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眼斑芫菁在斑蝥素合成期的抑制性 消减杂交 文库构建及分析 2020年 斑蝥素是芫菁科昆虫合成的一种倍半萜类物质,对于治疗肿瘤和其他疾病有特别的疗效.通过构建抑制性 消减杂交 文库(SSH),筛选眼斑芫菁在斑蝥素合成期的差异表达基因.用斑点杂交 对消减 文库中的1 500个克隆进行筛查,130条特异表达序列标签(ESTs)进行分析. 34条(26%)ESTs与NCBI中标注的假设基因有很高的同源性 ;45条(35%)ESTs与NR数据库中的序列没有同源性 ,可能代表新的基因;51条(39%)ESTs与已知基因的序列同源性 很高,这些基因参与了生物调控、应激反应和解毒、信号转导、代谢与合成.最后通过实时定量逆转录PCR对文库中的9个上调表达基因进行验证.对眼斑芫菁在斑蝥素合成期的表达进行研究,为最终阐明斑蝥素的生物合成提供帮助. 王宇 张利萍 殷幼平关键词:斑蝥素 抑制性消减杂交 QRT-PCR 抑制性 消减杂交 技术(SSH)在动物免疫相关基因方面的研究进展抑制性 消减杂交 技术(SSH)以抑制 PCR方法为基础结合消减杂交 ,是新兴的一种用于高效分离差异基因的手段,因其具有敏感度高、假阳性 率低、操作简便等优点,广泛应用于动物免疫领域。本文综述了SSH技术原理、应用概况,SSH技术... 谷笑笑 张娇 王振华 潘康成关键词:免疫相关基因 文献传递 抑制性 消减杂交 技术(SSH)在动物免疫相关基因方面的研究进展被引量:1 2018年 对于一个生物个体来讲,尽管所有细胞的基因组成是相同的,但在不同的细胞、同一细胞不同的分化阶段或受到外界的不同刺激时,相关基因的表达及蛋白质的功能都会有所差异([1])。基因的差异表达是调控生物生命活动的核心机制,个体的生长发育和衰老死亡,以及对各种环境因子的应答,本质上都离不开差异基因的表达。为了阐明各种生命过程的分子机制,必须对差异表达基因进行分离、克隆并进一步研究,抑制性 消减杂交 (Suppression subtractive hybridization,SSH)应运而生, 谷笑笑 张娇 王振华 潘康成关键词:动物免疫 免疫相关 抑制性消减杂交技术 SSH 相关基因 黄河鲤卵巢发育抑制性 消减杂交 文库的构建和相关基因的结构及功能分析 生物在其生命周期中,基因按时间和空间的顺序有序地进行表达,从而也决定了生命活动的多样性 和复杂性 。在鱼类性 腺发育过程中,基因的时空表达方式也受到严格而精确的调控,不同的发育阶段,其表达基因各不相同。通过比较卵巢不同发育时期... 张弯弯关键词:黄河鲤鱼 卵巢发育 消减杂交 基因表达 滞育七星瓢虫抑制性 消减杂交 文库的构建及分析 被引量:1 2016年 七星瓢虫是优良的天敌昆虫,可凭滞育特性 抵御逆境胁迫,提高种群生存能力。为研究七星瓢虫的滞育分子机制,构建抑制性 消减杂交 文库,经反向Northern斑点杂交 技术进一步筛选,得到231个差异点。blastx/n比对后,正、反向文库分别得到差异表达基因64和54个,GO分类和PATHWAY分析表明,差异表达基因参与的生物过程涉及滞育的信号传导、生物合成、初级代谢和次级代谢等。文库中发现多种基因,为进一步筛选、克隆、分析滞育相关基因提供线索。着重讨论了与抗寒性 相关的28 k D抗干燥应激蛋白、卵巢发育相关的Cullin 3蛋白,能量代谢相关的异柠檬酸脱氢酶的生物学功能,进而推测其与七星瓢虫滞育的相关性 。 蒋莎 黄凤霞 齐晓阳 任小云 陈红印 黄建 张礼生关键词:七星瓢虫 抑制性消减杂交 差异表达基因 滞育 抑制性 消减杂交 法筛选炭样小单孢菌JXNU-1中抗生素合成相关基因被引量:2 2016年 为了筛选炭样小单孢菌JXNU-1中抗生素合成相关基因,本研究以培养36 h(抗生素分泌前)的炭样小单孢菌JXNU-1菌体所合成c DNA为Driver,以培养108 h(抗生素分泌后)的菌体所合成的c DNA为Tester,构建炭样小单孢菌JXNU-1分泌抗生素前后的差异c DNA消减 文库,筛选差异表达基因,荧光定量PCR验证其表达量,生物信息学方法分析其功能。研究结果表明,经抑制性 消减杂交 筛选得到5个与抗生素合成相关的差异表达基因;比照炭样小单孢菌JXNU-1全基因组序列,将所获5个基因定位到4个生物合成基因簇中,最后确定了炭样小单孢菌JXNU-1中抗生素生物合成相关的基因簇。本研究为阐明炭样小单孢菌JXNU-1中抗生素的生物合成机制提供了实验依据。 江云 黄运红 李非 龙中儿关键词:抑制性消减杂交 三唑磷作用下翡翠贻贝抑制性 消减杂交 文库构建与分析 被引量:2 2016年 采用抑制性 差减杂交 技术,构建了三唑磷农药急性 胁迫下翡翠贻贝雌贝性 腺正反向消减杂交 c DNA文库.