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基于Box-Behnken设计优化菊苣药渣粗多糖酶法提取工艺
2025年
为了实现新疆特色植物药菊苣的药渣中有效成分菊苣粗多糖的高效提取与合理利用,采用响应面法优化了菊苣药渣粗多糖提取工艺条件,对提取得到的菊苣粗多糖运用液相色谱示差折光检测法(HPLC-RID)鉴定果糖和葡萄糖的含量,最后考察其体外抗氧化活性。以菊苣根醇提后的药渣为原料,菊苣粗多糖得率为考察指标,提取温度、提取时间、料液比及酶量为主要影响因素,在单因素试验的基础上,采用响应面法对菊苣药渣粗多糖提取工艺进行优化,运用国标检测方法HPLC-RID鉴定菊苣粗多糖中果糖和葡萄糖两种单糖的含量,通过1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazylradical,DPPH)和2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑林-6-磺硫(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid),ABTS)对菊苣粗多糖的体外抗氧化活性进行考察。响应面试验法对菊苣药渣粗多糖进行优化的最优方案是提取时间2.0h,酶量2.0%,料液比1∶40(g·mL^(-1)),提取温度51℃,菊苣药渣使用该条件进行提取多糖的得率为(20.64±0.34)%,HPLC-RID法在乙腈∶水(75∶25,V∶V)为流动相,流速1.0mL·min^(-1),柱温35℃条件下能够实现高效分离鉴定,体外抗氧化试验表明菊苣粗多糖对DPPH自由基和ABTS自由基都有较好的清除作用。本研究获得了菊苣药渣粗多糖酶法的最佳提取工艺,并鉴定出菊苣粗多糖中果糖和葡萄糖两种单糖成分,且证明了菊苣药渣粗多糖具有良好的体外抗氧化活性。
董暖苏林洁秦冬梅
关键词:响应面抗氧化
一种菊苣根多糖提取物及其制备方法与提取物中菊苣根多糖含量的测定方法
本发明提供了一种菊苣根多糖提取物及其制备方法与提取物中菊苣根多糖含量的测定方法,属于多糖提取技术领域。本发明提供的菊苣根多糖提取物的制备方法,包括如下步骤:将体积分数为90%‑98%的乙醇溶液与菊苣根混合浸泡,收...
秦冬梅朱丽萍吕博
一种菊苣配方颗粒的质量检测方法、应用
本发明公开了一种菊苣配方颗粒的质量检测方法、应用。该质量检测方法包括下述(1)和/或(2):(1)采用薄层色谱法检测供试品溶液A;供试品溶液A为菊苣配方颗粒经甲醇和乙酸乙酯提取后的溶液;薄层色谱的展开剂为乙酸乙酯和甲...
尹海龙 穆丹丹 尹强 田芳 周琴 杜梦鸽 李晶晶 乌丽江 李超杰 宋菲
一种菊苣饮片、标准汤剂或配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法、应用、产品
本发明公开了一种菊苣饮片、标准汤剂或配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法、应用、产品。该构建方法包括:将供试品溶液经高效液相色谱法梯度洗脱分离;色谱条件如下:色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶,流动相A为乙腈;流动相B为...
尹强尹海龙穆丹丹田芳周琴李晶晶杜梦鸽乌丽江李超杰宋菲
一种利用响应面法提取菊苣药渣中多糖的方法及其抗氧化和降糖的应用
本发明涉及菊苣提取物的研究,具体涉及一种菊苣药渣中多糖的提取方法及其抗氧化和降糖的应用,本发明以菊苣醇提后的药渣为原料,酶法提取菊苣药渣中的多糖,多糖的最佳提取条件通过设置单因素实验和响应面优化来确定,并提供了抗...
