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银连含漱液对脂多糖诱导人牙龈成纤维细胞的作用: 2025年; 目的观察银连含漱液对脂多糖(LPS)诱导人牙龈成纤维细胞(HGFs)炎症反应、氧化应激及细胞凋亡的影响。方法收集临床患者的健康牙龈组织,采用组织块法培养HGFs并采用免疫荧光法进行细胞鉴定。采用CCK-8法检测不同体积分数银连含漱液(2.5%、5%、10%、20%、40%)、不同浓度绿原酸(0.01、0.1、0.5、1、10mg·mL^(-1))及LPS(1、10、20、35、50μg·mL^(-1))分别与HGFs共培养24、48、72h后的增殖变化情况。依据CCK-8检测结果,将HGFs分为4组:DMEM对照组、1μg·mL^(-1) LPS组、1μg·mL^(-1) LPS+20%银连含漱液组、1μg·mL^(-1) LPS+1 mg·mL^(-1)绿原酸组。干预24 h后,采用流式细胞术检测HGFs的凋亡水平;WST-1法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法检测细胞上清液中炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的含量。结果选择对HGFs无明显毒性作用的1 mg·mL^(-1)绿原酸、20%银连含漱液和1μg·mL^(-1) LPS作用24 h。与对照组比较,LPS组的HGFs凋亡率显著升高(P<0.001),SOD活力显著降低(P<0.001),上清液中的IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.001)。与LPS组比较,LPS+20%银连含漱液组及LPS+1 mg·mL^(-1)绿原酸组的HGFs凋亡率显著降低(P<0.001),SOD活力显著升高(P<0.01,P<0.001),上清液中的IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.001)。与LPS+20%银连含漱液组比较,LPS+1 mg·mL^(-1)绿原酸组的HGFs凋亡率显著降低(P<0.001),SOD活力显著升高(P<0.01),上清液中的IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论银连含漱液可抑制LPS诱导的HGFs细胞凋亡,提高其抗氧化能力,降低炎症反应,该作用可能与活性成分绿原酸密切相关。; 齐刘英洪楠锐刘伟南; 关键词：绿原酸人牙龈成纤维细胞脂多糖炎症反应氧化应激

探究NLRP3炎症小体对人原代牙龈成纤维细胞炎症刺激的影响: 2025年; 目的:本研究在于探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体在人原代牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,hGFs)炎症刺激中的潜在作用机制。方法:使用沉默RNA(silencing RNA,siRNA)构建NLRP3沉默或阴性对照并转染至hGFs,与牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis,Pg)共培养诱导炎症,并给予1μmol/L NLRP3炎症小体激动剂BMS-986299干预。使用流式细胞术检测各组细胞凋亡;使用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量;使用Western blot检测了NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1前体(cysteinyl aspartate specific proteinase-1 precursors,pro-Caspase-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)与凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis associated speck-like protein containing a caspase activating recruitment domain,ASC)等NLRP3炎症小体相关蛋白,与白细胞介素-1β前体(interleukin-1βprecursors,pro-IL-1β)、磷酸化的核因子κB(nuclear factor kappa-B phosphorylation,p-NF-κB)/核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)与消皮素D(gasdermin D,GSDMD)等细胞焦亡相关蛋白;免疫荧光检测NLRP3炎症小体的细胞定位。结果:流式细胞术结果显示,NLRP3沉默能有效减少细胞凋亡;ELISA检测结果表明NLRP3沉默能降低Pg诱导的炎症因子水平;Western blot和免疫荧光结果表明NLRP3沉默可以抑制NLRP3炎症小体激活,并抑制pro-IL-1β的表达、NF-κB的磷酸化与GSDMD介导的细胞焦亡。而NLRP3沉默的效果均在NLRP3炎症小体激动剂BMS-98629使用后部分逆转。结论:NLRP3可以激活NLRP3炎症小体和炎症相关通路,同时促进hGFs细胞焦亡。; 张黄苗瑞婧范旭升黄婕王永武; 关键词：牙龈成纤维细胞牙龈卟啉单胞菌种植体周围炎

