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柑橘衰退病晚期抑制差减cDNA文库的构建及初步分析: 2017年; 为了研究柑橘衰退病晚期应答的分子机理,利用经典的抑制差减杂交技术,以感染柑橘衰退病3年后的‘不知火’杂柑实生苗叶片组织的c DNA为测试方,以脱毒的‘不知火’实生苗叶片组织的c DNA为驱动方进行差减杂交,构建了柑橘衰退病诱导的正向抑制差减c DNA文库。随机挑取此文库中210个阳性克隆进行测序,获得了192条有效序列。将这些EST序列聚类拼接后,共获得77条非重复序列。对这些EST进行GO和KEGG分析,发现这些EST的功能主要与胁迫及防御、代谢、转录、转运、蛋白命运等途径相关。用实时定量RT-PCR验证了其中4个基因:几丁质酶基因、茉莉酸响应基因的转录抑制因子1基因(JAZ1)、钙调素结合蛋白基因、咖啡酸—氧甲基转移酶基因,结果表明在衰退病的诱导下,‘不知火’杂柑叶片中这4个基因的表达量均有明显提高,说明这些基因可能参与了‘不知火’杂柑叶片晚期衰退病应答。JAZ1基因的上调表达表明可能宿主衰退病晚期应答过程中的诱导系统抗性受到了抑制。; 曾正容闫树堂; 关键词：杂柑柑橘衰退病抑制差减杂交应答基因

细菌诱导光滑鳖甲幼虫抑制差减cDNA文库的构建与分析被引量：2: 2016年; 本研究以光滑鳖甲幼虫的cDNA为材料,应用抑制差减杂交（Suppression Subtractive Hybrriization,SSH）技术构建细菌诱导的光滑鳖甲幼虫抑制差减cDNA文库,并利用反向Northern杂交技术获得差异基因.结果表明,随机挑取的阳性克隆的大小均为20（0～750 bp,符合差减文库PCR产物片段的大小.通过斑点杂交技术共筛选出940个差异基因片段,对其克隆、测序及同源性分析后鉴定出70种编码蛋白的基因ESTs序列,所得ESTs序列主要涉及免疫防御、代谢过程、生长发育类等相关基因.细菌诱导光滑鳖甲幼虫抑制差减cDNA文库的构建,为进一步克隆光滑鳖甲免疫抗菌相关基因及其免疫防御机制的研究奠定了基础.; 刘忠渊王鹏毛新芳; 关键词：光滑鳖甲抑制差减杂交 CDNA文库

烟草差减cDNA文库构建及烟碱相关EST序列分析: 烟碱是影响烟叶及卷烟产品品质的重要物质。为了发掘影响烟碱合成的关键基因，将其应用于烟碱含量性状的分子调控上，从而使烟碱含量能够处于适宜的范围。本研究通过测定不同杂交组合打顶前后的烟碱含量，筛选不同优势表现的杂交组合及其亲...; 龙瑶; 关键词：烟草 CDNA文库烟碱含量杂交组合 EST序列分析

大叶落地生根胎生苗差减cDNA文库的构建及相关基因的克隆: 大叶落地生根(K.daigremontiana)别名花蝴蝶、倒吊莲、大还魂，是景天科(Crassulaceae)伽蓝菜属(Kalanchoe adans.)中一种极易栽培的观赏植物。大叶落地生根的胎生苗无性繁殖过程，同时...; 钟天秀; 关键词：无性繁殖基因克隆

甘草愈伤组织遗传转化体系建立与盐胁迫差减cDNA文库构建: 甘草是中药中最常用的药材之一。人工种植的甘草因诸多客观条件限制使得甘草所含有的主要药用次生代谢产物含量很低,进而影响到甘草的药用价值。随着生物技术的发展,通过生物工程技术来调控甘草次生代谢途径,从而提高其有效成分含量成为...; 陈子龙; 关键词：胀果甘草盐胁迫愈伤组织遗传转化体系; 文献传递

光滑鳖甲（Anatolica Polita）差减cDNA文库的构建和免疫相关蛋白基因的克隆: 与脊椎动物相似，昆虫在进化中形成强大的免疫系统，包括先天免疫系统和获得性免疫系统，由于缺乏对昆虫获得性免疫的认知，目前的研究主要针对昆虫的先天免疫系统。昆虫的先天免疫系统主要包括三个通路：Toll通路、Imd通路和JAS...; 王鹏; 关键词：光滑鳖甲 RNA提取抗菌肽肽聚糖识别蛋白; 文献传递

中国林蛙辛基酚暴露后精巢差减cDNA文库的构建及分析: 为阐明烷基酚对两栖动物精巢功能的干扰机制,探索烷基酚对基因表达的影响,将雄性中国林蛙(Rana chensinensis)暴露于10-6mol/L辛基酚(4-tert-Octylphenol, OP)水体,在处理30天取...; 刘佳; 关键词：中国林蛙辛基酚差减文库雌激素效应; 文献传递

镉诱导隆线溞(Daphnia carinata)生殖转化基因差减cDNA文库的构建与分析被引量：3: 2012年; 采用抑制性差减杂交方法进行了镉诱导下隆线溞生殖转化基因的抑制性差减cDNA文库的构建研究。结果显示,其差异表达基因被富集了210倍左右,PCR鉴定发现95%的克隆均含有200—800bp的插入片段;测序获得的252个有效EST中,与细胞分裂相关的有4个,与细胞结构和功能相关的有52个,与细胞代谢相关的有34个,与信号传导相关的有16个,与细胞防御相关的有10个,与基因和蛋白质表达相关的有76个,未知功能的EST有22个,在GenBank中找不到任何同源序列的EST有38个。结果表明,构建的差异表达cDNA文库具有很强的差减效率,可较好地反映镉诱导下隆线溞差异表达的生殖转化基因信息。; 罗文曾文涛王东方郑大恒韩继卫; 关键词：镉生殖抑制性差减杂交

半番鸭羽色性状差减cDNA文库构建及差异表达基因研究: 本实验以半番鸭为实验材料，以DSN酶介导的均一化消减杂交为实验手段，构建半番鸭羽色性状相关基因消减文库，旨在发现与半番鸭羽色相关的基因，探索羽色性状基因表达调控的分子机制。本实验构建了1个半番鸭羽色性状相关基因的消减杂交...; 陈晓燕; 关键词：半番鸭 DSN 消减杂交 CDNA文库

低温解除百合鳞茎休眠过程中抑制性差减cDNA文库构建及EST分析: 百合是世界著名的球根花卉,具有自然休眠特性。百合鳞茎休眠的研究目前主要集中在低温解除休眠过程中的形态变化和生理生化变化方面,而分子水平的研究尚是空白。本研究以麝香百合/(Lilium longiflorum/)为试材,构...; 马春莲; 关键词：麝香百合休眠解除抑制性差减杂交; 文献传递

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