搜索到344篇“ 电击转化“的相关文章
- 大肠杆菌DH5a菌株高效电击转化条件的优化
- 2023年
- 为探索大肠杆菌DH5a高效电击转化条件,通过对电击转化条件中细胞生长状态、DNA加入量、感受态细胞体积、电场强度、速冻和恢复时间等关键因素进行优化,筛选出大肠杆菌DH5a高效电击转化条件。结果表明:大肠杆菌在细胞生长状态OD_(600)值为0.6时制备感受态细胞,按每管50μL体积分装、-80℃乙醇速冻后,加入10 pg pUC 19质粒DNA,在20 kv·cm^(-1)电场强度、电容25μF、电阻200Ω条件下电击转化,转化后恢复培养60 min,转化效率达10~(10) cfu·μg^(-1) DNA以上水平,可满足基因文库构建、抗体库筛选等试验需求。
- 吕新刘兰英李玥仁
- 关键词：大肠杆菌电击转化
- 一种电击转化大肠杆菌的方法
- 本发明提供了一种电击转化大肠杆菌的方法，属于微生物DNA转化技术领域，本发明所述方法包括大肠杆菌感受态细胞制备和大肠杆菌感受态细胞的电击转化步骤，本发明所述方法针对电转化感受态细胞制备及电转化条件中的关键因素进行筛选优化...
- 吕新刘兰英李莹李玥仁
- 枯草芽孢杆菌菌株ZT4-2电击转化体系的建立
- 2022年
- 【目的】建立枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株ZT4-2的高效电击转化体系。【方法】带有荧光蛋白标记的穿梭质粒pGFP78,通过电击转化法将其转入枯草芽孢杆菌菌株ZT4-2。【结果】菌株培养阶段、感受态细胞浓度、感受态细胞量、质粒体积量、转化电压等条件的不同,会对电击转化效率造成影响。其中试验条件:制备感受态细胞的菌株培养阶段的OD_(600 nm)值=1.0,重悬菌体时每100mL起始菌液加入600μL的40%PEG6000;电击转化体系中,感受态细胞量200μL,质粒体积10μL,转化电压2.5kV。最高转化效率可达6823.67CFU/μg。【结论】建立了枯草芽孢杆菌菌株ZT4-2的电击转化体系,电击转化效率较高。
- 蔡露秦艳秋高坦坦王旭东任争光赵晓燕
- 关键词：电击转化聚乙二醇
- 一株野生型屎肠球菌ZK03及其电击转化方法和应用
- 一株野生型屎肠球菌ZK03及其电击转化方法和应用，属于微生物领域。该菌株已于2022年1月5日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为：GDMCCNo:62192。该菌株不含肠球菌毒力因子Asa1、cylA、efaA、e...
- 王玮谢改杰金鑫鑫张雪黄燕华曲庆
- 文献传递
- 生防假单胞菌FD6电击转化条件的优化被引量：3
- 2021年
- 不同细菌电击转化效率各异,为筛选防御假单胞菌(Pseudomonas protegens) FD6电击转化最佳条件,选取具卡那霉素抗性标记的质粒pBBR-rpoD,从电场强度、电击时间、质粒添加量、电击悬浮溶液和细菌生长阶段5个方面优化电击转化条件。结果表明:当细菌培养至D600 nm值1.4左右时,在电场强度为12 kV·cm^(-1)、电击时间为4 ms、质粒添加量为200 ng,并以1 mmol·L^(-1) HEPES作为电击悬浮溶液时转化效率最高,可达1.1×10^(5)转化子·μg^(-1)(DNA)。此外,HEPES浓度的改变并未对转化效率产生影响。这一研究建立了一套防御假单胞菌FD6的高效电击转化体系,为今后该菌株在分子水平上的遗传操作提供了重要参考。
- 王诚刘银银施伟凡温德宇张清霞
- 关键词：生防细菌电击转化
- 萱草花粉电击转化参数的选择
- 2021年
- 以萱草品种‘斯特拉’成熟花粉为材料,比较了不同电场强度和电击次数对花粉转化率的影响。结果显示:萱草花粉电击转化的最佳参数为1 kV·cm^(-1)、电击3次。
- 钟荣谭雨馨张铮尹冬梅刘翔秦巧平张志国倪迪安
- 关键词：萱草花粉电击转化
- 一种高效构建细胞文库的电击转化方法
- 本发明涉及一种高效构建细胞文库的电击转化方法，所述方法包括：构建sgRNA表达细胞；将Cas9mRNA加入到所述sgRNA表达细胞中，进行电击转化反应。与现有技术相比，本发明方法通过改变构建细胞文库的方法及技术路线，最终...
- 金鸣袁鹏飞刘娜苏美华
- 文献传递
- 一种电击转化暹罗芽孢杆菌的方法
- 本发明公开一种电击转化暹罗芽孢杆菌的方法，属于微生物基因工程技术领域。本发明对暹罗芽孢杆菌JFL15电击转化过程中感受态细胞的制备、质粒的浓度以及电击参数等因素进行了全面的优化，首次建立了一套简单、有效的暹罗芽孢杆菌遗传...
- 林俊芳林龙镇郭丽琼许本宏
- 乳酸乳球菌电击转化方法的优化被引量：2
- 2020年
- 乳酸菌NICE系统是食品级表达系统,本实验以该系统的表达载体pNZ8148和宿主菌NZ9000为研究对象,对电击转化方法进行了优化。结果表明,在培养基中加入2.5%甘氨酸,收集OD600值为0.3的细胞、用配方Ⅰ[(洗涤液Ⅰ:蔗糖0.5 mol·L-1+甘油10%;洗涤液Ⅱ:蔗糖0.5 mol·L-1+甘油10%+EDTA50 mmol·L-1)]洗涤细胞,再转入0.2μg质粒,利用2.5 kV电压和0.2 cm电击杯进行电击转化,恢复培养1.5 h后转化效率最高,达1.6×108 CFU·μg-1。本实验为乳酸乳球菌NZ9000的电击转化参数提供了数据参考,为基于乳酸菌NICE系统的深入研究奠定了基础。
- 刘亚欣王宇杨诺郭桂英李迁曾纪锋郑继平
- 关键词：乳酸乳球菌电击转化
- 一种电击转化暹罗芽孢杆菌的方法
- 本发明公开一种电击转化暹罗芽孢杆菌的方法，属于微生物基因工程技术领域。本发明对暹罗芽孢杆菌JFL15电击转化过程中感受态细胞的制备、质粒的浓度以及电击参数等因素进行了全面的优化，首次建立了一套简单、有效的暹罗芽孢杆菌遗传...
- 林俊芳林龙镇郭丽琼许本宏
- 文献传递
相关作者
- 杨倩
- 作品数：279被引量：778H指数：15
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- 研究主题：黏膜免疫 鼻腔免疫 小肠 呼吸道 电击转化
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- 作品数：180被引量：153H指数：8
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- 研究主题：益生菌 微生物 减毒鼠伤寒沙门氏菌 面膜 阴道菌群
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- 作品数：17被引量：11H指数：3
- 供职机构：南京农业大学
- 研究主题：电击转化 猪传染性胃肠炎病毒 口服免疫 特异性免疫应答 树突状细胞
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- 作品数：69被引量：58H指数：4
- 供职机构：南昌大学
- 研究主题：水稻 TIG焊 益生菌 ATCC 减毒鼠伤寒沙门氏菌
- 牟春晓
- 作品数：8被引量：4H指数：1
- 供职机构：南京农业大学
- 研究主题：口服免疫 电击转化 特异性免疫应答 猪传染性胃肠炎病毒 TGEV