正反向文库共有117个表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)与NCBI数据库中已知功能蛋白具较高同源性 ,假定蛋白12种,另有195个ESTs未检索到同源序列.正向文库中含有细胞周期蛋白、性 激素合成蛋白、DNA修复蛋白、能量代谢相关蛋白等一系列与生殖、应激适应和代谢相关的转录本信息,而反向文库中的差异ESTs主要涉及DNA复制、转录和翻译调控基因以及骨架蛋白.结果表明三唑磷对翡翠贻贝的毒性 涉及到生殖调控、能量代谢、应激适应、转录翻译调控等生理代谢的多个方面,正向文库中发现的几种生殖调控基因(细胞周期蛋白、周期蛋白依赖性 蛋白激酶、合子DNA复制许可因子、精子特异性 蛋白、雌激素硫酸转移酶和卵黄膜卵透明带域蛋白)可能是三唑磷生殖干扰毒性 作用过程中的关键基因,这为有机磷农药的生殖毒性 探索提供了基础数据. 孙伟 张林宝 胡莹 蔡文贵 贾晓平关键词:翡翠贻贝 性腺 三唑磷 表达序列标签 滞育七星瓢虫抑制性 消减杂交 文库的构建与分析 七星瓢虫是优良的天敌昆虫,本研究首次利用抑制性 消减杂交 技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建滞育七星瓢虫的抑制性 消减杂交 文库,发现一批滞育差异表达基因,探讨了滞育相... 蒋莎关键词:七星瓢虫 消减杂交 差异表达基因 四种病原菌诱导家蝇幼虫后构建的抑制性 消减杂交 文库中差异表达基因的分析 对分别以猪致病性 大肠杆菌、猪肺炎支原体、鸡白痢沙门氏菌及牛多杀性 巴氏杆菌诱导家蝇幼虫后构建的四个抑制性 消减 文库中筛选到的差异表达基因进行分析。结果显示,不同病原菌诱导家蝇幼虫后筛选到了大量与家蝇免疫防御、信号传导、及物质... 唐艳 裴志花 王莹 张惠 左红梅 王东方 马红霞关键词:家蝇幼虫 抑制性消减文库 差异表达基因 文献传递 抑制性 消减杂交 技术在昆虫滞育中的利用和展望2014年 滞育是多数天敌昆虫固有的遗传属性 ,掌握天敌昆虫滞育诱导、维持和解除技术,能及时将扩繁的天敌昆虫以滞育状态进行储存,在释放前再打破滞育使其进入活跃状态以防控害虫。开展天敌昆虫滞育研究,还有助于掌握其发育特点与发生动态,提高害虫防治效率,加深对天敌昆虫发育机制的认识,探寻昆虫对环境适应机制及进化途径。因此,滞育调控及机理研究成为近年来昆虫学研究的一个重要领域。抑制性 消减杂交 技术(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)是近年来发明的用于挖掘差异性 调控或特异表达c DNA探针和构建文库的一种方法。本文在总结抑制性 消减杂交 技术的测试原理及其优越性 的基础上,归纳了该技术在昆虫滞育研究中的应用,概述了通过构建抑制性 消减 文库,在鞘翅目、直翅目、鳞翅目、双翅目等昆虫中探明的滞育差异表达基因,进一步探讨了差异表达基因与滞育的关系。随着昆虫全基因组测序和转录组测序的信息增加,抑制性 消减杂交 技术将更广泛的应用于昆虫学各个领域的差异基因的筛选与挖掘,促进昆虫分子生物学科学体系的发展。 蒋莎 张礼生 黄建 陈红印 黄凤霞 齐晓阳 任小云关键词:差异表达基因 昆虫 滞育
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成军 作品数:1,429 被引量:5,859 H指数:36 供职机构:中国人民解放军 研究主题:丙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒 反式激活基因 肝炎病毒 克隆 刘妍 作品数:609 被引量:1,585 H指数:29 供职机构:吉林大学 研究主题:乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 反式激活 反式激活基因 克隆 纪冬 作品数:225 被引量:888 H指数:14 供职机构:中国人民解放军总医院 研究主题:丙型肝炎病毒 反式激活基因 乙型肝炎病毒 抑制性消减杂交技术 反式激活 郭江 作品数:122 被引量:204 H指数:7 供职机构:首都医科大学附属北京地坛医院 研究主题:乙型肝炎病毒 抑制性消减杂交技术 反式激活基因 反式调节基因 反式激活 张黎颖 作品数:112 被引量:186 H指数:7 供职机构:北京地坛医院 研究主题:抑制性消减杂交技术 反式激活基因 反式调节基因 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