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基于唾液酸酶和岩藻糖转移酶的抗体—细胞偶联物构建被引量：1: 2023年; 目的通过基于唾液酸酶和岩藻糖转移酶的糖链工程将曲妥珠单抗高密度偶联到人外周血白血病T细胞Jurkat细胞,并评价偶联细胞对HER2+靶细胞的识别活性。方法首先通过凝集素染色和流式细胞术探究去唾液酸化对细胞上α-1,3FucT催化的岩藻糖编辑效率的影响。然后制备含有叠氮标签的曲妥珠单抗,与GDP-炔基岩藻糖通过生物正交反应构建GDP-岩藻糖-抗体偶联物。再利用α-1,3FucT将GDP-岩藻糖-抗体偶联物转移至唾液酸酶处理过的细胞表面,构建抗体-细胞偶联物,并通过流式细胞术和共聚焦成像验证。最后通过荧光成像观察抗体-细胞偶联物对靶细胞SK-BR-3细胞的识别。结果细胞表面糖链的末端α-2,6唾液酸切除后能够显著提升α-1,3FucT催化的岩藻糖编辑的效率,成功制备GDP-岩藻糖-抗体偶联物并转移至细胞表面得到曲妥珠单抗-Jurkat偶联物,去唾液酸化显著增加了Jurkat细胞偶联曲妥珠单抗的容量,构建的曲妥珠单抗-Jurkat偶联物具备HER2+细胞靶向性。结论细胞糖链工程可实现细胞偶联分子容量的调节,应用于抗体对免疫细胞的功能化,也为构建海洋糖类活性化合物偶联细胞提供了新的思路。; 王明婧范晨晨王倩蒋昊; 关键词：曲妥珠单抗 JURKAT细胞唾液酸

猪岩藻糖转移酶8(FUT8)对大肠杆菌F18抗性的作用机制分析及候选遗传标记鉴定: 产肠毒素大肠杆菌F18(EscherichiacoliF18,E.coliF18)引起的断奶仔猪细菌性腹泻是当前集约化、规模化养猪生产中较为常见的一类传染性肠道炎症疾病，细菌性腹泻相对于病毒性腹泻而言，虽然死亡率不高，但...; 吴丽思; 关键词：核心启动子

一种岩藻糖转移酶8(FUT8)功能缺失细胞株的构建方法及其应用: 本发明公开了一种岩藻糖转移酶8(FUT8)功能缺失细胞株的构建方法及其应用。本发明通过筛选并选取FUT8的活性位点，采用碱基编辑技术，在不引入外源蛋白、且不破坏内源蛋白整体结构的情况下，以最小的基因层面的改动，达到让构建...; 袁燕秋毛洋王圣钧王军舰何羽骐钟雨伦

POFUT2（蛋白-O-岩藻糖转移酶2）在结肠癌中的表达及其预后价值研究: 目的和意义:结肠癌（colon cancer,CC）是临床常见的消化系统恶性肿瘤,近年无论是全球癌症数据还是中国癌症数据,均显示结肠癌的发病率和死亡率逐年上升。临床上对于结肠癌的早期诊断和预后预测仍然是一个亟待解决的难题...; 陈柏桦; 关键词：结肠癌 EMT 生存期

一种岩藻糖转移酶8（FUT8）功能缺失细胞株的构建方法及其应用: 本发明公开了一种岩藻糖转移酶8(FUT8)功能缺失细胞株的构建方法及其应用。本发明通过筛选并选取FUT8的活性位点，采用碱基编辑技术，在不引入外源蛋白、且不破坏内源蛋白整体结构的情况下，以最小的基因层面的改动，达到让构建...; 袁燕秋毛洋王圣钧王军舰何羽骐钟雨伦; 文献传递

α-1,3岩藻糖转移酶FucTs在三角褐指藻蛋白质N-糖基化修饰途径中的功能研究: 随着重组治疗蛋白药物研发和蛋白质糖基化机制研究的不断深入，糖蛋白药物对人类健康的重要作用越来越受到重视。目前，获得广泛应用的重组治疗蛋白药物绝大多数为糖蛋白，然而至今还没有一个非常理想能广泛用于糖蛋白药物生产的表达系统。...; 谢茜慧; 关键词：岩藻糖基转移酶三角褐指藻

