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山羊化脓隐秘杆菌溶血抗体间接ELISA检测方法的建立、验证及应用被引量:4
2021年
目的建立山羊化脓隐秘杆菌溶血(pyolysin,PLO)抗体的间接ELISA检测方法,并进行验证及应用。方法通过E.coli表达系统表达重组溶血(recombinant pyolysin,r PLO),采用Ni-NTA亲和层析进行纯化。以r PLO作为包被抗原,HRP标记的兔抗山羊IgG抗体为二抗,建立检测山羊化脓隐秘杆菌PLO抗体的间接ELISA法。采用方阵滴定法确定最佳抗原包被浓度(3.5、0.7、0.14和0.05μg/mL)及最佳二抗稀释度(1∶10000、1∶20000、1∶40000),同时验证方法的特异性、灵敏性及精密性。分别采用琼脂糖凝胶扩散试验和优化的间接ELISA法检测15份化脓隐秘杆菌自然感染的山羊血清,计算两者符合率;并采用优化的间接ELISA法检测360份临床山羊血清样本。结果纯化的r PLO相对分子质量约34000,纯度达90%。优化后ELISA法最佳抗原包被浓度为0.14μg/mL,二抗稀释度为1∶40000。优化后的ELISA法对E.coli、链球菌和伪结核棒状杆菌的阳性血清均无交叉反应;可检测出1∶800稀释的阳性血清;批内和批间变异系数(CV)均<10%。两种方法检测15份化脓隐秘杆菌自然感染山羊血清阳性检出率均为100%,符合率为100%;采用优化方法检测360份山羊血清的阳性率为24.1%(87/360)。结论成功建立了用于检测山羊化脓隐秘杆菌PLO抗体的间接ELISA法,该方法具有良好的特异性、灵敏性及精密性。
徐登峰张素辉张素辉许国洋赵扬扬付利芝沈克飞
关键词:山羊化脓隐秘杆菌溶血素ELISA法
火把花根片抑制溶血抗体的量-时-效关系研究被引量:1
2016年
目的:观察火把花根片抑制溶血抗体的生成作用,考察量效关系与时效关系,为确定药物的最佳给药剂量和给药时间提供参考。方法:通过给小鼠腹腔注射鸡红细胞产生溶血抗体的模型,观察不同给药剂量和不同给药时间对小鼠溶血抗体生成的影响,同时进行了火把花根片对首次免疫和二次免疫后溶血抗体生成抑制作用的比较研究。结果:量效关系实验结果表明:5g生药/kg、10g生药/kg及15g生药/kg对溶血抗体生成的抑制率分别为0%、43.6%及71.8%。时效关系实验结果表明:火把花根片15g生药/kg给药3天、5天、7天的抑制率分别为24.0%、41.7%和61.1%;给药7天后停药,第7天、第14天、第21天及第28天的抑制率分别为27.3%、34.8%、41.4%及58.8%。首次和二次免疫实验结果表明:15g生药/kg连续给药14天,第7天和第14天(二次免疫)的抑制率分别为61.1%及6.3%。结论:火把花根片对小鼠溶血抗体的生成有明显的抑制作用,半数有效量为:9.69g生药/kg,最佳给药剂量是15g生药/kg,最佳给药时间是7天,给药7天后的维持时间不低于4周。15g生药/kg连续给药14天对第二次免疫后溶血抗体的生成没有明显的抑制作用。该研究为火把花根片的质量控制及该药物在临床更合理的使用提供有益的试验依据。
韦莉胡娟米本中郭延垒徐嘉红樵星芳
关键词:火把花根片溶血素抗体量效关系时效关系
生肌玉红膏对小鼠血清溶血抗体的影响
目的观察生肌玉红膏对小鼠血清溶血抗体生成的影响。方法将小鼠按体重随机分为6组:正常对照组、生肌玉红膏组、湿润烧伤膏组、环磷酰胺组、生肌玉红膏+环磷酰胺组、湿润烧伤膏+环磷酰胺组,每组10只。并给予相应外用药物,1次/天...