FGF18通过上调BMP2诱导人牙龈成纤维细胞向成骨样细胞分化: 2025年; 目的研究成纤维细胞生长因子18(FGF18)是否能诱导体外分离培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)向成骨样细胞分化,并探究其成骨机制。方法组织块法分离培养HGFs并鉴定。取第3代HGFs,分为实验组和对照组。实验组加入FGF18和L-DMEM、对照组加入L-DMEM。噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度FGF18(0、0.01、0.02、0.04、0.06 mg/L)对HGFs增殖影响;碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色检测成骨能力和矿化能力;RT-PCR、免疫细胞化学染色及Western blot检测成骨相关基因、蛋白和BMP信号通路中BMP2基因和蛋白表达情况。结果与对照组比较,实验组培养3、5、7、9、11 d均可促进HGFs增殖(P<0.05);培养14、21 d ALP活性、矿物盐沉积均增高(P<0.05),ALP、OPN、OCN及BMP信号通路中BMP2 mRNA表达均明显增高(P<0.01)。培养21 d OPN、OCN及BMP2蛋白表达较培养14 d明显增高(P<0.01)。结论FGF18能促进HGFs增殖,诱导HGFs向功能性成骨样细胞分化,其成骨机制与上调BMP2有关。; 侯亚丽刘慧娟张昊孙婧媛宋鹏刘月瑶李荷香; 关键词：人牙龈成纤维细胞成骨细胞分化

miR-17-5p调控TXNIP/NLRP3信号通路对牙龈吓啉单胞菌LPS诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应的影响: 2025年; 目的探讨微小RNA-17-5p(miR-17-5p)调控硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/NLRP3信号通路对牙龈叶啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(PDLF)炎症反应的影响。方法以PDLF细胞为研究对象,随机分为Control组(正常培养)、Pg-LPS组(用1μg/mL的Pg-LPS培养细胞24h)、NC-mimics组(在Pg-LPS诱导的基础上转染NC-mimics)、miR-17-5p-mimics组(在Pg-LPS诱导的基础上转染miR-17-5p-mimics)、miR-17-5p-mimics+pcDNA-NC组(在Pg-LPS诱导的基础上转染miR-17-5p-mimics+pcDNA-NC)、miR-17-5p-mimics+pcDNA-TXNIP组(在Pg-LPS诱导的基础上转染miR-17-5p-mimics+pcDNA-TXNIP)。qRT-PCR法检测各组PDLF细胞中miR-17-5p、TXNIP、NLRP3mRNA的表达;MTT法检测PDLF细胞增殖;流式细胞仪检测PDLF细胞的调亡;ELISA试剂盒检测PDLF细胞中MMP-1、MMP-9、IL-6、IL-8的表达;WB检测PDLF细胞中TXNIP、NLRP3蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验检验miR-17-5p与TXNIP之间的互作。结果Pg-LPS组A_(490)值、miR-17-5p低于Control组,调亡率、TXNIPmRNA和蛋白、NLRP3mRNA和蛋白、MMP-1、MMP-9、IL-6、IL-8表达高于Control组(P<0.05);miR-17-5pmimics组A_(490)值、miR-17-5p高于Pg-LPS组、NC-mimics组,调亡率、TXNIPmRNA和蛋白、NLRP3mRNA和蛋白、MMP-1、MMP-9、IL-6、IL-8表达低于Pg-LPS组、NC-mimics组(P<0.05);与miR-17-5p-mimics组、miR-17-5p-mimics+pcDNA-NC组相比,miR-17-5p-mimics+pcDNA-TXNIP组A_(490)值降低,调亡率、TXNIPmRNA和蛋白、NLRP3 mRNA和蛋白、MMP-1、MMP-9、IL-6、IL-8表达升高(P<0.05);miR-17-5p可以靶向负调控。结论miR-17-5p可以抑制TXNIP/NLRP3信号通路,抑制Pg-LPS诱导的PDLF细胞的炎症反应。; 王欣束传亮; 关键词：硫氧还蛋白相互作用蛋白 NLRP3 人牙龈成纤维细胞炎症反应

