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一种从细胞培养上清液中富集细胞外囊泡的方法: 本发明首次提供了一种从细胞培养上清液中富集细胞外囊泡的方法。提出了一种全新的细胞外囊泡分离方法，构建了一种多价胆固醇修饰的两亲性PX‑DNA材料，由四条单链DNA自组装而成，8个粘性末端各修饰一个胆固醇分子，可通过疏水作...; 谭蔚泓张立转何磊

不同品牌ELISA试剂盒检测细胞培养上清液中IL-8对比研究: 2024年; 目的对比研究2种不同品牌ELISA试剂盒检测细胞培养上清液中人白细胞介素-8(IL-8)水平情况。方法不同浓度聚肌胞苷酸(Poly I:C)刺激A549细胞10、24 h,收集细胞上清液,共获得40份样本,分为1~10组,每组4份。采用2种ELISA试剂盒(试剂盒A、试剂盒B)检测细胞培养上清液中IL-8水平,对比2个试剂盒检测得到的组间数据或同组数据的一致性或差异性。结果 2种试剂盒拟合曲线中相关系数值分别为:0.999 600、0.999 602,检测标准品结果相关性良好。试剂盒B检测样品1、2组中IL-8水平比较,差异有统计学意义(P<0.01),但试剂盒A检测样品1、2组中IL-8水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);2种试剂盒检测样品8、9组及样品9、10组中IL-8水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。仅试剂盒B检测样品1、5组中IL-8水平明显低于试剂盒A,差异有统计学意义(P<0.01)。结论不同品牌ELISA试剂盒均可用于检测IL-8水平,但检测结果仍在一定程度上存在差异。为避免实验误差,研究中应尽量选择同一个厂家生产的同品牌试剂盒。; 张梅阳小凤饶忠美余福勋叶芝旭; 关键词：酶联免疫吸附试验上皮细胞白细胞介素-8 细胞培养

血链球菌cpnp培养上清液抑制铜绿假单胞菌生长和生物膜的作用: 2024年; 目的研究血链球菌cpnp培养上清液抑制铜绿假单胞菌生长和生物膜形成、破坏成熟生物膜的作用,以及其联合抗生素的抑菌作用,为利用呼吸道共生菌制剂干预铜绿假单胞菌呼吸道定植,减少呼吸道感染提供依据。方法采用牛津杯法测定血链球菌cpnp对铜绿假单胞菌生长的抑制作用。使用96孔板法测定血链球菌cpnp培养上清液联合头孢他啶对铜绿假单胞菌生长的抑制作用。体外建立铜绿假单胞菌生物膜模型,利用结晶紫半定量法、刚果红染色法、RT-qPCR法测定血链球菌cpnp培养上清液对生物膜形成的抑制作用;利用结晶紫半定量法、MTT法测定血链球菌cpnp培养上清液对成熟生物膜的破坏作用;采用光镜和电镜观察生物膜的形态。结果血链球菌cpnp培养上清液对铜绿假单胞菌生长有抑制作用,与头孢他啶联用时表现出协同作用(P<0.001)。血链球菌cpnp培养上清液可减少铜绿假单胞菌生物膜形成量(P<0.001)、胞外多糖产量(P<0.001)及降低胞外多糖基因表达水平(P<0.050)。血链球菌cpnp培养上清液可减少成熟生物膜总量(P<0.001)和降低生物膜代谢活性(P<0.001)。结论血链球菌cpnp上清液和其联用抗生素能拮抗铜绿假单胞菌生长,并且上清液对其生物膜有良好的抑制和破坏作用。; 高毅敏李娜李新鸣金慧张家鑫耿大升孙贺刘光焱马明月; 关键词：血链球菌铜绿假单胞菌生物膜

高效提取细胞培养上清外泌体方法的建立: 2024年; 目的建立一种快速、简单且高效提取细胞培养上清中外泌体的方法,以期促进外泌体在临床与疾病治疗中的应用。方法将羟基(OH)修饰磁珠与高分子化合物Buffer EXD结合,建立新的外泌体提取系统,并使用该系统提取细胞培养上清中的外泌体。通过Western blot法检测外泌体标志蛋白的表达变化;纳米颗粒追踪分析(nanoparticles tracking analysis,NTA)技术检测外泌体的粒径大小和浓度;透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)技术检测外泌体的形态结构。对Buffer EXD系统提取外泌体的方法进行优化(提取pH、Buffer EXD比例、孵育时间、磁珠用量及种类)。结合细胞培养和显微拍照技术分析新系统纯化的外泌体对A549细胞增殖的影响。结果新系统提取的外泌体样品中标志蛋白Alix、CD9和CD81等表达水平较高,而外泌体阴性蛋白Calnexin表达较少;新系统提取的外泌体粒径峰值在100 nm左右,具有茶托状的典型形状。新系统的pH为5.0,Buffer EXD浓度为20%,1.75%的OH磁珠与样品孵育时间为40 min时,提取的外泌体样品中标志蛋白含量最高。新系统提取的外泌体对A549细胞的增殖具有明显的促进作用。结论以OH修饰的磁珠为介质,结合高分子化合物Buffer EXD,成功建立了一种可快速、简单、高效地从细胞上清中提取结构完整、形态特征明显且具有生物学功能外泌体的新体系。; 王小鑫王丽丽张益国高姣马磊张婷婷陈国柱; 关键词：外泌体磁珠

