搜索到1739篇“ 牛结核分枝杆菌“的相关文章
用于LAMP检测结核分枝杆菌的组合物、试剂盒及其应用
本申请提供一种用于环介导等温扩增(LAMP)检测结核分枝杆菌的组合物,试剂盒及其应用。本申请提供的环介导等温扩增检测结核分枝杆菌的组合物及其试剂盒可用于LAMP检测和数字LAMP检测中,可定性或定量检测样品中的结核...
陶艺蔡东洋兰英王剑杜文斌
结核分枝杆菌与表位基因重组减毒沙门菌的构建及应用
本发明公开了一种结核分枝杆菌重组减毒沙门菌疫苗的方法。通过选择结核病特异性抗原基因Ag85B、MPT63和HSP65,并利用生物在线软件分析其B细胞和T细胞表位,将筛选出的表位肽段连接成新的表位基因AMH。对AMH进...
金天明任君扈立伟卢宝平刘青朱凡杰包利霞顾天越
结核分枝杆菌数字PCR试剂盒及其检测方法
本发明属于生物检测技术领域,涉及结核分枝杆菌数字PCR试剂盒及其检测方法;所述的试剂盒包含用于扩增结核分枝杆菌IS6110基因的第一引物对和用于扩增结核分枝杆菌IS1081基因的第二引物对,以及与所述的第一引物对的...
窦立静 郑祖亮 陈强斌 房文斌 冯晓燕 杨洁 于祥春 刘强 蔺文龙 赵艳梅 王宏伟 叶俊生 刘颖 屈阳
结核分枝杆菌BfrB蛋白生物信息学分析及多克隆抗体制备
2024年
目的旨在预测和分析结核分枝杆菌(Mycobacterium bovis)BfrB蛋白的结构和潜在功能,并进行克隆表达及多克隆抗体的制备,为新型疫苗、诊断靶点等的开发提供理论基础。方法利用生物信息学软件预测分析BfrB蛋白的生物信息学特征,克隆其编码基因并与原核表达载体pET32a连接,构建重组表达载体并利用IPTG诱导表达,镍柱亲和层析法纯化重组BfrB蛋白,SDS-PAGE和Western blot验证分析重组BfrB蛋白,以该蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并测定其效价。结果BfrB蛋白含有181个氨基酸,分子式为C_(903)H_(1405)N_(255)O_(276)S_(6),理论分子质量为20.442 ku,无信号肽和跨膜结构域,是一种定位于细胞质的亲水性的储铁蛋白。该蛋白有3个固定无序结构域、15个磷酸化位点、16个甲基化位点和2个乙酰化位点,无糖基化位点。其二级结构中α-螺旋占70.01%,延伸链占4.42%,β-折角占3.87%,无规则卷曲占21.55%,三级结构与二级结构预测结果一致,空间结构(四级结构)为24个亚单位(三级结构)组成的聚合物。BfrB蛋白含有9个B细胞抗原表位、7个CD4+T细胞抗原表位和3个CD8+T细胞表位。该蛋白与结核分枝杆菌BCG、结核分枝杆菌H37Rv等的BfrB蛋白亲缘关系较近,同源性高达99%以上。与BfrB蛋白存在相互作用的蛋白有Oxidase、rpsL、katG、hemH等,其中BfrB蛋白与Oxidase蛋白之间的相互作用关系最强。成功克隆BfrB蛋白编码基因,大小与预期相符,与表达载体pET32a连接后,经双酶切、测序验证表明重组表达载体pET32a-BfrB构建正确。IPTG诱导表达、纯化后获得条带单一、纯度较高的重组BfrB蛋白,Western blot显示重组BfrB蛋白具有良好的免疫原性,能被相应抗体识别。用该蛋白免疫新西兰大白兔能够诱导产生抗体,且其效价高达1∶512000。结论成功预测和分析了结核分枝杆菌BfrB蛋白的结构及功能,并获得BfrB蛋白及多克隆抗体,为后�
史超刘素平张伟张伟孙志华孙志华王震周霞
关键词:牛结核分枝杆菌生物信息学分析分子对接
基于DNAzyme双循环体系的结核分枝杆菌检测探针组及其检测方法
本发明提供了一种基于DNAzyme双循环体系的结核分枝杆菌检测探针组及其检测方法,该检测探针组包括发夹型探针H<Sub>1</Sub>、发夹型探针H<Sub>2</Sub>、信号链S<Sub>3</Sub>和Pb<Su...
