搜索到1241篇“ 斑点杂交“的相关文章
核酸斑点杂交技术快速鉴定转基因大豆品系
2024年
为了建立转基因大豆品系高通量检测方法,本研究以转基因大豆DAS-68416-4、DAS-44406-6、DAS-81419、DP305423作为试验对象,根据品系特异的宿主与插入片断间连接区域的基因序列作为检测靶标,设计特异性引物。以转基因标准品为材料,提取DNA作为模板进行定性PCR扩增,尼龙膜点样,生物素探针制备,杂交与显色,并对探针浓度、杂交温度与时间与显色时长进行优化,利用优化后的反应条件对转基因大豆DAS-68416-4、DAS-44406-6、DAS-81419、DP305423及空白对照样品进行检测,验证体系的特异性。将4种转基因大豆的DNA进行10倍系列稀释,利用优化后的反应条件测定灵敏度。对实验室收集的7个品系的转基因大豆标准品和8个能力验证样品进行适用性检测分析,并采用双盲验证法对17份盲样进行核酸斑点杂交测试分析,进一步验证体系的可靠性。结果表明,以转基因大豆DAS-68416-4、DAS-44406-6、DAS-81419、DP305423为模版的扩增产物均有且只有一条清晰明亮的条带,大小均与理论相符,空白对照与内参照基因结果正常。4种转基因大豆特异性探针除对应样品有显色反应,对其他3种样品均未显色,具有方法特异性。样品DAS-68416-4、DAS-81419、DP305423最低检出限为20 pg·μL^(-1),样品DAS-44406-6最低检出限为2 pg·μL^(-1),具有较高的灵敏度。对7个标准品、8个能力验证样品和17份盲样的测试结果与SN/T 1204-2016《植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检测方法》中的结果一致,可用于日常样品检测。本研究建立的定性PCR结合的核酸斑点杂交方法能对4种转基因大豆进行快速准确鉴定,对有序推进生物育种产业化应用,严查非法转基因种子市场流通和田间种植,保障粮食安全具有重要意义。
王凤军金浩然陈丽敏葛越徐易郑如福林洁洁陈显显
关键词:转基因核酸斑点杂交
斑点杂交反应装置及其应用和免疫印迹检测方法
本发明提供了一种斑点杂交反应装置及其应用和免疫印迹检测方法,涉及分子杂交实验装置技术领域。该斑点杂交反应装置包括加样渗滤模块和用于给加样渗滤模块内部提供负压环境的抽滤模块;其中加样渗滤模块包括设置有样品通孔的微孔加样板,...
贺笋王遵宝徐龙飞潘晓梅李俊辉李延涛候玉珍田晓艳
利用核酸斑点杂交技术快速鉴定转基因大豆品系及其转化体成分的方法
本发明涉及遗传工程领域,本发明公开了利用核酸斑点杂交方法对转基因大豆品系及其转化体成分进行快速鉴定所用的引物:包括大豆内源基因Lectin的扩增引物、转基因大豆品系DAS‑68416‑4的扩增引物、转基因大豆品系DAS‑...
王凤军葛越郑如福林洁洁陈显显唐琳汤雅棉
基于微流控芯片-多重PCR-反向斑点杂交技术快速检测肠道致病菌方法的建立及评价
背景:感染性腹泻是一个全球性的公共卫生问题,每年导致数十亿人患病,数百万人死亡。引起感染性腹泻的肠道致病菌主要有沙门氏菌、志贺氏菌等,它们通过污染的食物和水源或直接接触传播,引发腹泻、脱水和营养不良等症状。当前,肠道致病...
胡心益
关键词:肠道致病菌感染性腹泻反向斑点杂交微流控芯片
PCR-反向斑点杂交结合微流控芯片技术快速检测13种血流感染真菌的方法学建立及评价
目的:近年来,由于免疫受损患者的增多,导致条件致病真菌引起的感染正在逐年增加,而真菌引起的住院患者死亡率高。中国医院侵袭性真菌监测网(CHIF-NET)统计临床真菌分离株时,在排除痰液、粪便等真菌定植标本外,分离来源最多...
