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微丝骨架结合蛋白在未成熟树突状细胞抗原吞噬过程中的差异表达分析
2024年
目的探讨未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDCs)发挥抗原吞噬功能时关键微丝骨架结合蛋白(microfilament cytoskeleton-binding proteins,MCBPs)的差异表达情况。方法从健康人外周血中分离单核细胞(monocytes,MOs),经重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,rhGM-CSF)、重组人白介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)诱导培养6天获得imDCs;将imDCs与低分子量(40 kDa)和高分子量(150 kDa)的右旋糖酐分别孵育1、3和6 h,流式细胞仪检测imDCs吞噬右旋糖酐的比率及免疫表型分子的表达;免疫荧光检测丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)及PFN1、WASP、α-actinin在细胞中的定位情况;qPCR和Western blotting分别检测MCBPs在mRNA和蛋白水平的表达差异;最后,基于系统生物学算法中的逐步回归和主成分分析方法筛选成分系数最大的MCBPs。结果在吞噬抗原的过程中,imDCs对低分子量抗原的吞噬速度更快,吞噬时长可维持约3 h,其细胞表型和细胞形态逐渐向mDCs分化,且F-actin发生明显的重塑,PFN1、CDM、WASP、CAPZB、Filamin A、α-actinin等MCBPs的表达下调,WAVE1、Arp2/3复合体、Fascin的表达上调;信号蛋白Rac1的mRNA表达上调,CDC42和RhoA的mRNA表达下调;免疫荧光结果显示,PFN1、WASP、α-actinin在imDCs吞噬抗原过程中发生转位;逐步回归和主成分分析结果显示PFN1的成分系数最大。结论PFN1可能是imDCs吞噬抗原过程中的关键MCBPs,这对于深入理解imDCs细胞骨架结构变化与免疫学功能之间的关系具有重要意义。
李道红罗代琴曾宪琳张帅徐朴吴翠芳王赟叶远浓胡祖权龙金华曾柱
关键词:未成熟树突状细胞微丝骨架系统生物学
微丝骨架调节因子SSH2和ROCK在精子形成及睾酮生物合成中的功能研究
许珂
基于细胞微丝骨架水平探讨蛇床子素对OSCC增殖、迁移和凋亡的影响及分子机制
魏德芳
肺腺癌A549细胞中TNIK通过Rho/ROCK/LIMK1调控微丝骨架形态被引量:1
2023年
目的探讨肺腺癌A549细胞中TNIK调节微丝骨架形态的分子机制及其联合靶向有丝分裂化疗药物处理对癌细胞增殖与凋亡的影响。方法利用RNA-seq筛选稳定敲减TNIK表达后A549细胞差异表达基因,并分析微丝骨架组装相关基因的表达情况;通过RT-PCR、免疫印迹和双重免疫荧光染色分析TNIK调控微丝-微管骨架系统组装的分子机制,并联用靶向有丝分裂化疗药物紫杉醇处理癌细胞后,检测癌细胞的生长及凋亡情况。结果RNA-seq结果显示,敲减TNIK表达后的差异表达基因与有丝分裂进程密切相关;进一步分析发现TNIK表达可在转录水平显著抑制Rho通路相关基因RhoA/B、ROCK1/2和LIMK1表达(P<0.01),但对Rac与CDC42通路相关基因表达无显著影响。免疫荧光检测发现,敲减TNIK表达导致微丝骨架系统形态紊乱及有丝分裂异常。与对照细胞相比,联合紫杉醇处理的TNIK敲减组细胞增殖下调(P<0.01),而凋亡率显著增加(P<0.01)。结论肺腺癌A549细胞中TNIK通过Rho/ROCK/LIMK1调控细胞微丝-微管骨架系统形态,敲减TNIK可增强化疗药物对癌细胞增殖的抑制作用。
孙雪花张莲张莲张春冬
关键词:肺腺癌细胞微丝骨架微管骨架
线粒体钙单向转运体相关钙超载调控钙调蛋白对雨蛙肽诱导胰腺导管上皮细胞微丝骨架的影响
2023年
