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搜索到282篇“ 淋巴细胞激活“的相关文章

重组人淋巴细胞激活基因3慢病毒载体的构建及其在小鼠成纤维细胞中的稳定表达: 2025年; 目的构建人淋巴细胞激活基因3(lymphocyte activation gene 3, LAG3)慢病毒重组表达载体,并转染小鼠成纤维细胞3T3以获得LAG3优势表达的单克隆细胞株。方法提取人外周血单核细胞总RNA并逆转录为cDNA,以高保真DNA聚合酶PCR扩增LAG3胞外区和跨膜区基因序列。PCR产物采用限制性内切酶Eco RⅠ和NotⅠ双酶切后,与慢病毒载体pTSB-copGFP连接构建重组表达载体pTSB-LAG3-copGFP,并转化大肠埃希菌DH5α。PCR法筛选出阳性克隆菌,提取质粒DNA测序验证。pTSB-LAG3-copGFP重组载体与包装质粒psPAX2、pMD2.0G共同转染人胚肾293T细胞以包装、分泌病毒,收集病毒感染3T3细胞,采用嘌呤霉素筛选的同时有限稀释法获取LAG3稳定表达的3T3单克隆细胞。实时荧光定量PCR、免疫荧光法和流式细胞术分别检测细胞中LAG3 mRNA的转录及LAG3蛋白的表达。结果重组pTSB-LAG3-copGFP慢病毒载体测序结果显示,扩增LAG3基因序列与GenBank中LAG3标准序列(序列号NM_002286.6)比对仅在跨膜区1 697 bp碱基位存在一处His氨基酸密码子同义突变。pTSB-LAG3-copGFP包装病毒感染3T3细胞经嘌呤霉素筛选,共获得20株LAG3+copGFP+-3T3单克隆细胞,均可检测出LAG3 mRNA的转录,其中MC-6单克隆细胞株LAG3转录水平最高。免疫荧光法与流式细胞术检测结果提示LAG3蛋白在MC-6中有效表达并分布于细胞膜和胞质细胞器膜上。结论成功构建pTSB-LAG3-copGFP慢病毒载体,筛选获得淋巴细胞激活因子3高效表达的LAG3+copGFP+-3T3单克隆细胞株。为后续开展LAG3与乙型肝炎等慢性病毒感染性疾病发展的关系以及LAG3干预治疗等实验研究打下基础。; 李欣悦李欣悦蔡秀; 关键词：重组慢病毒载体慢性病毒感染

检测抗淋巴细胞激活基因3抗体药物中和抗体的方法: 本申请涉及抗药性中和抗体分析。具体地，本申请涉及用于检测生物样品中抗淋巴细胞激活基因3(LAG‑3)抗体药物中和抗体的方法。; 刘洋洋马艾平高雪刘运龙谢新遥

检测抗淋巴细胞激活基因3抗体药物中和抗体的方法: 本申请涉及抗药性中和抗体分析。具体地，本申请涉及用于检测生物样品中抗淋巴细胞激活基因3(LAG‑3)抗体药物中和抗体的方法。; 刘洋洋马艾平高雪刘运龙谢新遥

淋巴细胞激活基因3蛋白结构功能及其在结直肠癌治疗中的应用研究进展: 2024年; 淋巴细胞激活基因3(LAG-3)是一种新发现的免疫检查点,LAG-3蛋白主要表达于效应T细胞和调节性T细胞(Treg)中,由4个与CD4高度同源的细胞外免疫球蛋白样域组成,以主要组织相容性复合体Ⅱ、半乳糖凝集素-3为配体,参与调控T细胞的免疫应答、保持免疫稳态。LAG-3蛋白可直接抑制T细胞增殖、调控Tregs细胞功能、调节抗原提呈细胞功能抑制T细胞活化三种途径调节T细胞的免疫应答。LAG-3对结直肠癌或有较好的诊断敏感性,其甲基化状态可能对结直肠癌的风险评估及诊断有一定的作用,并有可能成为预测结直肠癌患者预后的潜在标志物。联合阻断PD-1和LAG-3作为结直肠癌免疫治疗的策略已显示出极大的潜力。; 柯舒慧林丹丹