牙周炎环境下人牙龈成纤维细胞线粒体稳态的失衡: 2024年; 目的探讨牙周炎环境下人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)线粒体稳态的失衡变化,为牙周炎发病机制的探索提供基础。方法本研究已获得单位伦理委员会的批准。收集2023年6月1日至2023年12月31日于第四军医大学口腔医院牙周病科进行牙周手术治疗患者的牙周组织,所有受试者均在术前签署知情同意书。分别在冠延长术和牙周翻瓣术时收集牙龈组织健康受试者[健康对照组(control组)]和牙周炎受试者[牙周炎组(CP组)]的牙龈结缔组织各6例;原代培养牙周健康受试者来源的HGFs,并将其分为对照组(NC组)和Pg.LPS组,NC组用不含药物的培养基培养24 h,Pg.LPS刺激组用含有5μg/mL牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,Pg.LPS)的培养基培养24 h,利用透射电镜观察上述各组牙龈结缔组织和HGFs中线粒体的数量、形态和结构,并对其数量、周长及表面积进行定量分析;利用Mi⁃toSOXTMRed染液、TMRM染液和ATP检测试剂盒测定比较不同刺激条件下HGFs中线粒体活性氧(reactive oxy⁃gen species,ROS)、线粒体膜电位和线粒体三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)的生成水平。结果透射电镜结果提示,牙周炎组牙龈结缔组织HGFs及Pg.LPS刺激组HGFs中线粒体的形态异常,线粒体嵴断裂甚至消失;炎症刺激下线粒体数量显著减少,线粒体表面积和周长显著增加(P<0.05)。此外,经Pg.LPS刺激后,HGFs中线粒体ROS水平显著高于对照组(P<0.05),而线粒体膜电位及ATP生成水平显著低于对照组(P<0.05)。结论牙周炎环境下,HGFs线粒体数量、形态结构及功能均发生显著改变,HGFs线粒体稳态失衡与牙周炎发生发展密切相关。; 黄珺玲王津津王勤涛; 关键词：牙周炎冠延长术牙周翻瓣术牙龈成纤维细胞

芦丁对牙龈成纤维细胞增殖、迁移及炎症因子表达的影响: 牙周炎是由菌斑生物膜引起的感染性牙周疾病。我国牙周炎的发病率高达70%-90%。牙周致病菌之一牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)细胞壁脂多糖(LPS)直接与人牙龈成纤维细胞(human gingival fibr...; 刘秋萍; 关键词：芦丁牙龈成纤维细胞增殖迁移炎症因子

TDP-43对LPS刺激下小鼠牙龈成纤维细胞影响的实验研究: 2024年; 目的:探究TARDNA结合蛋白-43(TARDNA binding protein-43,TDP-43)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的炎症微环境中小鼠牙龈成纤维细胞(mouse gingival fibroblasts cells,MGFs)的影响。方法:分离培养野生型C57BL/6J小鼠的牙龈成纤维细胞。设置不同浓度及处理时间的LPS刺激,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术检测相关炎症因子的mRNA表达量,筛选出最佳处理条件。对细胞进行免疫荧光染色,观察炎症微环境下MGFs中TDP-43的变化。使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染技术敲低MGFs中的TDP-43,并测定转染效率。设置3个实验组:阴性对照组(NC组)、LPS诱导对照组(NL组)和TDP-43敲低+LPS诱导组(SL组)。利用RT-qPCR技术检测部分炎症因子、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、黏附相关因子mRNA的表达情况。应用蛋白质印迹法(western blotting)检测部分炎症因子、黏附相关因子蛋白表达情况。使用天狼星红染色法探究细胞内胶原沉积情况。结果:最佳LPS刺激的浓度为100 ng/mL,时间为6 h;在无LPS刺激的状态下,MGFs中的TDP-43基本在细胞核内,LPS刺激后,TDP-43出现在细胞核和细胞质中;成功使用siRNA转染MGFs构建敲低TDP-43的细胞模型,转染效率接近50%;在LPS刺激下,TDP-43敲低的实验组(SL组)与对照实验组(NL组)相比,炎症因子、基质金属蛋白酶、黏附相关因子mRNA的表达量出现下调(P<0.05),且部分黏附相关蛋白及炎症因子蛋白的表达量也显著下调;在胶原沉积方面,SL组和NL组相较于NC组都有减少(P<0.05),但NL组和SL组差异不大,无统计学意义(P>0.05)。结论:当LPS诱导MGFs处于炎症微环境时,TDP-43出现由核内向核外移动的趋势;且TDP-43对LPS诱导的MGFs炎症微环境下炎症因子、黏附相关因子及基质金属蛋白酶表达起正向调控作用,对胶原沉积的影响不明显。; 许慧琳苏俭生; 关键词：脂多糖牙周炎