林春晖
关键词:血流感染真菌微流控反向斑点杂交
探讨三家国产试剂盒(qRT-PCR试剂盒、流式荧光法与反向斑点杂交法检验)在HPV分型检测中的差异性
2024年
分析对比三家国产试剂盒HPV分型检测结果的差异性。方法 我院从2021年3月-2022年4月中,选择80例样本,随机分为三组,分别行qRT-PCR 试剂盒、流式荧光法与反向斑点杂交法检验,对比检测结果。结果 在检测结果上,qRT-PCR 试剂盒、流式荧光法之间,有差异性(P<0.05),但与反向斑点杂交法,不存在显著差异(P>0.05),三组的检测结果都在90%以上,且在15 种高危型 HPV检测上,三组检测方式都比较高。结论 在HPV分型的检测中,通过对其结果的具体性分析,发现qRT-PCR 法与反向斑点杂交法,结果 上,存在一致性,反向斑点杂交法和HPV DNA检测序,在符合率上有非常高的差异性,可以通过对不同试剂盒检测结果的分析,选择分型检测方法。
刘彬彬
关键词:HPV分型检测
基于聚合酶链反应和反向斑点杂交技术及第三代基因测序技术对德阳地区地中海贫血基因筛查情况及结果分析
目的:通过描述性分析第三代基因测序技术与常规技术(聚合酶链反应和反向斑点杂交技术)对地中海贫血基因检测的结果,了解四川德阳地区地中海贫血的基因检出及分布情况,了解罕见基因型血液学表型,丰富本地区地中海贫血基因突变谱,为临...
陈彦君
关键词:地中海贫血
BALF Xpert MTB/RIF和PCR-反向斑点杂交技术在涂阴肺结核诊断中的价值
2024年
目的:对比支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)结核分枝杆菌(MTB)/利福平(RIF)耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)和聚合酶链反应(PCR)-反向斑点杂交技术在涂阴肺结核诊断中的价值。方法:纳入2021年6月—2023年1月于江西省胸科医院接受治疗的肺结核患者共200例,所有患者均留取BALF送检,进行Xpert MTB/RIF、PCR-反向斑点杂交技术检测。以病理检查结果为金标准,统计确诊涂阴肺结核的占比情况,并计算Xpert MTB/RIF与PCR-反向斑点杂交技术两种检测方法的阳性率、与金标准结果的一致性,并评估两种检测方法对涂阴肺结核的诊断价值。结果:Xpert MTB/RIF检测涂阴肺结核的阳性率(76.50%)与PCR-反向斑点杂交技术(69.50%)比较,差异无统计学意义(χ^(2)=2.486,P=0.115)。200例肺结核患者中确诊为涂阴肺结核有137例,占比68.50%;Xpert MTB/RIF的符合率(94.89%)高于PCR-反向斑点杂交技术(74.45%),差异有统计学意义(P<0.05)。Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均高于PCR-反向斑点杂交技术(P<0.05)。结论:Xpert MTB/RIF、PCR-反向斑点杂交技术均可用于涂阴肺结核诊断中,其中Xpert MTB/RIF的诊断价值更高,可辅助临床早期诊断筛查。
李邱宏李赞华陈艳玲吴于青陈思雨
关键词:涂阴肺结核
斑点杂交实验点样定位装置
本实用新型提供一种斑点杂交实验点样定位装置,属于斑点杂交实验辅助用具设计领域,包括点样定位垫板,其上构造有多个点样枪头定位孔;点样膜,可拆卸地连接于点样定位垫板的第一侧面,且第一侧面与点样枪头定位孔靠近第一侧面的孔口之间...
吴瑜麒朱蕾刘浩高钰赵钊
凤果花叶病毒的RT-PCR和核酸斑点杂交检测研究被引量:1
2023年
0引言凤果花叶病毒(pepino mosaic virus,PepMV)属于线形病毒科(Flexiviridae)马铃薯X病毒属(Potexvirus),于1974年首次在秘鲁凤果植物内(Solanum muricatum)发现,后来于1999在荷兰发现该病毒还可侵染番茄[1-2]。被PepMV感染后,番茄生长迟缓,顶部叶片会表现皱缩、畸形和暗绿色不规则斑,下部叶片出现褐色坏死斑,有些叶片上出现亮黄色斑块及疱状突起;在一些大红果色番茄品种上,果实常会出现“大理石状”花纹病斑[3]。
李倩张建坤曾宪东王琴王振华徐文兴
关键词:花叶病毒马铃薯X病毒番茄生长核酸斑点杂交

相关作者

崔治中
作品数:606被引量:2,570H指数:34
供职机构:山东农业大学
研究主题:马立克氏病病毒 禽白血病病毒 禽白血病 REV 鸡群
赵鹏
作品数:151被引量:423H指数:11
供职机构:山东农业大学
研究主题:禽白血病病毒 禽白血病 ALV 弱毒疫苗 SPF鸡
夏云
作品数:126被引量:502H指数:11
供职机构:重庆医科大学附属第一医院
研究主题:耐药 耐药性 药敏试验 利奈唑胺 反义寡核苷酸
樊慧珍
作品数:80被引量:338H指数:10
供职机构:南方医科大学珠江医院
研究主题:DNA探针 哮喘小鼠 纤维支气管镜 慢性阻塞性肺疾病 脂多糖
于化鹏
作品数:164被引量:812H指数:13
供职机构:南方医科大学珠江医院
研究主题:哮喘 哮喘小鼠 慢性阻塞性肺疾病 DNA探针 急性肺损伤