王丽娟
关键词:中药生肌玉红膏溶血素抗体免疫功能
运脾方对小鼠血清溶血抗体生成作用的影响被引量:15
2009年
目的观察运脾方对小鼠溶血抗体生成作用的影响,探讨其提高免疫功能的作用机理。方法健康KM小鼠48只,随机分成正常对照组及运脾方大、中、小剂量组,正常对照组灌服蒸馏水,运脾方大、中、小剂量组分别灌服20、10、5mL/kg运脾方糖浆制剂,连续给药7d。第7日给每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞(CRBC)混悬液0.2mL进行免疫,连续7d。检测血清溶血光密度值。结果运脾方大、中、小剂量组分别与正常对照组比较,小鼠的血清溶血光密度值明显增加(P<0.001)。结论运脾方提高免疫功能的作用机理与增加血清溶血抗体水平密切相关。
丁晓红孙远岭周纬杨珍
关键词:运脾方小鼠
麻黄多糖对绵羊红细胞所致免疫功能低下模型小鼠溶血抗体生成的影响(比色法)被引量:5
2007年
孟达理朱萱萱刘志辉严士海许芝银
关键词:麻黄多糖溶血素抗体体液免疫
黄芩茎叶总黄酮对小鼠绵羊红细胞溶血抗体生成的影响被引量:5
2007年
黄芩茎叶总黄酮是从黄芩茎叶中提取的有效成分,通过系统的实验研究发现,黄芩茎叶总黄酮具有抗炎、解热、镇痛、抗菌、抗病毒、免疫调节、抗肿瘤,以及对心、恼血管等多方面的药理活性。本实验研究了不同剂量的黄芩茎叶总黄酮对小鼠绵羊红细胞溶血抗体生成的影响。
邓淑华赵连伟杨鹤松
关键词:黄芩茎叶总黄酮小鼠溶血素抗体
大蒜提取液对小鼠脾脏及血清溶血抗体影响被引量:20
2006年
郑国华李会庆
关键词:体液免疫功能小鼠
前列康对鸡红细胞致小鼠溶血抗体生成的影响被引量:17
2004年
目的 :观察前列康对体液免疫功能的影响。方法 :应用鸡红细胞作免疫原的溶血测定法检测光密度 (OD)值。结果 :前列康小、中、大剂量组 (7.8,11.7,15 .6 g/kg )OD值均大于环磷酰胺组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,均可对抗环磷酰胺抑制抗体生成的作用。其中前列康小剂量的OD值增加尤为明显 ,与前列康大剂量组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :前列康具有增强体液免疫功能的作用。
李勇夏翠英章天寿
关键词:前列康体液免疫
墨旱莲水煎剂对DTH和血清溶血抗体的影响被引量:12
2003年
目的 研究墨旱莲水煎剂的免疫调节作用。方法 采用迟发型超敏反应 (DTH)、血清溶血抗体生成实验 ,测定相关免疫指标。结果 墨旱莲水煎剂显著提高免疫损伤小鼠的DTH和血清溶血抗体水平。
王怡薇周庆峰白秀珍
关键词:墨旱莲迟发型超敏反应血清溶血素
火把花根片抑制溶血抗体生成的量时效关系
目的 观察火把花根片对鸡红细胞致昆明小鼠溶血抗体生成抑制作用的量效和时效关系,为临床合理用药提供实验依据.方法 (1)量效关系:昆明小鼠分为对照组、火把花根片5、10、15g生药/kg组.所有动物均在Day1腹腔注射鸡...
韦莉胡娟米本中樵星芳徐嘉红
关键词:火把花根片鸡红细胞溶血素抗体抑制率量效

相关作者

朱萱萱
作品数:484被引量:2,076H指数:21
供职机构:南京中医药大学
研究主题:抗炎 小鼠 镇痛 溃疡性结肠炎 清肠化湿
胡娟
作品数:49被引量:84H指数:5
供职机构:重庆市中药研究院
研究主题:实验动物 火把花根片 LEWIS大鼠 佐剂性关节炎 实验大鼠
韦莉
作品数:18被引量:24H指数:3
供职机构:重庆医科大学
研究主题:实验动物 火把花根片 时效关系 溶血素抗体 反向斑点杂交
余梦瑶
作品数:246被引量:993H指数:18
供职机构:四川省中医药科学院
研究主题:灵芝 药物组合物 化合物 抗肿瘤 发酵
严士海
作品数:151被引量:582H指数:12
供职机构:江苏省中医院
研究主题:冠心平 含药血清 通脉颗粒 组合物 中药复方