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免疫斑点印迹法检测水解乳蛋白婴幼儿配方粉免疫反应
2024年
目的:建立一种快速且精准的方法,以确定水解乳蛋白婴幼儿配方粉的免疫反应性。方法:首先采用直接免疫斑点印迹法,利用牛奶过敏患儿血清初步评估待测样品的免疫反应性;然后通过间接竞争免疫斑点印迹法以市售普通牛奶粉为阳性对照,评估水解乳蛋白婴幼儿配方粉与血清免疫球蛋白E(IgE)的结合能力;最后采用间接和间接竞争酶联免疫检测法,以佐证免疫斑点印迹结果。结果:部分水解乳蛋白婴配粉仍可以结合IgE以诱发过敏反应,而深度水解乳蛋白婴配粉不具有免疫反应性。免疫斑点印迹和酶联免疫检测评价免疫反应性结果显著且一致。结论:免疫斑点印迹技术操作性强,周期短,成本低,结果可靠,为利用较难获取的婴幼儿过敏患儿血清初步评估乳蛋白产品致敏性提供了新思路。
孙丽娟韩诗雯曾冰蕙段素芳屠振华李放车会莲
关键词：牛奶过敏酶联免疫吸附
定量斑点印迹分析技术在高通量样品蛋白表达水平检测中的应用被引量：2
2020年
目的检测定量斑点印迹(QDB analysis)技术在高通量组织样品和细胞样品蛋白表达水平定量检测中的应用情况。方法采用QDB analysis技术检测87只小鼠的前列腺组织中tubulin的相对表达水平,以及8种人细胞系中tubulin的绝对表达水平(即蛋白真正表达水平)。结果通过QDB analysis技术发现小鼠前列腺组织中tubulin蛋白的表达水平根据小鼠周龄不同而有所不同;8种人细胞系中tubulin蛋白的绝对表达水平在90~140 fmol/μg之间。结论QDB技术可适用于高通量组织样品和细胞样品中蛋白表达水平的相对定量和绝对定量检测。
刘琳门婷婷张文凤张建棣米佳杨春华
关键词：蛋白质表达TUBULIN
酶联免疫斑点印迹的自身免疫检测试剂盒及其操作流程
本发明公开了一种酶联免疫斑点印迹的自身免疫检测试剂盒及其操作流程，酶联免疫斑点印迹的自身免疫检测试剂盒包括盒体、靶标分子及试剂，所述试剂盒是一种基于酶联免疫斑点印迹与富集相结合的技术，用于检测自身免疫功能的缺陷导致的血糖...
邹永龙马欣
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检测人血小板GSK-3β蛋白活性的斑点印迹方法
本发明提供了检测人血小板GSK-3β蛋白活性的斑点印迹方法。该斑点印迹方法是将血小板蛋白质配置成统一浓度，样品点于NC膜上，晾干，5％脱脂奶粉封闭，然后分别加入1:1000GSK-3β和Ser9-GSK-3β的一抗，洗脱...
王建枝徐志鹏
文献传递
α-乳白蛋白单克隆抗体的制备及斑点印迹定性检测方法的建立被引量：2
2014年
以α-乳白蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗α-乳白蛋白单克隆抗体;采用碳二亚胺法,并通过工艺优化,将单抗与量子点高效偶联;在此基础上,建立了基于斑点印迹技术定性检测乳制品中过敏原α-乳白蛋白的方法。结果表明:采用杂交瘤技术制备的单克隆抗体特异性好,与牛奶中其他蛋白无交叉反应;当量子点、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基丁二酰亚胺(NHS)、单抗摩尔比为1∶10∶6∶4时,量子点与单抗有较好的偶联效果;以量子点标记单抗建立的斑点印迹方法可直观、快速的定性分析乳制品中过敏原α-乳白蛋白。因此,该方法具有一定的实用价值。
龙彩云郑义成程芬芬杨安树陈红兵
关键词：Α-乳白蛋白单克隆抗体量子点斑点印迹
口蹄疫病毒多种非结构蛋白抗体斑点印迹检测试剂盒及方法
本发明公开了口蹄疫病毒多种非结构蛋白抗体斑点印迹检测试剂盒及方法，包括五种NSP印迹膜条、血清稀释液、25×浓缩PBST洗涤液、膜显色底物溶液、100×浓缩酶标检测抗体、阳性对照血清和阴性对照血清以及20孔血清稀释板；同...