目的 通过体外细胞研究探讨线粒体钙单向转运体(MCU)相关钙超载通过调控钙调蛋白(CaM)对雨蛙肽诱导的胰腺导管上皮细胞微丝骨架的影响。方法 使用10^(-7)mol/L雨蛙肽及10^(-5)mol/L MCU抑制剂钌红(RR)干预人胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)24 h,将细胞分为:Control组、雨蛙肽组、RR组、雨蛙肽+RR组。Western blot法检测细胞内MCU及CaM蛋白表达,荧光探针法检测细胞内游离Ca^(2+),免疫荧光双标法检测细胞内线粒体Ca^(2+),微丝染色法观察细胞微丝骨架结构。结果 雨蛙肽组与Control组比较,MCU及CaM蛋白表达、细胞质及线粒体内Ca^(2+)含量升高(P<0.05),细胞微丝骨架破坏;雨蛙肽+RR组与雨蛙肽组比较,MCU及CaM蛋白表达、胞质Ca^(2+)及线粒体内Ca^(2+)含量降低(P<0.05),细胞微丝骨架破坏减轻。结论 MCU相关钙超载可能通过激活CaM促进雨蛙肽诱导的胰腺导管上皮细胞微丝骨架的破坏。
雷宇罗尹翔吴润泽苏尚华吴家实苏明佳杨慧莹
关键词:钙调蛋白雨蛙肽胰腺导管上皮细胞微丝骨架
微丝骨架调控植物免疫机制的研究进展
2022年
植物病害是威胁农业生产的重要因素之一,会造成严重的粮食安全问题以及经济损失.植物对病原微生物的抵抗依赖于自身的先天免疫系统(plant innate immunity),主要包括分子模式触发免疫(pattern-triggered immunity,PTI)和效应因子触发免疫(effector-triggered immunity,ETI)两个层次.研究表明,微丝骨架在植物免疫中扮演重要角色,其通过自身动态重排来应对病原微生物的侵染,破坏宿主微丝会显著降低植物的抗病能力.本文重点介绍了植菌互作过程中的微丝骨架动态、参与调控植物免疫的微丝结合蛋白、调控微丝骨架的上游免疫信号以及微丝骨架动态在植物免疫中的生物学功能等的相关研究,并对微丝调控植物免疫的未来研究方向提出了展望.
王冰肖李杰婕
关键词:植物免疫微丝骨架
BRWD3对乳腺癌细胞微丝骨架和迁移的影响
BRWD3(Bromodomain and WD repeat domain containing 3)异常与多种肿瘤、精神类疾病发生相关,因分子功能研究不足,尚未建立该基因突变、蛋白表达水平变化与相关疾病之间的因果联系...
王妍
关键词:细胞形态细胞迁移
棉花绒毛蛋白GhVLN4通过微丝骨架调控植物抗逆性的研究
肌动蛋白细胞骨架(actin cytoskeleton)是由微丝与肌动蛋白结合蛋白(actin binding protein,ABP)形成的动态网络结构,参与植物细胞的形态建成、极性生长、气孔运动和信号传递等生物学过程...
石仲慧
关键词:微丝骨架植物抗逆性黄萎病
一种标记棉花细胞微丝骨架的转基因棉花标签株系的培育方法及其应用
本发明公开了一种标记棉花细胞微丝骨架的转基因棉花标签株系的培育方法及其应用。所述培育方法包括如下步骤:将融合蛋白的编码基因导入受体棉花中,得到所述转基因棉花;所述融合蛋白由拟南芥微丝结合蛋白Fimbrin‑1的第二个微丝...
孔照胜于艳军吴慎杰王光达田娟马银平
拟南芥NHX5和NHX6调节盐胁迫下花粉生长和微丝骨架动态变化的功能研究
微丝骨架的动态变化对于植物的许多生理功能至关重要,包括花粉萌发、响应盐胁迫、气孔保卫细胞运动等。微丝骨架的动态变化受微丝蛋白结合蛋白、钙信号、pH等多种因素影响。拟南芥NHX反向转运体是一价阳离子/质子反向转运蛋白家族中...
费馨冉
关键词:拟南芥微丝骨架盐胁迫

相关作者

任海云
作品数:24被引量:54H指数:4
供职机构:北京师范大学
研究主题:微丝骨架 肌动蛋白 植物肌动蛋白 植物 细胞骨架
刘珠琴
作品数:12被引量:36H指数:4
供职机构:南京农业大学园艺学院梨工程技术研究中心
研究主题:花粉管 微丝骨架 花粉 梨花粉 S-RNASE
张绍铃
作品数:732被引量:3,990H指数:33
供职机构:南京农业大学
研究主题:梨果实 自交不亲和性 花粉管 转录因子 果实
王学臣
作品数:177被引量:1,828H指数:25
供职机构:中国农业大学生物学院
研究主题:植物 气孔运动 拟南芥 蚕豆 保卫细胞
李莹辉
作品数:407被引量:834H指数:16
供职机构:中国航天员科研训练中心
研究主题:模拟失重 微重力 航天医学 细胞 成骨细胞