秦冬梅董暖卢雪路羽豪赵佳琪朱浩婵李玉洁朱浩真
菊苣的保肝作用及其机制
2024年
菊苣(Cichorium glandulosum Boiss.et Huet)是菊科菊苣属植物。它是一种原产于欧洲和亚洲的植物。在中国,它主要分布在新疆维吾尔自治区,通常被维吾尔医学用于治疗肝脏疾病。从菊苣抗肝纤维化、抗肝损害、抗非酒精性脂肪肝(NAFLD)、抗高脂血症性脂肪肝四个方面综述了其肝保护作用,并对其机理进行了总结,以期为菊苣保肝作用的研究提供借鉴。
高月锋秦冬梅
关键词:毛菊苣肝纤维化脂肪肝肝损伤
菊苣乙酸乙酯萃取物对大鼠溃疡性结肠炎合并急性肝损伤防治作用研究被引量:1
2024年
目的研究菊苣根乙酸乙酯萃取物(CGEA)对大鼠急性肝损伤合并溃疡性结肠炎的保护作用。方法将SD大鼠36只随机分为正常组(Control)、模型组(Model)、柳氮磺吡啶肠溶片阳性对照组(Sulfasalazine,100 mg·kg^(-1))和CGEA高、低剂量组(150、100 mg·kg^(-1)),每组6只,除正常组外其余各组给予30%TNBS-40%乙醇溶液灌肠(60 mg·kg^(-1)),同时皮下注射含体积分数40%CCl4的橄榄油溶液2 mL·kg^(-1),一周2次,制备急性肝损伤模型合并溃疡性结肠炎模型,造模成功后将CGEA制备成水混悬液,按照CGEA高剂量组(150 mg·kg^(-1)),CGEA低剂量组(100 mg·kg^(-1))连续灌胃大鼠14 d,每日1次。14 d后,处死大鼠并取血清及肝脾组织,计算肝脾指数,检测大鼠血清相关指标;采用HE染色法观察肝、肠组织病理变化。结果与正常组比较,模型组大鼠肝脾指数明显上升(P<0.01);血清中AST、ALT、AKP、γ-GT和MDA水平显著升高(P<0.05或P<0.01),SOD水平显著降低(P<0.05);肝组织遭到破坏,炎性细胞浸润;结肠组织结构杂乱,出现炎症细胞浸润现象。与模型组比较,给药组肝脾指数显著降低(P<0.01);血清中AST、ALT、AKP、γ-GT和MDA指标水平显著降低(P<0.05或P<0.01);给药组肝肠组织破坏程度减轻,炎性细胞浸润减少。结论CGEA可以减轻大鼠溃疡性结肠炎合并急性肝损伤程度,对其起到保护作用。
朱丽萍秦冬梅苏林洁高月锋
关键词:毛菊苣乙酸乙酯萃取物溃疡性结肠炎急性肝损伤
基于网络药理学和实验验证探讨菊苣治疗肝纤维化作用机制被引量:1
2024年
目的采用网络药理学和实验验证的方法探究菊苣抗肝纤维化的作用机制。方法借助TCMSP、Pubchem、SwissTargetPrediction、Genecards等数据库构建“成分-靶点-通路”作用网,STRING数据库预测菊苣抗肝纤维化作用靶点,应用DAVID数据库进行KEGG和GO富集分析,AUTODOCK对活性成分和关键靶点进行分子对接。用PDGFBB诱导活化细胞,验证秦皮甲素、秦皮乙素、菊苣酸、咖啡酸、绿原酸和异绿原酸等6个化合物对HSC-T6细胞的增殖、凋亡以及对肝纤维化指标的影响,Western blotting检测各成分对HSC-T6细胞中Ras、ERK1、ERK2、C-fos、JNK蛋白表达。结果网络药理学筛选到成分与肝纤维化的共同靶点239个,PPI分析显示SRC、STAT3、HSP90AA1等靶点为关键靶点,KEGG分析结果显示菊苣影响的通路包括癌症通路、代谢通路等,GO分析预测菊苣主要影响信号转导等过程,分子对接结果显示与成分能够良好结合的靶点蛋白为MAPK1,与蛋白能够良好结合的成分为秦皮乙素、咖啡酸和绿原酸。6种化合物对PDGF-BB诱导HSC-T6细胞活化增殖的抑制作用均强于模型组,且均具有逆转肝纤维化指标的作用,其中秦皮乙素活性最强(P<0.01)。与模型组相比,6种化合物干预后HSC-T6细胞中的Ras、ERK1、ERK2、C-fos、JNK表达量均有所下降。结论菊苣中各成分均有不同的抗肝纤维化作用,其作用与抑制ERK/RAS通路激活的有关。
杨建华耿若愚臧薇李茜杜超胡君萍
关键词:毛菊苣肝纤维化网络药理学分子对接
基于靶向代谢组学技术研究菊苣对肥胖小鼠粪便胆汁酸谱的影响
2024年