卢曾军刘在新付元芳曹轶梅孙普包慧芳李平花白兴文陈应理李冬谢宝霞刘湘涛
文献传递
Western斑点印迹法检测致病性副溶血弧菌被引量：1
2010年
目的:对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的直接耐热溶血毒素(thermostable direct hemolysin,TDH)进行分离纯化,建立Western斑点印迹法技术检测致病性副溶血弧菌的方法。方法:用直接耐热溶血毒素免疫小鼠得到特异性抗血清,利用棋盘方法确定免疫血清最佳工作浓度,并对致病性与非致病性副溶血弧菌分别进行特异性测定。结果:最佳免疫血清最佳工作浓度为1:3200;检测致病性副溶血弧菌为阳性,非致病性副溶血弧菌属呈阴性。结论:Western斑点印迹法技术可以特异性检测致病性副溶血弧菌,灵敏度高、操作简单,可用肉眼判定结果。
杨靖亚张建赵勇陶妍陆小凡晁若瑜
斑点印迹法检测抗-Jo-1抗体的临床研究
2010年
目的建立简便可靠的检测抗-Jo-1抗体的方法。方法用丙酮沉淀兔胸腺中的总蛋白制成兔胸腺丙酮粉,从兔胸腺丙酮粉中提取可提取性核抗原(ENA),ENA经亲和色谱纯化出Jo-1抗原,将纯化的Jo-1抗原制备成斑点印迹(DB)试剂盒,用该试剂盒检测多种风湿免疫性疾病和正常血清中的抗-Jo-1抗体,探讨各种血清中抗-Jo-1抗体的阳性率。结果 DB试剂盒共检测92份血清中的抗-Jo-1抗体。各种风湿性疾病血清69份,其中多发性肌炎(DM)20份,阳性6份(30%);其他风湿性疾病49份,无阳性。健康对照23份,无阳性。该试剂盒对诊断DM的敏感度为30%,特异度为100%。结论 DB试剂盒检测抗-Jo-1抗体方法简便,结果可靠,具有较大的临床开发应用价值。
朱材忠韩坤元林道勇王好问
关键词：多发性肌炎风湿性疾病
通过在半导体微芯片上进行电斑点印迹检测法分辩单核苷酸多态性
本发明公开了一种利用硅微芯片上的电路快速检测单核苷酸多态性的方法。该方法能在将DNA电协助转运、浓缩和结合到所选电极(测试位点)后，准确地辨别扩增好的DNA样品。所述测试位点构成规则的样品阵列，后者可利用包含野生型序列和...
帕特里克·N·吉勒斯帕特里克·J·狄龙戴维·J·吴查尔斯·B·福斯特斯蒂芬·J·差诺克
文献传递
RNA斑点印迹法检测人食管癌DNA聚合酶β的基因表达被引量：3
2003年
目的 :探讨人食管癌组织DNA聚合酶 β(polβ)RNA水平的表达。 方法 :提取 5 1例食管癌患者的手术标本组织 ,包括 :17例癌灶组织 ,17例癌旁组织 ,17例“正常”组织细胞总RNA ,以生物素标记的polβcDNA探针进行RNA斑点印迹。结果 :DNApolβRNA水平的表达癌组织高于癌旁组织 (P <0 .0 5 ) ,癌旁组织高于“正常”组织 (P <0 .0 5 ) ,癌组织高于“正常”组织 (P <0 .0 1)。结论 :人食管癌组织及癌旁组织的DNApolβ基因RNA水平表达显著高于“正常”组织 ,提示DNApolβ的过表达可能在食管癌的发生、发展中起 作用。
金戈张婷赵勤赵继敏吴景兰董子明
关键词：食管癌DNA聚合酶Β基因表达肿瘤发生
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陈奎生
作品数：438被引量：1,197H指数：14
供职机构：郑州大学第一附属医院
研究主题：食管肿瘤 食管鳞癌 食管鳞癌组织 免疫组织化学 鳞状细胞癌
吴景兰
作品数：168被引量：603H指数：12
供职机构：郑州大学基础医学院分子细胞生物学研究中心
研究主题：8-BR-CAMP 槲皮素 ECA-109细胞 DNA聚合酶Β 细胞凋亡
王厚伟
作品数：93被引量：222H指数：8
供职机构：山东中医药大学
研究主题：中药药性 中药 牛黄 多克隆抗体 胰蛋白酶抑制剂
王一菱
作品数：56被引量：222H指数：7
供职机构：郑州大学基础医学院
研究主题：8-BR-CAMP ECA-109细胞 免疫组织化学 血淋巴细胞 睡眠剥夺
郑乃刚
作品数：54被引量：258H指数：9
供职机构：郑州大学基础医学院
研究主题：DNA聚合酶Β 槲皮素 8-BR-CAMP 人食管癌 食管癌