用于全自动细胞制备系统的培养上清回收装置: 本实用新型提供了一种用于全自动细胞制备系统的培养上清回收装置，包括暂存罐和取样瓶，暂存罐设有培养上清收集口，暂存罐的底部设有培养上清排出口，培养上清排出口设有排出口阀门，取样瓶的上端设有样品流入口和样品流出口，取样瓶的样...; 董奇政张芬王清芳钟桂强韦棋

人脐带间充质干细胞培养上清对米非司酮处理的人子宫内膜基质细胞存活、凋亡和子宫内膜容受性的影响: 2024年; 目的:探讨人脐带间充质干细胞培养上清(hUCMSCs-Sup)对米非司酮(Ms)处理的人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖、凋亡和子宫内膜容受性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养hEndoSCs,分为对照组和40、60、80及100μmol·L-1 Ms组,MTT法检测各组细胞存活率。hEndoSCs分为对照组、40μmol·L-1 Ms组和60μmol·L-1 Ms组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平并计算Bcl-2/Bax比值。hUCMSCs-Sup作用后,hEndoSCs分为对照组、Ms组、Ms+hUCMSCs-Sup组和Ms+hUCMSCs-Sup+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,MTT法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)和微管相关蛋白1轻链3B-Ⅰ(LC3B-Ⅰ)蛋白表达水平并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中子宫内膜容受性标志分子mRNA表达水平。结果:与对照组比较,40、60、80和100μmol·L-1 Ms组细胞存活率明显降低(P<0.05),且具有时间和剂量依赖性。与对照组比较,40和60μmol·L-1 Ms组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05)。hUCMSCs-Sup作用后,与对照组比较,Ms组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中同源框基因A10 (HOXA10)、白血病抑制因子(LIF)和整合素亚基β3 (ITGB3) mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与Ms组比较,Ms+hUCMSCs-Sup组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),细胞中HOXA10、LIF和ITGb3 mRNA表达水平表达明显升高(P<0.05);与Ms+hUCMSCs-Sup组比较,Ms+hUCMSCs-Sup+3-MA组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低(P<0.05)。结论:hUCMSCs-Sup可提高Ms处理后hEndoSCs的存活率,降低其凋亡率,提高子宫内膜容�; 武梦雪陈士玲刘艳米旭光林秀英付建华方艳秋; 关键词：脐带间充质干细胞子宫内膜容受性

中空纤维细胞培养装置、细胞培养方法、培养上清液的制造方法: 本发明的课题是提供一种培养装置。本发明的解决手段是一种用于制造培养上清液的中空纤维细胞培养装置，具有：过滤器外壳1；中空纤维3，其存在于过滤器外壳的内部，孔径是5nm以上且1μm以下，通过细胞导入部5而将细胞导入内部；中...; 漆畑直树隐岐胜幸

人类蜕膜间充质干细胞的细胞培养上清液的用途: 本发明公开一种人类蜕膜间充质干细胞培养上清液对于缺血性疾病的用途，例如糖尿病足溃疡。通过小鼠下肢缺血模型的建立，用人类蜕膜间充质干细胞上清液处理后可改善小鼠下肢血流供应，并在链脲佐菌素诱发的糖尿病小鼠模型中，用人类蜕膜间...; 朱莉莉

γδ T细胞培养上清液在制备抗氧化产品中的应用: 本发明公开了γδT细胞培养上清液在制备抗氧化产品中的应用，属于生物技术领域。本发明公开的γδT细胞培养上清液在斑马鱼氧化应激模型中具有显著降低斑马鱼体内ROS水平，和显著提高斑马鱼体内SOD活性的潜能，此为利用γδT细胞...; 陈涛马燕郑康帝陈丹张召

利用嗜酸硫杆菌培养上清液生物合成硫化镉量子点的方法: 本发明公开了一种利用嗜酸硫杆菌培养上清液生物合成硫化镉量子点的方法，包括如下步骤：将培养至稳定期的嗜酸硫杆菌上清液作为催化反应体系，将其pH值调至中性后，向其中加入S源和Cd源，摇床震荡培养，得到硫化镉量子点；所述S源为...; 李小菊林建群陈林旭

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