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重组带状疱疹gE抗原等电点(毛细管 电泳 法 )检测方法 的建立及初步应用 2025年 毛细管 等电聚焦电泳 (capillary isoelectric focusing, cIEF)检测方法 。方法 :通过优化重组带状疱疹gE抗原等电点检测过程中的两性电解质比例、蛋白质浓度、稳定剂比例参数,建立重组带状疱疹gE抗原的等电点检测方法 (cIEF法 )。在此基础上,对重组带状疱疹gE抗原进行脱糖酶处理后,采用cIEF法 检测等电点。结果:优化后的检测条件为2 M尿素、0.35%甲基纤维素(methylcellulose, MC)、4%两性电解质、1%等电点标记物混合溶液作为样品缓冲液,聚焦条件为1500 V 1 min,3000 V 8 min。重组带状疱疹gE抗原经PNGase F酶脱糖后,采用该方法 分析等电点,可得到峰型清楚且分离度高的图谱。结论:本研究建立的cIEF方法 适用于重组带状疱疹gE抗原的pI检测及分析,可为重组带状疱疹gE抗原的表征以及相关疫苗研发和生产过程中的质量控制提供依据和参考。Objective: To establish a full column imaging capillary isoelectric focusing (cIEF) detection method for recombinant herpes zoster gE antigen isoelectric point (pI). Method: By optimizing the parameters such as reagent ratio, final sample concentration, and sample stabilizer in the process of detecting recombinant herpes zoster gE antigen, a cIEF method for determining recombinant herpes zoster gE antigen was established. Based on this, the recombinant herpes zoster gE antigen was subjected to enzymatic digestion before cIEF detection. Results: The optimized method uses a mixed solution of 2 M urea, 0.35% methylcellulose (MC), 4% zwitterionic electrolyte, and 1% isoelectric point marker as the sample buffer, with focusing conditions of 1500 V for 1 min and 3000 V for 8 min. After PNGase F enzyme deglycosylation, this method can be used to analyze the isoelectric point of recombinant herpes zoster gE antigen, and a clear peak pattern and high separation degree can be obtained. Conclusion: The established cIEF meth关键词：VZV 等电点 单抗药物还原毛细管 电泳 法 方法 学验证研究 被引量：2 2024年 毛细管 电泳 法 (reduced capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfate,rCE-SDS)用于单抗药物的纯度检测进行方法 学验证,为业界此类质量控制方法 的方法 学验证提供参考。方法 按照2020版《中华人民共和国药典》通则<3127>的方法 检测样品,对该方法 的专属性、线性、准确度、精密度、范围、定量限、耐用性进行验证。结果本方法 专属性较好;线性拟合结果良好(均R^(2)>0.99)。各分析用样品主峰的准确性结果满足98%~102%,总杂质和非糖基化重链(non-glycosylated heavy chain,NGHC)的准确性结果均满足70%~130%;重复性和中间精密度的RSD均≤15%;主峰的范围为≥92.4%,总杂质范围为0.36%~7.6%,NGHC的范围为0.12%~3.8%;总杂质和NGHC的定量限分别为0.36%和0.12%。结论本方法 验证各项指标均符合预设可接受标准,且该研究可以为此类方法 学验证的科学性和合理性设计提供参考。单抗药物非还原毛细管 电泳 法 方法 学验证研究 2024年 毛细管 电泳 法 (nrCE-SDS)进行方法 学验证,为业界相应质控方法 的方法 学验证提供参考。