电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞的影响: 2024年; 目的探讨电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)的影响,为种植基台表面改性设计提供实验依据。方法根据试样不同表面进行分组:NC组(阴性对照,光滑表面无其他处理)、NM-1组(纳米网-1,1 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)、NM-2组(纳米网-2,5 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)。扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观察不同试样表面形貌及HGFs在其表面的黏附状态,接触角测量仪测定试样表面亲水性。CCK-8评估HGFs在不同试样表面的增殖情况;qRT-PCR检测HGFs在不同试样表面Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL1A1)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,COL3A1)、纤连蛋白1(fibronectin 1,FN1)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、黏着斑蛋白(vinculin,VCL)、整合素α2(integrinα2,ITGA2)、整合素β1(integrinβ1,ITGB1)等黏附相关基因表达水平;免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)观察HGFs在不同试样表面vinculin蛋白表达情况;天狼猩红染色评价HGFs在不同试样表面胶原纤维分泌合成情况。结果SEM观察到NM-1组和NM-2组表面形成有序均一的三维网状结构,网格直径NM-1组约为30 nm,NM-2组约为150 nm;NM-1组和NM-2组对比NC组,水接触角显著下降(P<0.0001);NM-1组细胞增殖能力较NC组显著提高(P<0.01),NM-1组和NM-2组的水接触角及细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。SEM镜下可见HGFs黏附24 h后在各组试样表面均黏附良好,NM-1组和NM-2组细胞与NC组对比伸展面积更大,形态纤长,细胞伪足更发达。qRTPCR结果显示NM-1组中COL1A1、COL3A1、FN1、FAK、VCL等黏附相关基因表达水平显著高于NC组和NM-2组(P<0.01)。vinculin蛋白免疫荧光结果表明,NM-1组vinculin蛋白表达水平最高,单个细胞黏着斑数量最多(P<0.01)。天狼猩红染色结果显示NM-1组胶原纤维分泌合成量最高(P<0.0001)。结论Ti6Al4V经电化学脱合金改性后所构�; 蔡东轩李毅王岚张燕李广文张玉梅; 关键词：TI6AL4V 人牙龈成纤维细胞黏着斑

灯盏花素对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞损伤的影响: 2024年; 目的探讨灯盏花素(breviscapine,BVP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(porphyromonas gingivalis,Pg-LPS,简称LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)损伤的影响。方法体外培养HGFs细胞,分为对照组、LPS组、LPS+BVP低、中、高剂量组。CCK-8法检测细胞增殖;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、IL-6水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;蛋白质印迹法检测细胞中细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素B1(Cyclin B1)及凋亡相关B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平;TBA比色法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;二氢荧光素二乙酸酯(dichloro-dihydro-fluorescein diacetate,DCFH-DA)法测定细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与对照组比较,LPS组HGFs细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+BVP低、中、高剂量组细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著降低(P<0.05)。结论BVP可通过抗炎、抗氧化作用减轻LPS诱导的HGFs细胞损伤。; 晁晓芹赵国廷董振耀马民英姚毅章; 关键词：灯盏花素人牙龈成纤维细胞细胞损伤

羟基积雪草苷对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞的生物学行为的影响: 研究目的:本研究就羟基积雪草苷(Madecassoside)对人牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblasts,HGFs)的生物活性作用进行讨论,探究其对HGFs的增殖特性,并进一步采用脂多糖(Li...; 李聪聪; 关键词：羟基积雪草苷牙龈成纤维细胞脂多糖

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