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一种弧菌外膜蛋白A表位抗原及其重组抗原的制备方法和应用
本发明公开了一种弧菌外膜蛋白A表位抗原及其重组抗原的制备方法和应用,特点是利用表位技术设计出灿烂弧菌、副溶血弧菌和溶藻弧菌的外膜蛋白合成的蛋白表位抗原序列,其氨基酸序列为SEQ ID NO.4所示,其表位重组抗原...
张真李成华苏秀榕吕志猛
一种具有血清型保护性的猪链球菌表位抗原及其应用
本发明公开了一种具有血清型保护性的猪链球菌表位抗原,所述猪链球菌表位抗原MEAS的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了含有所述猪链球菌表位抗原的猪链球菌亚单位疫苗。本发明中的表位抗原可激活小鼠...
马家乐刘嘉楠蒲晚霞吴宗福姚火春
针对猫FIPV的表位抗原构建RNA疫苗的方法
本发明提出了一种针对猫FIPV的表位抗原构建RNA疫苗的方法。所述方法涉及一种分离的核酸分子。所述核酸分子包括:第一核酸片段、第二核酸片段、第三核酸片段、第四核酸片段和第五核酸片段中的至少之一;其中,所述第一核酸片段来...
刘强李翠翠廖微曦黄慧雅
针对猫FIPV的表位抗原构建环状RNA疫苗的方法
本发明提出了一种针对猫FIPV的表位抗原构建环状RNA疫苗的方法。所述方法涉及一种分离的核酸分子。所述核酸分子包括:第一核酸片段、第二核酸片段、第三核酸片段、第四核酸片段和第五核酸片段中的至少之一;其中,所述第一核酸片...
刘强李翠翠廖微曦刘淦黄慧雅
基于生物信息学诺如病毒表位抗原的构建及鉴定
2024年
目的:基于生物信息学技术设计诺如病毒(NoV)的表位抗原并进行制备及鉴定。方法:采用生物信息学方法构建NoV表位抗原NoV-ZH并进行分析。通过原核表达系统制备重组蛋白并鉴定,经动物免疫、杂交瘤技术制备单克隆抗体,并在胶体金平台初步应用。结果:设计的表位抗原二级结构中无规卷曲占比较大,理论分子质量及等电点(PI)为13.1 ku、7.16,性质稳定,亲水性较好。免疫评估显示具有良好的免疫原性,可激活体液免疫应答和细胞免疫应答。抗原序列连接pET-28a(+)、pET-32a载体后制备的蛋白分别以包涵体蛋白、可溶性蛋白的形式表达。经动物免疫、杂交瘤技术获得一对配对抗体,应用于胶体金试纸条灵敏度达0.5 ng/ml,试纸条可特异性结合两种基因型NoV重组衣壳蛋白。结论:成功制备诺如病毒表位抗原并鉴定,为后续NoV通用型检测靶点探究及诊断原材料开发提供参考。
杜雪赵印震张怡青王晓军王旭东郭兰英王云龙
关键词:诺如病毒生物信息学分析多表位抗原
一种具有血清型保护性的猪链球菌表位抗原及其应用
本发明公开了一种具有血清型保护性的猪链球菌表位抗原,所述猪链球菌表位抗原MEAS的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了含有所述猪链球菌表位抗原的猪链球菌亚单位疫苗。本发明中的表位抗原可激活小鼠...
马家乐 刘嘉楠 蒲晚霞吴宗福姚火春
NoV P颗粒嵌合PEDV S1 基因表位抗原的制备
2024年
为制备诺如病毒(Norovirus,NoV)P颗粒嵌合猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)S1基因表位抗原.本研究通过设计合成PEDV S1表位基因序列,酶切后连接到诺如病毒P基因重组pGEX-4T-1载体,将载体转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞后,提取质粒进行双酶切验证和测序.将测序正确的重组质粒转化至BL21表达菌体,使用不同浓度异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)在不同诱导时间下进行原核表达,确定最佳诱导条件,并对重组蛋白进行可溶性分析.使用鼠源谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferase,GST)单抗和PEDV阳性血清通过蛋白免疫印迹试验检测纯化后的重组蛋白.重组质粒NoV P-partical-PEDV-SE经双酶切鉴定获得大小约510 bp的目的基因条带,进一步测序结果证明重组质粒构建成功.诱导表达的重组蛋白分子质量约为79 ku,与预期大小一致.使用1.0 mmol/L IPTG在37℃条件下培养2 h作为最佳诱导条件,对超声破碎后的菌体进行检测,试验结果显示重组蛋白可在上清液中表达.鼠源GST单抗与PEDV阳性血清均能特异性地识别纯化后的重组蛋白,表明该重组蛋白具有良好的反应原性.本研究通过对NoV P-partical-PEDV-SE蛋白原核表达及纯化,成功获得大量纯度较高的重组蛋白,为进一步制备猪流行性腹泻表位口服疫苗,实现对PEDV的有效预防奠定基础.
章程罗沛周德荣付新亮阳佑天黄运茂刘文俊
关键词:猪流行性腹泻病毒
猪流行性腹泻病毒表位抗原、编码基因、制备方法及应用
本发明提供了一种编码猪流行性腹泻病毒表位抗原的基因,以及一种猪流行性腹泻病毒表位抗原,还提供了上述猪流行性腹泻病毒表位抗原的制备方法。本发明具有以下优点和有益效果:1)上述猪流行性腹泻病毒表位抗原是的利用诺如病毒...
刘文俊杨培洁邓汝森周德荣黄运茂田允波
肠球菌脂磷壁酸合成蛋白表位抗原及其制备方法和应用
本发明公开了肠球菌脂磷壁酸合成蛋白表位抗原及其制备方法和应用,特点是抗原的氨基酸序列为SEQ ID NO.15所示,肠球菌脂磷壁酸合成蛋白表位重组抗原的制备方法包括制备14种肠球菌属的脂磷壁酸合成的蛋白表位抗原序列...
苏秀榕刘岩张真周君
表达具核梭杆菌表位抗原的重组候选疫苗株
成功构建了含重组pGEX‑1λT‑Fap2和pGEX‑1λT‑FomA的E.coliBL2l(DE3)表位抗原疫苗候选菌株,并进行了初步鉴定,为后续抗具核梭杆菌(F.nucleatum)的免疫预防和治疗奠定了基础。
朱森林徐慧文

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