方法 按照2020版《中华人民共和国药典》三部通则3127单抗分子大小变异体测定法 检测。2名实验员分别进行3 d实验,每天采用相同的检测方法 分析受试样品,并进行全面的方法 学验证。结果 该方法 专属性良好,各分析用样品主峰的准确性为98%~102%,总片段和特定杂质的准确性为70%~130%;重复性和中间精密度的RSD≤15%;主峰≥89.9%,总片段范围为0.66%~10.10%,特定杂质的范围为0.36%~4.80%;本方法 的定量限为0.33%。结论 对方法 的准确性、精密度、线性、范围、定量限和专属性进行了全面的验证研究,为相应方法 学验证的科学性和合理性设计提供了参考。关键词：纯度 新型毛细管 电泳 法 分离香烟中小分子有机酸 2024年 毛细管 电泳 (CE)新体系完成了12种小分子有机酸的快速分离。与常规毛细管 电泳 法 相比,新体系大大提高了分离效果,皆达到了基线分离。通过透射电镜等表征手段证明了CD-AuNPs的成功合成并探究了其浓度对新CE新体系的影响。以草酸和柠檬酸为模型,完善了CE新体系的定量检测方法 并成功地鉴定了两种烟草制品中的11种小分子有机酸,其中草酸和柠檬酸的含量为8.12μg/g和21.51μg/g。关键词：毛细管电泳 烟草制品 毛细管 电泳 法 同时分离分析对苯二酚与对苯醌2024年 毛细管 电泳 法 同时分离分析对苯二酚和对苯醌。在15 mmol/L Na_(2)CO_(3)缓冲溶液(pH 10.5)和15 kV运行电压的电泳 条件下,可在10 min内完成对苯二酚与对苯醌的分析。对苯二酚和对苯醌质量浓度在40~250μg/mL内与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数(r^(2))≥0.9989,加样回收率为99.4%~103.2%,相对标准偏差为1.9%~3.0%。该方法 应用于实际样品分析,结果满意。关键词：对苯二酚 对苯醌 毛细管电泳 光敏剂 全柱成像等电聚焦毛细管 电泳 法 对双特异性Fc融合蛋白的电荷异质性分析 2024年 毛细管 电泳 (WCID-CIEF)分析双特异性Fc融合蛋白电荷异质性方法 。方法 通过非还原毛细管 电泳 法 观察酶处理前后峰型的变化,初步确认了该Fc融合蛋白电荷异质性唾液酸相关;结合唾液酸酶酶切和方法 优化手段,建立了此融合蛋白的WCID-CIEF分析平台;通过液相质谱法 (LC-MS)鉴定了唾液酸相关N-糖构型;通过液相荧光法 (LC-FLR)测定了唾液酸的含量。结果 经唾液酸酶酶切和方法 优化后,此方法 在2.5~7.5 mgmL-1浓度范围内线性良好,R2=0.998,回收率在96.3%~104.6%之间,准确性、专属性和耐用性均满足要求。结论 结合酶处理和方法 优化手段,WCID-CIEF可较好地分析融合蛋白的电荷异质性,提供了一种简单、有效的融合蛋白质控手段,并可应用于产品放行及稳定性监测。基于pH响应涂层柱的毛细管 电泳 法 在线富集和分离糖蛋白 2024年 法 制备了一种3-氨基苯硼酸(APBA)修饰的纳米金(AuNPs@APBA)涂层毛细管 柱,该毛细管 柱兼具抗非特异性吸附性和富集选择性,将其作为分离通道,建立了基于pH响应涂层柱的糖蛋白在线富集与分离方法 。首先,采用柠檬酸钠还原法 制备金纳米颗粒(AuNPs),再将APBA通过静电自组装修饰到AuNPs表面,制得AuNPs@APBA纳米材料;利用离子吸附作用将AuNPs@APBA吸附到毛细管 内壁上,制得AuNPs@APBA涂层毛细管 柱。在pH为8的条件下,糖蛋白能够与毛细管 内表面的硼酸基团结合形成硼酸酯,从而被吸附;当pH为3时,硼酸酯发生解离并释放出糖蛋白,基于上述原理,该方法 能够实现糖蛋白的选择性在线富集与分离。实验结果表明,与使用普通电泳 法 的裸柱相比,经AuNPs@APBA涂层毛细管 柱富集后,卵清蛋白(OVA)的峰面积增大了2646倍,而牛血清白蛋白(BSA)的峰面积仅增大了847倍;并且,将鸡蛋清样品稀释1×10^(6)倍后,仍可利用该方法 对糖蛋白进行检测。该方法 样品用量少,操作简单,分离效率高,可用于实际样品中痕量糖蛋白的在线富集与分离。关键词：毛细管电泳 离子吸附 糖蛋白 苯硼酸 高效毛细管 电泳 法 检测淡水鱼肉中阿莫西林和氨苄西林残留方法 的建立 被引量：2 2023年 毛细管 电泳 技术、可同时高效检测淡水鱼肉中阿莫西林和氨苄西林残留的高通量检测方法 ,选用鲢鱼作为淡水鱼的代表,以空白鱼肉为试材,使用二极管阵列检测器进行检测。结果表明:样品经乙腈提取、旋转蒸发仪浓缩、固相萃取柱萃取后,在pH 7.85的30 mmol/L硼砂溶液缓冲体系中,检测波长210 nm、检测电压20 kV、检测温度25℃的电泳 条件下,阿莫西林和氨苄西林在20 min内能够实现基线分离;在0.02~10.00μg/mL质量浓度范围内,阿莫西林和氨苄西林的峰面积与质量浓度之间呈线性相关,相关系数(R^(2))均大于0.990;阿莫西林在淡水鱼肉中的加标回收率为78.90%~85.72%,日内变异系数小于8.01%,氨苄西林在淡水鱼肉中的加标回收率为75.36%~86.34%,日内变异系数小于8.06%。