表达水平均显著升高(P<0.05);血清中T-SOD活力,肾脏组织中Nrf2、GPx4、SLC7A11蛋白和mRNA的表达水平均显著降低(P<0.05);肾脏组织中肾小管扩张,胶原沉积明显,纤维条索较粗且着色较深,肾间质炎症细胞浸润明显。经黄柏酮干预后,小鼠血清或肾脏组织中上述指标(黄柏酮低剂量组SLC7A11 mRNA除外)水平均显著逆转(P<0.05),肾脏组织病理损伤、胶原沉积均有所减轻。结论黄柏酮可改善UUO模型小鼠的肾间质纤维化,具体作用机制可能与激活Nrf2/GPx4信号通路、抑制铁死亡有关。
邱莎杨丽谭睿陟刘建
关键词:肾间质纤维化单侧输尿管梗阻
含笑内酯通过抑制NF-κB/NLRP3轴改善单侧输尿管梗阻模型小鼠的肾脏病变被引量:1
2023年
目的探究含笑内酯(MCL)对单侧输尿管梗阻(UUO)模型小鼠肾脏病变的干预作用及机制。方法将雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术(Sham)组、UUO组、UUO+MCL组,UUO+MCL组建立UUO模型前1 d以25 mg/kg MCL灌胃。术后8 d采集肾组织标本进行HE、Masson、TUNEL染色;蛋白免疫印迹(Western blot)和免疫组化检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、核因子(NF)-κB p65蛋白表达情况。结果HE染色结果显示,Sham组小鼠肾组织无明显病变;UUO组肾小管进行性扩张,间质水肿伴有少量的炎性细胞浸润;UUO+MCL组肾脏病变较UUO组明显改善。Masson染色结果显示,与Sham组相比,UUO组胶原容积分数明显增加,而UUO+MCL组胶原容积分数较UUO组明显减少。TUNEL染色结果显示,与Sham组相比,UUO组细胞凋亡率升高,UUO+MCL组较UUO组细胞凋亡率明显下降。Western blot和免疫组化结果显示,与Sham组相比,UUO组肾组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β、TNF-α、p-NF-κB p65的表达水平均升高;与UUO组相比,UUO+MCL组上述因子均显著下降。结论UUO小鼠肾组织NLRP3炎症小体及相关炎性因子表达增加,MCL通过抑制NF-κB通路及NLRP3炎症小体的活化,减轻肾小管间质的炎症反应,从而改善肾纤维化。
雷向宏严文君熊梅梅龙海波陈斯佳
关键词:输尿管梗阻NF-ΚB
小鼠单侧输尿管梗阻模型肾损伤随时间变化的研究
2022年
目的建立小鼠单侧(左侧)输尿管梗阻(UUO)模型,探究肾损伤随时间的变化情况和相关机制。方法50只小鼠随机分为两组:假手术组及UUO模型组(结扎左侧输尿管制成UUO模型),观察不同时间点两组生化指标、左肾重量/终末体重(LR/BW)、右肾重量/终末体重(RR/BW),并计算左肾重量/右肾重量比值(LR/RR)。采用HE、Masson及PAS染色法检测小鼠的肾脏病理学变化。免疫荧光染色观察小鼠肾小管周围毛细血管(PTC)缺失、肾实质细胞增殖(Ki67^(+)细胞)以及巨噬细胞(CD68^(+)标记)、成纤维细胞浸润及肾脏Wnt/β-catenin表达情况。结果UUO组小鼠体重在造模第3天迅速下降[(18.2±1.1)g vs(22.4±1.2)g],此后体重缓慢增加直至第28天,在第60天体重显著下降[(17.5±0.8)g];LR/RR和LR/BW在第3天显著上升,随后逐渐下降;第60天时肾功能明显恶化[血清肌酐(0.89±0.09)mg/dl,尿素氮(41.26±5.65)mg/dl];UUO组梗阻侧肾脏光镜显示肾小管间质纤维化和肾小球硬化,随着时间的推移,PTC缺失逐渐加重;巨噬细胞最初在左肾实质内显著增多,但在28 d后开始减少;成纤维细胞数量在梗阻侧(左侧)肾脏前14 d显著增多,此后下降至正常水平;UUO组非梗阻侧肾脏的细胞数量与假手术组差异无统计学意义;UUO组梗阻侧(左侧)Wnt/β-catenin免疫荧光强度在肾脏损伤后前14 d的表达显著上调,28 d后表达下降。结论UUO肾脏纤维化的发展涉及很多方面的变化,包括PTC缺失、巨噬细胞的浸润、成纤维细胞激活以及表达,但是这些变化随着时间而减弱。
李禹蒙贾西贝马静邢丽
关键词:输尿管梗阻肾间质纤维化肾小管周围毛细血管巨噬细胞
筋骨草总黄酮对单侧输尿管梗阻模型大鼠肾间质纤维化的抑制作用被引量:3
2022年