一种人源岩藻糖转移酶8的原核表达方法及其产品: 本发明公开了一种岩藻糖转移酶8的原核表达方法及其产品，其中一种岩藻糖转移酶8的原核表达方法，其包括，构建截短型岩藻糖转移酶8，得Fut8ΔTM；构建重组表达质粒；将所述重组表达质粒转化表达宿主菌，表达、纯化；其中，所述F...; 高晓冬陆天天王宁; 文献传递

α--(1，2)岩藻糖转移酶Ⅱ基因过表达对胰腺癌细胞功能的影响/血清CA19--9正常型胰腺癌临床研究/引入脉管瘤栓对第8版胰腺导管腺癌AJCC分期系统的改进: 第一部分α-(1，2)岩藻糖转移酶Ⅱ基因过表达对胰腺癌细胞生物学行为的影响　　目的:构建FUT2基因过表达慢病毒载体，并使用此载体转染胰腺癌PaCa-2细胞，构建FUT2基因过表达的PaCa-2细胞，初步探索FUT2基因...; 赵亚杰; 关键词：胰腺癌胰腺导管腺癌; 文献传递

α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞中HER2/neu表达及活性的影响: 2018年; 目的:探讨α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyltransferase,FUT1)基因转染对人卵巢癌细胞中HER2/neu表达及活性的影响。方法:分别应用Real time PCR、免疫细胞化学染色和Western blot方法检测转染前后卵巢癌细胞中HER2/neu在基因、蛋白水平上的表达和磷酸化情况,利用免疫共沉淀方法检测HER2/neu蛋白上是否有Lewis(y)结构。结果:Real time PCR结果显示转染后细胞中HER2/neu mRNA表达明显增高。免疫细胞化学染色、免疫共沉淀结合Western blot检测到转染后卵巢癌细胞中HER2/neu蛋白和Lewis(y)抗原的表达均较转染前显著增加,HER2/neu蛋白上有Lewis(y)抗原结构。Western blot结果显示基因转染后HER2/neu的酪氨酸磷酸化水平显著升高。结论:Lewis(y)抗原是HER2/neu结构上的一部分,其表达增加不但促进卵巢癌细胞中HER2/neu的表达,还激活了HER2/neu受体酪氨酸激酶。; 刘娟娟齐跃郝莹莹林蓓; 关键词：卵巢癌 HER2/NEU FUT1基因

结核分枝杆菌对巨噬细胞岩藻糖转移酶家族基因表达的影响: 2016年; 目的研究结核分枝杆菌标准株H37Rv(inactivated H37Rv,i H37Rv)刺激巨噬细胞RAW264.7细胞后,对岩藻糖转移酶家族中的10个糖基转移酶表达的影响。方法用热灭活的i H37Rv刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7,用qRT-PCR(quantitative realtime polymerase chain reaction)检测i H37Rv分别刺激RAW264.7细胞0 h、4 h、8 h、12 h后对巨噬细胞中10个岩藻糖基转移酶的mRNA表达水平的影响。凝集素染色和流式细胞术检测岩藻糖转移酶对应的糖苷的表达变化。结果 i H37Rv分别刺激RAW264.7细胞0 h、4 h、8 h、12 h后,岩藻糖转移酶1(FUT1)基因的表达随着刺激时间的延长而逐步下调。凝集素染色和流式细胞术检测显示特异性结合岩藻糖转移酶-FUT1对应糖苷的小扁豆凝集素(lens culinaris agglutinin,LCA)在i H37Rv刺激巨噬细胞12 h后结合巨噬细胞上对应的糖苷的能力下降了4.6%。结论 FUT1糖基转移酶在i H37Rv刺激巨噬细胞后发生下调,其有可能作为结核分枝杆菌感染的诊断分子标志和治疗新靶点。; 胡锋潘勤章晓联; 关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞糖基转移酶

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