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一种Hobi样病毒实时荧光RT-PCR检测方法
本发明属于生物技术领域。本发明提供了一种Hobi样病毒实时荧光RT‑PCR检测的引物、试剂盒及检测方法。所述引物的序列为:上游引物F:GGTAGTCGTCAATGGTTC;下游引物R:CCGCTTGAGTTAAGATTC...
罗阿东周思旋杨莉徐景峨李洁朱祉聿陈霄殷倩
用于实时荧光定量PCR的组合物及其应用
本发明提供一种用于实时荧光定量PCR的组合物及其应用,属于核酸或微生物的测定或检验领域。本发明提供的用于实时荧光定量PCR的组合物,包括特异性正向引物、特异性反向引物和特异性探针,其中,特异性正向引物和特异性反向引物用于...
肖冰冰赵雨航陈超唐羚容
一种实时荧光定量PCR数据处理方法及装置
本发明提供一种实时荧光定量PCR数据处理方法及装置,所述方法包括:获取采集的目标样本中每个循环节点所对应的实测荧光数据,通过预设串扰校正模型对实测荧光数据进行校正,得到消噪荧光数据;针对消噪荧光数据做线性拟合处理,得到目...
张芷齐李树力李金泽姚佳郭振李超周恒
实时荧光定量PCR快速检测药品中大肠埃希菌
2025年
目的 建立一种药品中大肠埃希菌的实时荧光定量PCR快速检测方法。方法 根据大肠埃希菌malB基因序列,设计通用引物和探针,优化扩增反应体系,进行实时荧光定量PCR扩增,当出现C_t值时,说明供试品中检出大肠埃希菌。结果 大肠埃希菌基因组DNA检测限可达10^(-3 )ng,药品中大肠埃希菌检测限达3 cfu/g(ml),仅需24 h即可完成检测,采用该方法检测20批药品,结果与药典方法一致。结论 方法检测特异性强、所需时间短、灵敏度高,可作为《中国药典》大肠埃希菌检查法的补充方法。
李杰张华林鹏王家芳肖艳霞钱云开
关键词:中国药典药品大肠埃希菌实时荧光定量PCR
基于实时荧光PCR检测基因编辑大豆的引物和方法
本发明提供了一种基于实时荧光PCR技术检测基因编辑大豆的引物和方法。可以快速高效地检测大豆的基因型,鉴定编辑类型,特异性高、灵敏度高且成本较低,检测周期短,有良好的应用前景。
苗伟谢秀菊
核酸提取产物中乙醇对实时荧光定量PCR的影响
2025年
目的研究核酸提取产物中乙醇对实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)的影响,为更高灵敏度核酸检测提供乙醇浓度界限。方法建立重铬酸钾氧化法检测两种商品化磁珠法核酸提取试剂盒提取产物的乙醇残留,检测其是否对qPCR产生影响,再将不同浓度乙醇溶液混合核酸模拟提取产物溶解冷冻干燥处理的qPCR试剂(以下简称冻干试剂)并进行扩增,观察其灵敏度变化,并对Ct值、荧光增益强度和扩增效率进行统计学分析。结果两种试剂盒的提取产物中残留3%~9%乙醇,对扩增均造成影响,有可能会导致灵敏度下降。对于人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV),乙醇浓度达到4.38%时,荧光增益强度差异有统计学意义(P<0.001),扩增效率出现明显差异;对于呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV),乙醇浓度达到2.63%时,荧光增益强度差异有统计学意义(P=0.004);乙醇浓度达到3.50%时,Ct值差异有统计学意义(P=0.004),扩增效率出现明显差异。结论乙醇会影响qPCR灵敏度、Ct值、荧光增益和扩增效率。为进行更高灵敏度的核酸检测,建议乙醇在提取产物中的残留不超过3.50%。
龚向莲黄玉麟林伟春杨连威胡祐邵珊张东旭
关键词:乙醇实时荧光定量PCR冷冻干燥
花椰菜实时荧光定量PCR内参基因的筛选与评价
2025年
为筛选适合花椰菜稳定表达的内参基因,利用实时荧光定量PCR技术,分析检测9个候选内参基因ACT1、ACT2、ACT7、TUB、EF-1α、EF-1β、GAPDH、UBQ和HIS在花椰菜不同组织、不同品种和花球不同发育时期处理下mRNA的表达稳定性。利用3个数据分析软件(geNorm,NormFinder和BestKeeper)综合评价9个候选内参基因的表达稳定性。结果表明,在花椰菜不同组织、不同品种和花球不同发育时期处理下,候选内参基因的表达稳定性存在差异。ACT2和EF-1α在不同组织处理下表达最为稳定;ACT7和TUB在不同品种处理下表达稳定性最好;ACT7和GAPDH在花球不同发育时期处理下被筛选为最合适的内参基因组合。结果表明,在特定条件下,获得合适的内参基因为花椰菜新基因表达分析的准确性提供了保障,并为十字花科芸薹属植物关键基因的挖掘提供了有益的参考。
林珲裘波音张前荣李大忠温庆放
关键词:花椰菜内参基因实时荧光定量PCR
实时荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌的研究
2025年
目的:构建快速检测食品中沙门氏菌的实时荧光定量PCR法。方法:以沙门氏菌核酸DNA提取物为模板开展荧光检测实验,建立快速检测手段,用于阳性培养液及食品中沙门氏菌检测分析。结果:该方案能在30批食品样本中成功扩增出沙门氏菌特异性片段,最低检出浓度15CFU/mL,检测时长<24h。结论:本研究提出的实时荧光定量PCR法具有高效、快速、灵敏、精准的特点,可广泛应用于食品中沙门氏菌的快速筛查与检测,为食品安全监控提供强有力的技术支持。
刘占生张莉王嫘
关键词:实时荧光定量PCR沙门氏菌
一种实时荧光PCR检测金黄色葡萄球菌的方法及应用
本发明涉及细菌检测技术领域,目的是提供一种实时荧光PCR检测金黄色葡萄球菌的方法及应用。该方法包括如下步骤:(1)样本采集;(2)提取待测样本基因组:对采集好的样本进行提取,取一定量终产物样本基因组作为后续模板;(3)实...
李红良张鑫王周祥罗莉妍
一种基于LAMP法的恒温实时荧光定量多通道检测设备
本发明是一种基于LAMP法的恒温实时荧光定量多通道检测设备,属于分子生物学以及医疗检测仪器领域,如图1,本机包括:用于控制各模块有序工作的中央处理控制系统,(1)用于放置反应管的多通道模块化即插即用检测系统,最多96通道...
齐希峰刘清梅

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陈颖
作品数:524被引量:2,248H指数:24
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研究主题:试剂盒 引物 食品 实时荧光PCR 探针
李桂源
作品数:573被引量:1,617H指数:21
供职机构:中南大学
研究主题:鼻咽癌 鼻咽癌细胞 低表达 非编码RNA 非编码
朱水芳
作品数:322被引量:1,383H指数:22
供职机构:中国检验检疫科学研究院
研究主题:实时荧光PCR 引物 试剂盒 植原体 病毒
曾朝阳
作品数:244被引量:299H指数:11
供职机构:中南大学
研究主题:鼻咽癌 低表达 鼻咽癌细胞 非编码RNA 预后预测
熊炜
作品数:274被引量:327H指数:11
供职机构:中南大学
研究主题:鼻咽癌 低表达 鼻咽癌细胞 非编码RNA 预后预测