目的研究筋骨草总黄酮(TFA)对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的抑制作用。方法采用随机数字表法将40只雄性SD大鼠分为假手术组8只和造模组32只。造模组分离左侧输尿管后,采用4-0丝线在左侧输尿管近肾盂处和输尿管上1/3处结扎并于中间剪断从而建立大鼠UUO模型,假手术组仅分离左侧输尿管但不结扎和剪断输尿管。造模结束后,将造模组大鼠随机分为模型组,低、中、高剂量组,每组各8只。术后第1天开始低、中、高剂量组分别予54、108、216 mg/mL TFA水溶液,假手术组和模型组予蒸馏水,均按1 mL/100 g体质量灌胃,1次/d,连续14 d。末次给药2 h后进行腹主动脉取血并采集左侧肾脏组织,采用肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐(Scr)含量、脲酶法检测血清尿素氮(BUN)含量;采用HE染色法观察左侧肾脏组织形态结构病理改变,Masson染色法半定量分析计算胶原容积分数(CVF)以判定大鼠左侧肾脏组织纤维化程度;Western blot测定大鼠左侧肾脏组织上皮钙黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白相对表达量以判定大鼠左侧肾小管上皮细胞-间充质转分化情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠左侧肾脏组织病理损伤严重,胶原纤维增生明显,Scr、BUN含量、CVF及α-SMA蛋白相对表达量明显增多(P均<0.05或<0.01),E-cadherin蛋白相对表达量明显降低(P<0.01);与模型组比较,各药物组大鼠左侧肾脏组织病理形态,胶原纤维增生均有不同程度的改善,中、高剂量组Scr含量、中剂量组BUN含量、各药物组CVF、中剂量组α-SMA蛋白相对表达量均明显减少(P均<0.05或<0.01),中剂量组E-cadherin蛋白相对表达量明显增多(P<0.05)。结论TFA可通过干预肾小管上皮细胞-间充质转分化的发生进程,从而延缓肾间质纤维化。
楼晓慧南丽红彭卫华陈亚萍官梦倩
关键词:输尿管梗阻肾间质纤维化
二甲双胍通过干预Hippo/YAP信号通路在小鼠单侧输尿管梗阻模型中抗纤维化作用的机制研究
目的:通过给予二甲双胍研究二甲双胍对小鼠单侧输尿管梗阻诱导的肾脏纤维化的影响,明确Hippo/YAP通路肾脏纤维化的作用及其机制。方法:C57BL/6小鼠30只(体重20~25 g),随机分成3组(每组10只):假手术组...
张爱
关键词:单侧输尿管梗阻模型肾纤维化二甲双胍
温阳健肾方改善单侧输尿管梗阻模型大鼠肾间质纤维化的实验研究
目的:通过单侧输尿管梗阻大鼠模型研究温阳健肾方改善肾间质纤维化的作用机制,为温阳健肾方治疗肾间质纤维化提供实验基础和科学依据。材料与方法:选用72只SPF级雄性Wistar大鼠,10-12周龄,体重200±20g,适应性...
王英明
关键词:肾间质纤维化中医药
骨髓间充质干细胞延缓单侧输尿管梗阻模型肾脏纤维化的研究被引量:2
2021年
目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)减轻单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾脏损伤的效果及相关的机制。方法通过体外培养的方法制备MSCs,并将MSCs通过尾静脉注射的方法注入到UUO模型鼠体内,在造模的第14天检测不同组肾脏病理的改变、管周毛细血管、细胞凋亡及β-catenin表达情况来观察MSCs是否可以减轻肾脏损伤并探讨相关机制。结果将培养的MSCs通过尾静脉注射的方法注入到UUO模型BALB/C小鼠体内,发现在MSCs组肾脏病理纤维化的程度较UUO组明显减轻(HE:1.60±0.35比3.34±0.23;MASSON:21.32±7.54比51.08±4.45),同时MSCs注入可以进一步减少管周毛细血管的丢失(13.56±4.65比60.16±10.24)、抑制细胞的凋亡(14.32±3.54比28.16±6.21)及β-catenin表达(29.33±6.45比39.51±8.42)。结论MSCs治疗对慢性肾脏纤维化起到保护作用,作用机制与减少管周毛细血管丢失、抑制细胞凋亡及β-catenin的表达有关。
邢丽禹程远
关键词:骨髓祖代细胞输尿管梗阻单侧肾脏纤维化

相关作者

何立群
作品数:926被引量:4,285H指数:28
供职机构:上海中医药大学附属曙光医院
研究主题:肾纤维化 慢性肾脏病 健脾清化方 慢性肾衰 抗纤灵方
吴锋
作品数:92被引量:367H指数:11
供职机构:上海中医药大学附属曙光医院
研究主题:抗纤灵冲剂 肾纤维化 单侧输尿管梗阻 慢性肾脏病 肾间质纤维化
黄玉宇
作品数:102被引量:236H指数:7
供职机构:苏州市中医医院
研究主题:糖尿病肾病 中药注射剂 中药组合物 中药 合理用药
何泽云
作品数:180被引量:706H指数:14
供职机构:湖南中医药大学第一附属医院
研究主题:参麦注射液 六味地黄汤 慢性肾脏病 5/6肾切除大鼠 肾切除
周姗姗
作品数:33被引量:100H指数:7
供职机构:广州市第一人民医院
研究主题:肾间质纤维化 氯沙坦 高尿酸血症 别嘌呤醇 糖尿病肾病