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仙茅苷对大鼠骨髓基质细胞体外增殖及成骨分化的影响
2024年
目的:研究仙茅苷对体外培养的大鼠骨髓基质细胞的增殖及成骨分化的影响。方法:将仙茅苷(25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL,200μg/mL)作用于体外培养的大鼠骨髓基质细胞,CCK-8法检测仙茅苷对细胞增殖的影响,碱性磷酸酶(ALP)活性测定法进行ALP的表达情况的检测。结果:各浓度仙茅苷组均能促进大鼠骨髓基质细胞的增殖和碱性磷酸酶的表达(P<0.05),且在浓度为100μg/mL时作用最为显著。结论:仙茅苷对骨髓基质细胞的增殖有促进作用并能促进其成骨分化。
苏佳雨王锡明赵刚石金明李超柴傲然
关键词:仙茅苷骨髓基质细胞增殖成骨分化
左归丸对卵巢切除所致骨质疏松症大鼠骨髓基质细胞Hedgehog信号通路的影响
实验目的本研究以卵巢切除(OVX)大鼠作为肾虚型骨质疏松症(OP)模型,基于Hedgehog-GLi信号通路探讨补肾方药左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠的治疗作用及机理。以期进一步阐明“肾主骨”机理,为中医治疗骨质疏松提...
王雨荷
关键词:左归丸骨质疏松症HEDGEHOG信号通路破骨细胞
Ⅰ型胶原及骨膜蛋白在骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片中的表达研究被引量:2
2022年
目的:探究Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、骨膜蛋白(POSTN)在骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(BMSC)膜片中的表达情况。方法:在体外分离培养骨质疏松大鼠BMSCs,鉴定其克隆形成能力、多向分化能力,采用富含L-抗坏血酸培养基连续诱导构建细胞膜片,诱导5、10 d形成的细胞膜片经HE染色及Masson染色后,观察细胞膜片结构,分别采用qRT-PCR及免疫组织化学染色检测细胞基质(ECM)中Col-Ⅰ、POSTN在基因及蛋白水平的表达情况。结果:体外分离培养的骨质疏松大鼠BMSCs具有克隆形成能力及成骨、成脂分化能力,L-抗坏血酸连续诱导获取的细胞膜片富含ECM;qRT-PCR结果显示,诱导第10天细胞膜片的ECM相关基因Col-Ⅰ及POSTN的mRNA相对表达量高于第5天(P<0.05);免疫组织化学染色结果显示诱导时间延长,细胞膜片中的ECM相应增多,且高表达Col-Ⅰ及POSTN。结论:PMO大鼠BMSC膜片可保留自身分泌的ECM,细胞膜片富含Col-Ⅰ及POSTN,为后续自体移植细胞膜片实现骨质疏松状态下骨组织再生提供帮助。
李丽生何梦娇骆凯何武兵
关键词:绝经后骨质疏松症细胞外基质胶原
大鼠骨髓基质细胞分化为施万细胞细胞过程中的基因表达变化
2021年
目的:利用转录组测序技术(RNA-seq)检测骨髓基质细胞(BMSCs)分化为施万细胞(SCs)样细胞过程中基因表达谱的变化,筛选与分化相关的差异表达基因,并分析与分化相关的信号通路。方法:体外培养大鼠BMSCs,用三步诱导法对其进行诱导,在复合生长因子诱导第12 h和7 d收集样本。经Illumina测序平台对BMSCs、诱导培养基(DM)诱导12 h(DM-12 h)和7 d(DM-7 d)的细胞进行生物信息分析,采用Cluster Profiler软件对差异基因集进行GO功能和KEGG代谢通路富集分析。结果:与BMSCs组相比,DM-12 h组有578个基因表达上调,632个基因表达下调;与DM-12 h组相比,DM-7 d组有1165个基因表达上调,872个基因表达下调;与BMSCs组相比,DM-7 d组有629个基因表达上调,529个基因表达下调。经Venn分析,共筛选出140个在各阶段共同表达的差异基因,其中与分化相关的基因主要富集在细胞周期、DNA复制和p53信号通路;并确定Ccne2、Mcm3和Rrm2可作为下一步研究的候选基因。结论:本研究首次基于转录组测序构建BMSCs诱导分化为SCs样细胞的基因表达谱,揭示分化过程中的差异基因,并筛选出Ccne2、Mcm3和Rrm2作为研究目的基因,为阐明BMSCs分化为SCs样细胞的机制提供依据。
陈娇张丹丹李军平牛建国何仲义贾桦
关键词:骨髓基质细胞分化转录组测序
Periostin介导雌激素调控卵巢摘除大鼠骨髓基质细胞成骨分化的机制研究
研究背景  绝经后骨质疏松症(PostmenopausalOsteoporosis,PMO),作为常见、高发的系统性代谢性骨疾病,受到越来越多研究者的关注。众所周知,绝经后妇女易出现骨质疏松,已证实这一现象与体内的雌激素...