2型糖尿病患者免疫细胞及其淋巴细胞激活分子家族成员的表达: 2024年; 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者免疫细胞及其淋巴细胞激活分子家族成员(SLAMF)的表达情况。方法选取2018年1月至2019年12月该院收治的82例T2DM患者作为研究组,选取同期接受健康体检的82例健康人作为对照组。比较两组生化指标水平及免疫细胞表达情况及各免疫细胞SLAMF分子表达情况。结果研究组总胆固醇、LDL-C及HDL-C水平低于对照组,甘油三酯、空腹血糖水平高于对照组(P<0.05)。研究组CD4^(+)T细胞比例高于对照组,CD56^(+)总NK细胞表达低于对照组,且主要表现为CD56 dim NK细胞亚群比例降低(P<0.05),研究组外周血总T细胞比例高于对照组,CD4^(+)细胞低于对照组(P<0.05),CD4^(-)T细胞、NK细胞均较对照组明显降低(P<0.05);研究组总T细胞、CD4^(+)T细胞、CD4^(-)T细胞、NK细胞的SLAMF4、SLAMF5、SLAMF6分子平均荧光强度(MFI)表达水平无明显差异(P>0.05),研究组T细胞、CD4^(+)T细胞、CD4^(-)T细胞、NK细胞的SLAMF3分子MFI高于对照组(P>0.05),研究组NK细胞SLAMF7分子MFI低于对照组(P<0.05)。结论T2MD患者外周血单个核细胞免疫细胞比例异常,且外周血单个核细胞中的总T细胞、CD4^(+)T细胞、CD4^(-)T细胞及NK细胞的SLAMF3、SLAMF7分子表达升高。; 冯春张辉英; 关键词：免疫系统 T细胞

一种用于T淋巴细胞激活及培养的无血清培养基及其应用: 本发明公开了一种用于T淋巴细胞激活及培养的无血清培养基及其应用，该无血清培养基包括以下组分：RPMI1640培养基、人血白蛋白、转铁蛋白、柠檬酸铁铵、TEO2添加剂、Tobitec FA、Tobitec FB、无水硫酸铜...; 胥坤王恒胡冬萍颜小芳

靶向淋巴细胞激活基因3(LAG-3)纳米抗体的筛选与活性分析被引量：2: 2023年; 目的建立淋巴细胞激活基因3(LAG-3)免疫噬菌体纳米抗体文库,获得高特异性和亲和力的抗LAG-3纳米抗体,并鉴定其功能活性。方法采用人LAG-3蛋白免疫羊驼,获取外周血cDNA;通过巢式PCR获得纳米抗体基因,构建至pComb3XSS质粒,电转至大肠杆菌XL1-Blue中构建纳米抗体噬菌体免疫文库,并对文库进行质量分析。通过噬菌体展示技术筛选抗LAG-3特异性纳米抗体,通过第二代基因测序技术获得纳米抗体的基因序列。将目的序列构建到大肠杆菌BL21(DE3)周质表达载体pET-22b(+)中进行抗体表达,Prism A柱进行纯化,通过高效液相色谱-质谱分析(HPLC-MS)、ELISA、Western blot法和表面等离子共振技术(SPR)进行抗体性质和功能分析。结果构建的纳米抗体噬菌体免疫文库的库容为7.20×10^(8)菌落形成单位(CFU),序列分析文库多样性良好,经过4轮淘筛后获得3条具有不同氨基酸序列的抗LAG-3纳米抗体,分别为重链抗体重链可变区结构域-L1-3(VHH-L1-3)、VHH-L3-2和VHH-L13-2,纳米抗体表达纯化后纯度在95%以上,三种抗体均可以与重组人LAG-3蛋白进行特异性结合;其中VHH-L13-2抗体的亲和力指数KD值为3.971×10^(-9)mol/L,且对于LAG-3和纤维蛋白原样蛋白1(FGL-1)的结合具有抑制作用,半数抑制浓度(IC_(50))值为15.58 nmol/L。结论成功构建了LAG-3纳米抗体噬菌体免疫文库,筛选获得了特异性好、亲和力高的LAG-3纳米抗体,且对于LAG-3与其配体的结合具有一定的抑制作用。; 文蕊鑫陈玥雯杨紫薇闫凤英李卿武卫党; 关键词：噬菌体展示技术原核表达

