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- 石火英李玉安丰邑李文静
- 一种无抗性标记的猪霍乱沙门氏菌三基因缺失株的构建及其应用
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- 付磊储岳峰韩瑞尤留超陶政宇
- 罗伊氏乳杆菌抑制猪霍乱沙门氏菌过程中IPEC--J2细胞染色质可及性和转录调控机制研究
- 猪霍乱沙门氏菌是一种普遍存在的食源性病原体,也是引起猪腹泻的最常见病原体之一,在全球的猪肉生产链中普遍存在,严重危害养猪业的可持续发展。断奶仔猪中猪霍乱沙门氏菌感染率较高,可导致猪的体重下降,甚至死亡。因此,采取措施减少...
- 任战士
- 关键词:罗伊氏乳杆菌猪霍乱沙门氏菌转录调控
- 一种猪霍乱沙门氏菌、疫苗及其应用
- 本发明公开了一种猪霍乱沙门氏菌C500(pVAX‑S/GnRH‑2a/KISS1‑asd),保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 2020055。该菌种应用于制备控制动物发情表现的药品或疫苗。本发明...
- 熊家军许学林黎平贵陈建国杨艾平杨波荆焕松胡映红李可可游思
- 猪霍乱沙门氏菌crp、cya、aroA、aroB基因缺失株的构建及评价
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- 赵靖
- 关键词:猪霍乱沙门氏菌基因缺失株免疫学特性
- 噬菌体S528及其诱导猪霍乱沙门氏菌产生噬菌体抗性机制的初步研究
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- 张慧君
- 关键词:沙门菌受体
- pH响应比色酶联免疫吸附法检测牛奶中猪霍乱沙门氏菌被引量:6
- 2021年
- 人类常常因误食被猪霍乱沙门氏菌感染的食物而引发中毒。因此,急需构建适用于快速、灵敏检测食物中猪霍乱沙门氏菌污染的新方法。鉴于此,本文构建了一种pH响应比色酶联免疫吸附法灵敏检测牛奶中猪霍乱沙门氏菌。该方法利用葡萄糖氧化酶催化底物葡萄糖产生葡萄糖酸,导致溶液pH下降,进而引发溴甲酚紫(Bromocresol purple,BCP)溶液颜色由紫色变成亮黄色,随后通过记录BCP颜色变化(OD 430/OD 590)实现目标菌的定量检测。当菌浓度为2.54×103~6.17×10^5 CFU/mL,该方法定量检测猪霍乱沙门氏菌可用方程一表述:y 1=0.1051ln(x)+0.7024(R 2=0.7513);当菌浓度为6.17×10^5~1.67×10^7 CFU/mL,该方法定量检测猪霍乱沙门氏菌可用方程二表述:y2=1.3216ln(x)-15.797(R^(2)=0.9711);当菌浓度大于1.67×10^7 CFU/mL时,BCP溶液呈现明显亮黄色,OD 430/OD 590值趋于稳定,无法实现猪霍乱沙门氏菌定量检测。将六个不同浓度的猪霍乱沙门氏菌(2.5×103~5.6×10^6 CFU/mL)加标至牛奶中,检测结果显示回收率介于72.16%~103.58%,相对标准偏差介于7.54%~15.30%。总之,本研究所构建的比色ELISA方法适用于牛奶中不同浓度的猪霍乱沙门氏菌快速、灵敏定量检测。
- 李倩影张抗抗周耀锋黄小林李响敏熊勇华
- 关键词:溴甲酚紫猪霍乱沙门氏菌
- 丁酸梭菌通过激活p38丝裂原活化蛋白激酶/核因子E2相关因子信号通路减轻猪霍乱沙门氏菌导致的猪小肠上皮细胞氧化损伤被引量:3
- 2021年
- 本试验旨在研究丁酸梭菌(CB)缓解猪霍乱沙门氏菌(SC)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)氧化损伤的分子机制。选用IPEC-J2细胞为模型,采用CCK-8法检测细胞活力,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性和丙二醛(MDA)含量,从而筛选诱导IPEC-J2细胞氧化损伤的SC适宜剂量。