张何杨苑杨梅张培柔傅昕
结核分枝杆菌ESAT6-CFP10-BFH融合蛋白原核表达及皮试反应
2023年
为了改善ESAT6-CFP10融合蛋白检测结核分枝杆菌感染存在灵敏度低的问题,应用铁蛋白骨架显著性提升EC(ESAT6-CFP10)法的灵敏度,将ESAT6、CFP10和源铁蛋白重链(BFH)用柔性多肽连接,按照ESAT6-CFP10-BFH的串联组合方案设计基因序列,构建pET-28a-EC-BFH重组质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中。使用自诱导培养基对铁蛋白EC融合抗原(EC-BFH蛋白)进行诱导表达,亲和层析镍柱法纯化EC-BFH蛋白,使用蛋白印迹(Western blot)对EC-BFH蛋白进行鉴定及纯度测定。将EC-BFH蛋白对健康豚鼠进行皮试,通过观察皮试部位是否会引起炎性反应,验证EC-BFH蛋白的特异性。对结核分枝杆菌致敏成功的豚鼠,以提纯结核菌素(PPDB)作为对照,检测EC蛋白和EC-BFH蛋白效价对比阳性率。结果表明:EC-BFH蛋白的相对分子质量约为48.4 kDa,与预期相同,说明成功纯化EC-BFH蛋白。EC-BFH蛋白对健康豚鼠进行皮试24 h后无炎症反应,说明EC-BFH蛋白特异性良好。根据阳性率数据显示EC-BFH蛋白效价远远高于EC蛋白;在注射量为1,10和20μg时,EC-BFH蛋白皮试的阳性率均高于EC蛋白,尤其注射量在1μg时,EC蛋白和EC-BFH蛋白的阳性率分别为16.6%和100%,且EC-BFH蛋白与PPDB的阳性率接近。结果表明EC-BFH融合蛋白提高了EC法检测结核分枝杆菌感染的灵敏度,增强了皮试反应效果,作为检测结核分枝杆菌感染的诊断试剂有很大的研究价值。
鲍佳鹏孙悦张建军苏岳乐毕力格郭宇巴依尔塔赵东辉陈彪冯紫佳郑可秦建华
关键词:牛结核分枝杆菌
一种检测结核分枝杆菌的试剂、试剂盒及检测方法
本发明提供了一种检测结核分枝杆菌的试剂、试剂盒及检测方法,属于分子生物学检测技术领域;所述试剂包括基于CRISPR/Cas12a正反馈循环机制的识别元件、超支化杂交链式反应信号放大反应用试剂和比色分析用试剂;本发明以C...
张何刘琼高赛男杨梅李倩傅昕
一种检测结核分枝杆菌的试剂、试剂盒及检测方法
本发明提供了一种检测结核分枝杆菌的试剂、试剂盒及检测方法,属于分子生物学检测技术领域;本发明通过杂交链式反应介导构建具备多个PAM识别位点的DNA纳米线,同时结合多个Cas12a蛋白,顺式切割后激活多重Cas12a反式...
张何刘琼李惠情高赛男杨梅傅昕
一种检测结核分枝杆菌的试剂、试剂盒及检测方法
本发明提供了一种检测结核分枝杆菌的试剂、试剂盒及检测方法,属于分子生物学检测技术领域;本发明通过杂交链式反应介导构建具备多个PAM识别位点的DNA纳米线,同时结合多个Cas12a蛋白,顺式切割后激活多重Cas12a反式...
张何刘琼李惠情高赛男杨梅傅昕
基于8-17脱氧核酶与CRISPR-Cas13a反式切割检测结核分枝杆菌的探针组及方法
本发明提供了一种基于8‑17脱氧核酶与CRISPR‑Cas13a反式切割检测结核分枝杆菌的探针组及方法,将8‑17脱氧核酶循环切割性能、CRISPR‑Cas13a反式循环切割性能、立足点链置换介导的序列循环利用整合起来...
张何高赛男马文杰刘琼杨梅豆玉豪傅昕

相关作者

吴位珩
作品数:84被引量:102H指数:5
供职机构:贵州省畜牧兽医研究所
研究主题:牛结核病 PCR 牛结核分枝杆菌 快速诊断试剂盒 阴性对照
傅昕
作品数:80被引量:75H指数:4
供职机构:湖南工程学院
研究主题:血红素 试剂盒 DNA酶 牛结核分枝杆菌 探针
徐广贤
作品数:148被引量:313H指数:9
供职机构:宁夏医科大学总医院
研究主题:肺泡巨噬细胞 牛分枝杆菌 牛结核分枝杆菌 靶向 细胞自噬
杨梅
作品数:58被引量:52H指数:4
供职机构:湖南工程学院
研究主题:牛结核分枝杆菌 血红素 试剂盒 探针 循环核酸
张何
作品数:93被引量:128H指数:5
供职机构:湖南工程学院
研究主题:血红素 试剂盒 DNA酶 牛结核分枝杆菌 探针