可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白3、淋巴细胞激活基因3表达水平与子宫内膜癌疾病转归的相关性被引量：1: 2023年; 目的:探讨可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(sTim-3)、淋巴细胞激活基因3(LAG-3)表达水平与子宫内膜癌疾病转归的相关性及其临床意义。方法:选取2019年2月—2021年3月于本院接受手术治疗的52例子宫内膜癌患者为研究对象,依据术后1年疾病转归情况分为良好组34例、不良组18例。比较两组术前、术后1d、术后1个月血清sTim-3、LAG-3水平。分析术前不同临床病理特征患者血清sTim-3、LAG-3水平及其与临床病理特征相关性。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清各指标对疾病转归的预测价值。分析血清各指标不同表达者转归不良的危险度。结果:与良好组比较,术后1d、术后1个月不良组血清sTim-3、LAG-3水平升高(P<0.05);血清sTim-3、LAG-3水平与临床FIGO分期、组织学分级、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),而与分化程度呈负相关(P<0.05);联合预测转归不良的AUC(0.906)均大于单项预测0.735、0.836(P<0.05);sTim-3、LAG-3高表达者转归不良的危险度分别是低表达者的1.789倍、1.737倍(P<0.05)。结论:子宫内膜癌疾病转归不良患者血清sTim-3、LAG-3水平明显增高,且与临床病理特征密切相关,其对疾病转归具有一定预测价值。; 张瑞红张海涛; 关键词：子宫内膜癌疾病转归

黄芩苷通过阻断2型固有淋巴细胞激活减轻脓毒症肺损伤机制研究: 2023年; 目的:观察黄芩苷(BA)对脓毒症肺损伤的改善作用,及其在脓毒症炎症治疗中的潜在分子机制是否涉及第2组先天性淋巴细胞(ILC2s)的调节。方法:采用盲肠结扎穿刺法(CLP)建立脓毒症模型。将50只小鼠随机分为5组(n=10):假手术组、模型组、BA低剂量组(BA-L,100mg/kg)、BA中剂量组(BA-M,200mg/kg)和BA高剂量组(BA-H,300mg/kg)。观察黄芩苷对肺损伤的影响,并对肺和外周血中ILC2s进行流式细胞术分析。采用ELISA对支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-5和IL-13水平进行分析。分别采用Western blot和PCR检测肺组织匀浆中IL-33、ST2蛋白和mRNA表达。体外观察BA(1.25、2.5、5.0μmol/L)对暴露于LPS(100ng/mL)正常人支气管上皮(NHBE)细胞中IL-33 mRNA表达的影响。结果:BA可逆转CLP对肺组织的损伤作用,尤其是BA高剂量组。BA处理不同程度下调肺组织中IL-4、IL-5和IL-13 mRNA表达(P<0.05),其中以高剂量BA作用最强(P<0.01);同样,中、高剂量BA处理后BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平降低(P<0.05)。低剂量至高剂量BA显著降低肺和外周血内ST2+Thy1.2+ILC2s数量(P<0.001),并下调肺匀浆中IL-33和ST2的蛋白和m RNA表达(P<0.05)。体外实验显示,BA处理可显著降低LPS诱导NHBE细胞中IL-33 mRNA表达升高(P<0.01)。结论:BA可以通过靶向IL33/ST2轴抑制脓毒症小鼠气道炎症中ILC2s介导的反应。; 温霞陈恩就孙俊姜小珍王珊瑚; 关键词：黄芩苷脓毒症肺损伤

一种高效的细胞毒性T淋巴细胞激活增殖制备方法: 一种高效的细胞毒性T淋巴细胞激活增殖制备方法，属于免疫治疗技术领域。包括:1）采集健康单个核细胞；2）调整细胞浓度,孵育,收集未贴壁细胞；3）调整细胞浓度,加入A磁珠和B磁珠与悬浮细胞混合；4）将混合悬液的上清液过滤，为...; 杨罕闻

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