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重组病毒复制子体系及其用途: 本公开整体涉及根据基于病毒的表达体系，其适用于制备感兴趣的分子。本公开涉及核酸构建体，诸如表达载体，其包含经修饰的复制子RNA，所述经修饰的复制子RNA包含经修饰的5'‑非翻译区(5'‑UTR)，并且任选地已经缺失编码结...; 库尔特·艾弗·卡姆鲁德

新型冠状病毒复制子人工合成和应用研究进展: 2024年; 从2019年12月初首次报道到2023年9月,新型冠状病毒在全世界已造成约7.7亿人感染和696万人死亡。由于该病毒具有极强的传染性,理论上相关的研究工作都必须在生物安全三级或以上的实验室中进行。为了克服这一局限性,研究人员应用反向遗传学技术构建了众多复制子,使得在生物安全二级实验室中就可以进行相关的研究工作。科学家们通常会在复制子中插入绿色荧光蛋白或荧光素酶等报告基因以及遗传霉素等抗性基因,方便检测病毒和建立稳定的细胞株。另外,新冠病毒复制子还可通过与共转染的病毒糖蛋白的反式互补作用形成只能单次侵染的病毒粒子,使之能侵染无新冠病毒受体的细胞。因此,本文总结了合成新冠病毒复制子的主要方法,如通过Ⅱ型或ⅡS型限制性内切酶进行体外连接、基于细菌人工染色体的构建、利用酵母转化相关重组进行克隆和应用环形聚合酶延伸反应构建,同时综述了新冠病毒的单周期和稳定表达复制子系统。总之,多种复制子系统的构建和应用为研究新冠病毒基因功能、病毒与宿主互作机制和抗病毒药物的高通量筛选奠定了坚实的基础,为阻止病毒的蔓延和保卫人类的健康做出了重大贡献。; 万里川王学军王升启; 关键词：复制子反向遗传系统 BAC TAR

pJEV-CMV-p54复制子质粒及其制备方法和应用: 本发明提供了pJEV‑CMV‑p54复制子质粒及制备方法和应用，属于分子生物学技术领域。本发明以缺失了C、prM和E结构蛋白基因的基因I型日本脑炎病毒基因组为骨架，在缺失结构蛋白的部位插入非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白基...; 邱亚峰魏建超马志永程星雨肖长广张妍夏琦琦李宗杰李蓓蓓刘珂邵东华

一种3a型丙肝病毒亚基因组复制子及应用: 本发明涉及基因工程技术领域，具体公开了一种3a型丙肝病毒亚基因组复制子及应用。所述复制子包括在NS3蛋白、NS4A蛋白、NS4B蛋白、NS5A蛋白、NS5B蛋白上的适应性突变；所述适应性突变为在突变位点上发生取代、插入或...; 李义平陈明晓李妮

一种6a型丙肝病毒亚基因组复制子及应用: 本发明涉及基因工程技术领域，具体公开了一种6a型丙肝病毒(HCV)亚基因组复制子及应用。所述复制子包括在NS3蛋白、NS4A蛋白、NS4B蛋白、NS5A蛋白、NS5B蛋白上的适应性突变。本发明的6a型HCV毒株来自中国，...; 李义平陈明晓李妮

一种3b型丙肝病毒亚基因组复制子及其应用: 本发明公开了一种3b型丙肝病毒亚基因组复制子，复制子核苷酸序列如SEQ ID NO:1，其包括在NS5A蛋白上的第232位的丝氨酸突变为异亮氨酸；含有该亚基因组复制子的模型的RNA复制非常高效，本发明利用该复制子系统检测...; 冯悦郭潘婷刘丽美石

重组杆状病毒，由重组杆状病毒制备的甲病毒的类病毒复制子颗粒及其用途: 本公开是有关一种重组杆状病毒，用以在蚊子细胞中制备一种带有外源基因的甲病毒的类病毒复制子颗粒(VRP)。所述重组杆状病毒包含：(1)复制子(replicon)，包含第一启动子和第一聚核苷酸，其中该第一聚核苷酸系用以编码至...; 林慧中郭赐成赵德江林昌棋徐育麟林慧足蔡善格

加载和复制子矢量值的系统和方法: 一种处理器包括矢量寄存器，所述矢量寄存器被配置成响应于专用加载指令而加载数据。该处理器还包括被配置成从矢量寄存器复制所选择的子矢量值的电路。; E·马胡林E·普朗德克D·霍伊尔

Sf9细胞内水稻条纹病毒复制子系统及其构建方法: 本发明公开了一种Sf9细胞内水稻条纹病毒复制子系统及其构建方法。所述方法先依次将优化的RSV RdRp和NP基因片段连接供体质粒pFastBacDual，转化DH10Bac细胞，通过蓝白斑筛选、PCR鉴定获得表达RdRp...; 赵淑玲唐诗梁昌镛

稳定表达eGFP-戊型肝炎病毒复制子的建立及体内外特征: 2024年; 戊型肝炎病毒(HEV)是急性病毒性肝炎的主要病原体.为了寻找有效的HEV研究工具,利用反向遗传学构建了携带绿色荧光蛋白(eGFP)的重组HEV感染性克隆——eGFP-HEV.eGFP-HEV转染Huh7.5.1细胞后,在荧光显微镜下能够直接观察到荧光信号,可以实时追踪HEV的复制情况,将eGFP-HEV的子代病毒粒子接种细胞,利用免疫荧光和qRT-PCR验证了其传染性.eGFP-HEV细胞培养系统可以通过直接观察绿色荧光信号来评价药物的抗病毒效果,为HEV药物筛选提供了重要工具.此外,在接种eGFP-HEV的BALB/c裸鼠的胆汁和粪便中也可追踪到eGFP-HEV的绿色荧光信号.值得注意的是,感染小鼠肝脏中表达的HEV抗原量与eGFP的荧光强度高度匹配,可以利用eGFP的荧光信号代表HEV的病毒滴度.携带绿色荧光蛋白的eGFP-HEV感染性克隆在体内、外的成功表达将加快HEV的研究,有利于抗HEV药物或疫苗的研发.; 黄芬夏月平李云龙赵勇琴禹文海魏大巧

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