关键词：高效毛细管电泳 阿莫西林 氨苄西林 非水毛细管 电泳 法 同时测定消毒剂、个人护理品及药膏中三氯生、三氯卡班和对氯间二甲苯酚 被引量：3 2023年 法 。鉴于此,该文以十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)为电渗流反转剂,建立了同时测定上述3种消毒有效成分的非水毛细管 电泳 -紫外检测新方法 ,并对分离缓冲体系及浓度、样品介质等条件进行了优化。结果表明,未涂层熔融石英毛细管 (20.0 cm×50.0μm,总长度30.2 cm)为分离毛细管 ,14 mmol/L硼砂、2 g/L聚乙二醇20000和0.5 mmol/L DTAB的甲醇溶液为分离缓冲溶液,样品介质为含5 g/L聚乙二醇20000的甲醇-乙腈(50∶50,v/v),在214 nm下进行检测,实现了3种消毒有效成分的同时分离。在1~100 mg/L范围内,3种消毒有效成分的校正峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.99。方法 的检出限(LOD,信噪比为3)为0.2 mg/L,定量限(LOQ,信噪比为10)为1.0 mg/L;加标回收率在94.5%~104.4%范围内,相对标准偏差均小于4.8%。利用研究建立的新方法 测定了消毒液、洗手液、婴儿爽身粉、抑菌乳膏共31件样品,并将结果与国家标准方法 GB/T 27947-2020和GB/T 34856-2017中的液相色谱法 结果相比较,无统计学显著性差异。与国标方法 相比,方法 极大地减少了有机溶剂消耗量。该法 前处理简单,结果准确,非常适合实验室的常规分析。关键词：非水毛细管电泳 三氯生 消毒产品 个人护理品 多重PCR-毛细管 电泳 法 的应用及HPV感染亚型分布特征分析 被引量：3 2023年 毛细管 电泳 片段分析法 的应用评估。方法 采用横断面调查研究,2022年5至8月期间纳入河北省人民医院434例女性(年龄范围17~74岁,就诊者260例、查体者174例)进行横断面调查,应用多重PCR-毛细管 电泳 片段分析法 进行HPV分型检测。以多重荧光定量PCR试剂盒作为参考,采用卡方检验分析多重PCR-毛细管 电泳 片段分析法 的诊断效果,Kappa值分析其一致性。结果总HPV感染率为45.85%(199/434),其中高危型HPV(HR-HPV)阳性率为35.48%(154/434)、低危型HPV(LR-HPV)3.92%(17/434)、HR-HPV和LR-HPV混合感染6.45%(28/434)、单一型别感染率27.88%(121/434)和多型别17.97%(78/434)。HPV52(9.68%,42/434)、HPV16(6.91%,30/434)、HPV58(6.91%,30/434)为常见HPV亚型。查体者阳性率为45.40%(79/174),接近于就诊者阳性率为54.76%(120/260),差异无统计学意义(χ^(2)=0.024,P>0.05)。17~30岁年龄组感染率最高为56.32%(46/84),各年龄组之间阳性率差异无统计学意义(χ^(2)=4.123,P>0.05)。以多重荧光定量PCR为参考,多重PCR-毛细管 电泳 片段分析法 的敏感度和特异度分别是92.96%和94.04%,Kappa值为0.870。结论HPV感染可能呈现年轻化,HR-HPV感染阳性率最高,以HPV52、16、58为主要感染亚型。多重PCR-毛细管 电泳 片段分析法 与多重荧光定量PCR相比的检测结果具有高度一致性,适合HPV DNA分型检测。关键词：人乳头状瘤病毒 宫颈疾病
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柴逸峰 作品数：416 被引量：1,932 H指数：20 供职机构：第二军医大学 研究主题：药物分析 化学成分 毛细管电泳法 手性拆分 高效液相色谱法 屈锋 作品数：272 被引量：759 H指数：15 供职机构：北京理工大学生命学院 研究主题：毛细管电泳 核酸适配体 蛋白质 毛细管区带电泳 相互作用 翟海云 作品数：104 被引量：387 H指数：12 供职机构：广东药科大学 研究主题：毛细管电泳 高频电导检测 非接触式电导检测 毛细管电泳法 非接触电导检测 阎峰 作品数：95 被引量：213 H指数：8 供职机构：沈阳化工大学 研究主题：手性选择剂 毛细管电泳法 手性药物 泮托拉唑 手性分离 郭兴杰 作品数：164 被引量：716 H指数：14 供职机构：沈阳药科大学药学院 研究主题：高效液相色谱法 对映体分离 对映体 高效液相色谱法测定 HPLC