李春绒
关键词:17Β-雌二醇骨髓基质细胞成骨分化WNT/Β-CATENIN通路
大鼠骨髓基质细胞体外培养及CEMP1基因转染研究
目的:体外培养大鼠骨髓基质细胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs),构建携带人牙骨质蛋白(cementum-protein,CEMP)1基因的慢病毒载体并转染rBMSCs,探讨CE...
吴玉铭
关键词:骨髓基质细胞慢病毒基因转染
甲萘醌7对体外培养大鼠骨髓基质细胞分化的影响
2018年
背景:目前甲萘醌7的研究主要集中在其抗骨质疏松的作用方面,关于其对体外细胞培养体系中大鼠骨髓基质细胞的作用尚不明确。目的:观察甲萘醌7对大鼠骨髓基质细胞增殖及分化的影响。方法:提取大鼠骨髓基质细胞,体外培养扩增后,种植骨髓基质细胞细胞培养皿中,分别用质量浓度10^(-6),10^(-5),10^(-4)g/L的甲萘醌7及100μg/L的碱性成纤维细胞生长因子诱导骨髓基质细胞增殖,检测不同组骨髓基质细胞的相应吸光度值。于第2,4,6和8天检测骨髓基质细胞碱性磷酸酶水平和钙结节数量,并检测骨钙素、骨桥蛋白和Runx2蛋白的mRNA表达情况。结果与结论:①细胞增殖:甲萘醌7诱导的骨髓基质细胞增殖良好,各浓度的甲萘醌7及碱性成纤维细胞生长因子组均有促进骨髓基质细胞增殖的作用(P<0.05);②相关蛋白mRNA表达:甲萘醌7组比对照组能表达更多的碱性磷酸酶和钙结节。质量浓度10^(-4)g/L的甲萘醌7能上调骨钙素、骨桥蛋白和Runx2蛋白mRNA的表达(P<0.05);③结果证实,甲萘醌7能诱导骨髓基质细胞向成骨方向分化,可用于骨组织工程中种子细胞的诱导剂。
徐兵柳园
关键词:碱性成纤维细胞干细胞骨髓干细胞骨髓基质细胞成骨分化骨组织工程
淫羊藿苷对高糖培养条件下大鼠骨髓基质细胞Shh通路的影响
2018年
目的探讨淫羊藿苷对高糖培养条件下大鼠骨髓基质细胞Shh信号通路的影响。方法实验分组:正常组(2%胎牛血清+DMEM培养的细胞),高糖组(2%胎牛血清+高糖-DMEM培养的细胞),淫羊藿苷组1(2%胎牛血清+DMEM+淫羊藿苷培养的细胞),淫羊藿苷组2(2%胎牛血清+高糖-DMEM+淫羊藿苷培养的细胞);荧光定量测定Shh通路相关基因——补丁基因1(PTCH1)和光滑基因(SMO)的表达情况。结果淫羊藿苷组1与其他组比较:PTCH1和SMO基因的表达均明显增高(P<0.05)。结论淫羊藿苷对高糖培养条件下大鼠骨髓基质细胞Shh通路有加强作用。
李春梅王馨吴丽春康立勋李海清马晟利
关键词:淫羊藿苷高糖骨髓基质细胞SHH
骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片制备过程中纤维连接蛋白表达检测
2018年
