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检测慢病毒感染T细胞的生物学活性的方法: 本申请涉及生物技术领域，具体涉及检测慢病毒感染T细胞的生物学活性的方法。本申请提供一种检测慢病毒感染T细胞的生物学活性的方法，包括将T细胞激活，激活后的T细胞密度为1.0×10<SUP>6</SUP>～2.0×10<SU...; 高利娟栗红建张丹赵圆徐贤斌李朝晖方军尚娇娇

基于慢病毒感染技术敲低CTNNB 1基因的H1299细胞系构建: 2025年; 为构建β-连环蛋白编码基因CTNNB 1稳定敲低的肺癌H1299细胞模型,以深入探讨其在肺癌转移复发及耐药性中的作用机制。通过筛选功能性siRNA序列,构建pLKO.1-CTNNB 1-shRNA-EGFP-puro重组表达载体,基因测序证实shRNA序列正确插入载体,经293T细胞包装获得慢病毒颗粒。采用慢病毒感染H1299细胞后,通过嘌呤霉素筛选获得阳性细胞群体,结合有限稀释法成功分离单克隆细胞系。流式细胞术检测显示单克隆细胞EGFP阳性率达99%。RT-qPCR及Western blot分析表明,CTNNB 1在mRNA和蛋白表达水平分别下降至对照组的54%和60%。实验成功建立CTNNB 1基因稳定敲降的H1299细胞模型,该模型为后续研究β-catenin信号通路在肺癌恶性进展中的调控机制提供了可靠的细胞平台。; 沈齐金玉玲曹金金张玲芳汪洋胡翰刘滨磊; 关键词：H1299细胞慢病毒

MAFA-PDX1过表达慢病毒感染人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞的分化被引量：1: 2024年; 背景:干细胞来源胰岛β细胞移植被认为是治疗1型糖尿病的有效手段。人脐带间充质干细胞是理想的细胞来源,但其向胰岛β细胞分化的效率不高。目的:研究MAFA、PDX1修饰促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的潜能。方法:构建MAFA-PDX1过表达慢病毒载体,用细胞形态学、RT-qPCR法、双硫腙染色比较3种方案[方案A:单纯慢病毒组;方案B:先药物(尼克酰胺、β-巯基乙醇)诱导再加慢病毒组;方案C:慢病毒和药物诱导同时进行组]诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的效率和潜能。结果与结论:(1)细胞形态学改变:经3种方案诱导后细胞形态均发生了改变,方案B在诱导第11天细胞聚集生长最为明显,出现聚集生长的胰岛样细胞团;(2)RT-qPCR检测胰岛相关基因的表达差异:同一诱导时间点3种方案横向比较,在诱导第5天,方案C的MAFA和PDX1基因表达量最高,方案B的GCG基因表达量最高;在诱导第11天,方案B的MAFA、PDX1基因表达量以及INS和GLUT2基因表达量最高;(3)双硫腙染色鉴定锌离子:3种方案诱导第11天部分细胞被双硫腙染成棕红色,其中方案B中部分小岛状细胞被染成棕红色,颜色较深(阳性表达);(4)结果表明,MAFA和PDX1共过表达可促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化;MAFA-PDX1基因修饰联合药物诱导方案优于单纯基因修饰方案。; 邱晓燕李碧欣黎敬弟范垂钦马廉王鸿武; 关键词：脐带间充质干细胞 MAFA 胰岛素分泌细胞

一种基于肠道类器官的慢病毒感染方法: 本发明公开了一种基于肠道类器官的慢病毒感染方法，属于细胞生物学技术领域。利用肠道类器官能够在体外重现肠道多种细胞类型以及肠道的基本功能的特性，将其用于基因功能研究。本发明在解离过程中，将慢病毒感染到类器官内，相较于提取干...; 陈瑞李晓波王晶孟庆涛王佳佳张夏男吴申申

一种原代细胞专用慢病毒感染试剂盒及其使用方法与应用: 本发明公开一种原代细胞专用慢病毒感染试剂盒及其使用方法与应用，涉及慢病毒病毒感染原代细胞培养技术领域。本发明公开的原代细胞专用慢病毒感染试剂盒，包括A、B、C三种组分，所述A组分中含有95％DMEM/F12基础培养基和5...; 胡清云

一种提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基及方法: 本发明公开了一种提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基及方法，涉及MDA‑MB‑231细胞转染领域。增强感染培养基用于提高MDA‑MB‑231细胞慢病毒感染率，增强感染培养基的组分包括Leibovitz’sL‑15培养基、...; 黄秋凤莫晓花沈于钰

一种用于检测慢病毒感染滴度的组合物、检测试剂、检测试剂盒及ddPCR检测方法: 本发明涉及生物检测技术领域，特别是涉及一种用于检测慢病毒感染滴度的组合物、检测试剂、检测试剂盒及检测方法。本发明针对慢病毒WPRE元件和宿主细胞ALB内参基因，设计相应的引物探针组合，并在同一反应体系中使用双通道ddPC...; 杨林森刘翔李发院陈智陈琪

用于T细胞慢病毒感染的培养基及应用: 本发明提出了一种用于T细胞慢病毒感染的培养基。该培养基包括T细胞基础培养基以及人血清。发明人发现，所述培养基中添加人血清相比于添加胎牛血清，在提高慢病毒感染T细胞的效率方面，效果更加显著。根据本发明实施例的培养基用于慢病...; 张世都刘靖宋益哲郭蕾蕾叶群瑞董军纪于婷婷徐乐王旭昉李景秋欧镇生梁德灿陈小锋李文佳

一种提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基及方法: 本发明公开了一种提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基及方法，涉及MDA‑MB‑231细胞转染领域。增强感染培养基用于提高MDA‑MB‑231细胞慢病毒感染率，增强感染培养基的组分包括Leibovitz’sL‑15培养基、...; 黄秋凤莫晓花沈于钰

CD4+ T细胞系在慢病毒感染滴度检测中的用途及方法: 本发明涉及基因工程领域，特别是涉及CD4+T细胞系在慢病毒感染滴度检测中的用途及方法，所述CD4+T细胞系包括MT4细胞、C8166细胞或Jurkat细胞，所述Jurkat选自Jurkat‑E6细胞。本发明慢病毒感染滴度...; 吴昊泉高旭曹珊珊林辉暖吕朋陶建军

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