CB预处理细胞后,用SC感染细胞,通过小干扰RNA(siRNA)沉默IPEC-J2细胞中核因子E2相关因子(Nrf2)的表达以及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂处理细胞,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞中p38 MAPK、SOD1、SOD2、GPX1、GPX2和Nrf2的mRNA相对表达量,蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞中p38 MAPK和Nrf2蛋白相对表达量。结果表明,CCK-8法和ELISA法确定1×10^(3)CFU/mL为SC诱导IPEC-J2细胞氧化损伤的适宜剂量。与SC组相比,CB+SC组细胞中p38 MAPK、Nrf2及其下游基因在12 h后的mRNA相对表达量均极显著升高(P<0.01)。与对照组相比,siRNA沉默Nrf2基因后,siRNA组培养上清液GPX活性以及细胞中抗氧化酶基因的mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05);与siRNA+SC组相比,NC+CB+SC组和siRNA+CB+SC组细胞中抗氧化酶基因的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。p38 MAPK被抑制后,与p38+SC组相比,p38+CB+SC组培养上清液GPX活性以及细胞中抗氧化酶基因的mRNA相对表达量均显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。综上所述,CB通过激活p38 MAPK/Nrf2信号通路抗氧化相关基因的表达,缓解SC造成的IPECJ2细胞氧化损伤。
- 尚智援窦彩霞王克玮刘雪姣李海花乔家运
- 关键词:丁酸梭菌猪霍乱沙门氏菌
- 抑制猪霍乱沙门氏菌的乳酸菌的分离、鉴定及潜在抑菌物质分析被引量:7
- 2020年
- 猪霍乱沙门氏菌(Salmonella choleraesuis)是一种常见的食源性致病菌。为了预防和治疗该菌引起的疾病,饲养者在饲料中大量添加抗生素,致使猪肉存在严重的食品安全问题。从健康成年无量山乌骨鸡肠道内容物中筛选出具有抑菌作用的乳酸菌,测定其对猪霍乱沙门氏菌的抑菌效果,分析乳酸菌抑制猪霍乱沙门氏菌的有效成分,并对筛选的乳酸菌种进行了分子生物学鉴定。采用双层平板法对具有抑制猪霍乱沙门氏菌的乳酸菌进行筛选,采用牛津杯法对抑菌效果进行测定,并采用酶蛋白敏感性测定、热处理、有机酸处理等方法分析抑菌活性物质有效成分,采用16S rDNA分子标记对乳酸菌进行鉴定,并构建系统发育树。结果显示,从健康鸡肠道中筛选出18株乳酸菌,其中2株对猪霍乱沙门氏菌(Salmonella choleraesuis)、大肠埃希菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、肠炎沙门氏菌亚种(Salmonella enteritidis subspecies)、志贺氏菌(Shigella)、无乳链球菌(Streptococcus agatactiae)具有良好的抑菌效果;不同蛋白酶、pH处理对乳酸菌无细胞培养液抑菌效果均有不同程度的影响,但是经80℃处理的乳酸菌无细胞培养液,其抑菌效果未明显改变。经鉴定,2株乳酸菌分别为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。从健康成年无量山乌骨鸡肠道内容物中分离得到的植物乳杆菌菌株L2和短乳杆菌菌株L4对猪霍乱沙门氏菌等致病菌具有明显地抑制作用,推测其抑菌有效成分可能为小肽类及有机酸,这对减少抗生素使用,提高猪肉食品的品质与安全性具有一定价值。
- 李宏伟肖瑶张关令林连兵张棋麟
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- 两种基于脲酶介导的猪霍乱沙门氏菌和克罗诺杆菌高灵敏免疫分析方法
- 传统酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assays,ELISA)一般基于辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)或者碱性磷酸酶(Alkaline Pho...
- 高宝
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- 文献传递
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