目的探讨骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(BMSC)膜片体外构建过程中纤维连接蛋白(FN)的表达情况。方法体外分离培养骨质疏松大鼠BMSC,采用含50μg/mL维生素C的培养基连续培养构建细胞膜片,通过倒置显微镜和组织学染色对细胞膜片进行形态学观察;利用免疫荧光染色、实时荧光定量聚合酶链反应及Western-blot检测细胞基质中FN在基因和蛋白水平的表达情况。结果采用含维生素C的培养基连续培养可获得含多层细胞及丰富胞外基质的BMSC细胞膜片。免疫荧光染色、实时荧光定量聚合酶链反应及Western-blot检测结果显示所构建的细胞膜片高表达FN。结论以浓度为50μg/mL的维生素C培养基连续培养可成功构建骨质疏松大鼠BMSC细胞膜片,膜片富含FN,有望应用于骨质疏松状态下牙槽骨缺损的治疗。
陈玉玲何梦娇何梦娇伍晓红伍晓红李艳芬陈超
关键词:骨质疏松骨髓骨髓细胞纤连蛋白类
D-半乳糖诱导大鼠骨髓基质细胞衰老及其机制被引量:6
2017年
目的构建大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)体外和体内衰老模型,观察BMSCs衰老生物学特性。方法体外对照组:常规培养大鼠骨髓BMSCs,取第三代(P3)细胞继续培养48 h;体外衰老组:在对照组基础上加入D-半乳糖(D-Gal,终浓度30 g/L),作用48 h;体内衰老组:大鼠皮下注射D-Gal(120 mg/kg·d),qd×42 d;体内对照组:注射等时等量0.9%氯化钠溶液,模型完成第2天,分离培养BMSCs,取P3细胞进行实验。检测:CCK-8测定细胞增殖;流式细胞术分析周期和凋亡率;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察BMSCs衰老百分率;DCFH-DA荧光流式细胞术检测活性氧簇(ROS)水平,酶学法检测过氧化物丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blot检测P16、P21、P53、CDK2和cyclin D表达。结果 D-Gal体外与体内致衰老组BMSCs增殖能力下降;细胞G0/G1期比例增高、S期比例降低(P<0.05);SA-β-Gal染色阳性百分率上升(P<0.05);胞内ROS、MDA上升,SOD下降(P<0.05);P16、P21、P53表达上调,CDK2、cyclin D下调(P<0.05)。结论 D-Gal在体内与体外均能构建BMSCs衰老模型,其机制与D-Gal诱导BMSCs氧化损伤和激活衰老信号途径相关。
侯吉颖陈雄斌陈粼波熊丽溶王璐黄国宁王亚平
关键词:骨髓基质细胞D-半乳糖

相关作者

骆凯
作品数:109被引量:342H指数:9
供职机构:福建医科大学
研究主题:骨髓基质细胞 牙周炎 骨质疏松大鼠 骨髓基质 牙周病
徐如祥
作品数:1,097被引量:5,164H指数:28
供职机构:中国人民解放军总医院
研究主题:神经干细胞 颅脑损伤 脑损伤 骨髓基质细胞 帕金森病
闫福华
作品数:434被引量:1,687H指数:20
供职机构:南京大学医学院附属口腔医院
研究主题:牙周炎 骨髓基质细胞 牙周病 牙周组织再生 龈沟液
姜晓丹
作品数:532被引量:1,892H指数:20
供职机构:南方医科大学珠江医院
研究主题:神经干细胞 骨髓基质细胞 骨髓源性神经干细胞 细胞分化 神经胶质瘤
李学东
作品数:55被引量:224H指数:8
供职机构:汕头大学医学院第一附属医院
研究主题:三七总皂甙 缝隙连接细胞间通讯 肝卵圆细胞 骨髓基质细胞 缝隙连接蛋白