目的探究菊苣乙醇提取物对高脂饮食诱导的肥胖小鼠粪便胆汁酸谱的影响。方法选取6周龄C57BL/6雄性小鼠24只随机分为正常组、模型组、给药组和二甲双胍组。正常组给予常规饮食,其余3组给予高脂饲料,同时给药组每日灌胃10 mL/kg菊苣乙醇提取物溶液,二甲双胍组每日灌胃10 mL/kg二甲双胍溶液。10周后收集小鼠肝检测肝甘油三酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C);收集小鼠粪便通过超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测粪便胆汁酸含量。结果与正常组相比,模型组小鼠体重(P<0.0001)、血清TG、TC、LDL-C水平(P<0.0001)和肝TG水平(P<0.05)显著升高,肝HDL-C水平显著降低(P<0.001),表现出增重和脂质代谢异常。菊苣乙醇提取物能显著降低小鼠体重(P<0.0001)、血清TG(P<0.05)、TC(P<0.01)、LDL-C(P<0.01)水平及肝TG(P<0.0001)、LDL-C(P<0.05)水平。方法学验证结果表明本研究建立的方法能准确定量粪便中的52种胆汁酸。分析各类胆汁酸浓度发现,菊苣乙醇提取物能显著增大次级胆汁酸/初级胆汁酸比例(P<0.05)。多元统计分析结果显示,各组的胆汁酸代谢模式发生明显改变。以第一主成分的变量投影重要度(variable importance in the projection,VIP)>1,P<0.05为条件筛选出给药组相对模型组的8种差异胆汁酸。通过检索京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)数据库,发现差异胆汁酸主要参与次级胆汁酸生物合成途径。相关分析表明,粪便中脱氧胆酸(rs=0.6445,P<0.001)、异石胆酸(rs=0.5879,P<0.01)、3β-脱氧胆酸(rs=0.6649,P<0.001)和ω-鼠胆酸(rs=0.5387,P<0.01)4种差异胆汁酸与体重具有较强的正相关。结论菊苣乙醇提取�
祁淑雯仲烨伟阿达来提·阿布都热西提张芮侯文慧张春子马晓燕马晓丽
关键词:毛菊苣肥胖胆汁酸代谢组学
菊苣正丁醇部位对CCl_(4)诱导大鼠慢性肝损伤的缓解作用及机制研究被引量:2
2024年
探究在四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导建立的大鼠慢性肝损伤模型中,菊苣正丁醇部位(Cichorium glandulosum n-butanol extraction site,CGE)对疾病的缓解作用及机制。通过皮下注射CCl_(4)橄榄油溶液构建慢性肝损伤模型,CGE治疗4周后,检测大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)、羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;并对肝组织进行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)和马松(Masson)染色观察大鼠肝脏组织结构;采用qPCR、Western blot检测大鼠肝组织和肝星状细胞-T6(hepatic stellate-T6,HSC-T6)中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/细胞信号传导分子(small mothers against decapentaplegic,Smad)、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和纤维连接蛋白(fibronectin,Fn)的表达,评价CGE对HSC活化的抑制作用。结果显示,CGE能够明显减少CCl_(4)诱发的慢性肝损伤大鼠血清AST、ALT、AKP、HYP水平,并影响相关炎症指标IL-4、IL-6、TNF-α和MDA水平,对SOD活性无影响,可延缓肝损伤进程,缓解肝脏胶原沉积及炎症浸润,对大鼠慢性肝损伤缓解作用显著。CGE可以抑制肝脏组织中α-SMA、TLR4蛋白的表达,体外逆转HSC-T6中增加的TGF-β1/Smad、Fn和TLR4相关表达。上述结果表明,CGE可通过抑制HSC活化发挥对大鼠肝保护作用,缓解CCl_(4)诱导的大鼠慢性肝损伤,同时改善大鼠肝组织炎症反应及轻微肝纤维化,其药效机制可能与TGF-β1/Smad和TLR4相关表达有关。
潘培妍苏林洁秦冬梅
关键词:毛菊苣慢性肝损伤SMAD

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