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siRNA沉默NLK基因促进神经化组织工程骨再生: 2025年; 目的:探讨沉默及过表达Nemo样激酶(Nemo-like kinase,NLK)基因对人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hBMSCs)神经向分化的作用,并探究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默NLK基因表达对促进神经化组织工程骨再生的影响。方法:在hBMSCs中分别转染siRNA沉默NLK基因(实验组转染沉默NLK基因的siRNA,对照组转染对照siRNA并记为阴性对照组)或慢病毒过表达NLK基因(实验组感染过表达NLK基因的慢病毒,对照组感染空载体慢病毒并记为空载体组),之后通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)、蛋白质印迹实验(Western blot)、免疫荧光实验检测敲低、过表达NLK基因对hBMSCs神经向分化的影响。采用6周龄雄性BALB/C nu/nu裸鼠构建皮下异位成骨模型,分为以下4组:①β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)组,②β-TCP+hBMSCs成骨诱导组,③β-TCP+siRNA-阴性对照(negative control,NC)转染的hBMSCs成骨诱导组,④β-TCP+siRNA-NLK转染的hBMSCs成骨诱导组。术后4周获取标本,通过组织形态学染色检测裸鼠体内成骨成神经情况,使用独立样本t检验进行统计学分析。结果:siRNA沉默hBMSCs的NLK基因后,神经相关基因βⅢ微管蛋白(classⅢβ-tubulin,TUBB3)、微管相关蛋白2(microtubule association protein-2,MAP2)、可溶性蛋白-100(soluble protein-100,S100)、巢蛋白(nestin,NES)、NG2蛋白聚糖(NG2 proteoglycan,NG2)及降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)表达较阴性对照组显著升高(P<0.05),TUBB3、MAP2等蛋白表达也升高。慢病毒过表达NLK基因后,与空载体组相比,神经相关基因TUBB3、MAP2、S100及NG2表达水平均显著下降(P<0.05),TUBB3蛋白表达降低。构建裸鼠皮下异位成骨模型术后4周发现β-TCP+siRNA-NLK转染的hBMSCs成骨诱导组较其他3组形成更多矿化组织,并且成骨相关标记物BMP2及成神经相关标记物S100显著高表达。结论:siRNA�; 李梦迪雷蕾刘中宁李健姜婷; 关键词：小干扰RNA 骨组织工程

一种猪松质骨作为组织工程骨的制备方法: 本发明涉及一种猪松质骨作为组织工程骨的制备方法，具体包括以下步骤：准备猪松质骨支架制备的材料与试剂；将猪骨用35℃‑42℃的生理盐水浸泡，洗净表面，剔除软组织、骨膜和密质骨，然后使用35℃‑42℃的盐水对骨骼进行冲洗；将...; 翦新春雷荣昌翦羽

基于水凝胶材料构建的组织工程骨及其制备方法与应用: 本发明涉及基于水凝胶材料构建的组织工程骨及其制备方法与应用。将成骨分化潜力的细胞包裹于具有成骨诱导活性的水凝胶材料，并通过一定的培养方式培养一段时间，即可获得成熟的组织工程骨。与现有技术相比，本发明提供的组织工程骨的构建...; 华宇杰周广东白宝帅郝俊祥

一种具有不同刚度的三层组织工程骨软骨支架及其制备方法和应用: 本发明涉及一种具有不同刚度的三层组织工程骨软骨支架及其制备方法和应用，属于软骨组织修复和组织工程技术领域。本发明公开的支架，上到下依次为明胶‑透明质酸水凝胶层、完全脱钙骨层和部分脱钙骨层。因此本申请的支架中每一层都具有不...; 邹杨段雨鑫吕永钢

骨微环境对组织工程骨再生过程的影响被引量：5: 2024年; 背景:骨组织缺损是目前骨科最为常见的疾病之一,并且该疾病现行的治疗手段均存在一定的不足。组织工程的发展为骨缺损修复带来了新的希望,通过调控缺损部位生物活性物质的释放和血管化、神经化的进程可以有效改善骨组织微环境并促进骨整合,是大尺寸骨缺损修复最具发展潜力的研究思路。目的:从生物活性物质、血管再生和神经化对骨微环境变化3个方面的影响,探讨近年来调控骨微环境变化在骨缺损修复中的研究进展,为治疗大尺寸骨缺损提供新的思路和策略。方法:在中国知网和万方数据库分别以“骨组织工程,血管生成,神经化,细胞因子,骨形态发生蛋白,血管内皮生长因子,神经肽,骨微环境”为检索词;在Web of Science,Science Direct,PubMed数据库分别以“bone tissue engineering,angiogenesis,neurotization,cytokines,bone morphogenetic protein,vascular endothelial growth factor,neuropeptide,bone microenvironment”为检索词,检索2001-01-01/2022-12-31收录的有关骨微环境变化的影响因素及在骨组织工程中的应用研究,最终纳入109篇文献进行综述分析。结果与结论:①骨微环境是诱导骨组织干细胞生长分化的重要保障,其主要包括骨组织种子的细胞外基质及细胞间的相互作用所需要的生物化学因子、局部血液循环网络和周围的神经组织。②骨缺损修复是一个分为多个阶段的连续过程,这些阶段相互重叠,由多种细胞因子介导,同一种细胞因子在一个或多个愈合阶段可以产生相互协同或拮抗的作用。③新生血管再生是启动骨修复的关键,新生血管不仅为骨修复提供了必需的营养物质、成骨细胞和生长因子,同时更是修复细胞进入损伤区的通道。④除了调控血管诱导因子的释放种类、剂量及时效性等因素以实现血运重建外,多因子差异性释放递送系统的研究和基因转移技术的应用将是未来解决大�; 钟思扬廖晴周星宇李先楹卫晶晶杨琳; 关键词：骨组织工程神经化骨形态发生蛋白神经肽

组织工程骨移植物的血管化策略研究: 2024年; 利用骨组织工程修复大段骨缺损是一种富有前景的方法。骨骼是动态的高度血管化组织,在适当时间内形成血管组织是保证骨移植物存活、修复、重塑的关键,也是骨组织工程的主要挑战之一。本文将从血管化的意义,以及基于种子细胞、促血管生成因子、支架结构、免疫调控、体外预血管化等策略来综述组织工程骨移植物血管化的研究进展。; 张一帆张郭汪振星孙家明; 关键词：大段骨缺损移植物血管化骨修复

BSA改性DBM组织工程骨对大鼠颅骨缺损修复作用的研究: 目的：　　由外伤、肿瘤、先天性疾病等因素导致的口腔及颌面部骨缺损，其伴随的生理畸形和功能缺陷严重困扰患者的生活质量。如何实现精准高效地恢复缺损区域的生理功能和外表形貌，对于口腔及颌面部骨缺损意义重大。脱钙骨基质（demi...; 任纪巍; 关键词：骨组织工程支架脱钙骨基质

组织工程骨血管化的构建方法及研究进展: 2024年; 组织工程骨技术以种子细胞、细胞因子和载体支架为基础, 为解决大段骨缺损提供了有效的策略, 在骨缺损修复领域展现出极强的应用潜力。但该技术目前仍面临诸多挑战, 本文重点探讨组织工程骨中的血管化问题, 综述了促进组织工程骨血管化的几种方法, 包括多细胞共培养、生成因子的应用、先进的3D打印技术和外科手术的辅助作用。本文还分析了这些方法的最新研究进展及其局限性, 推测了组织工程骨的未来研究方向。; 王玉垒黎景源邵能琪徐文豪冯凡哲蔡芝军余忠政何晓清徐永清崔轶; 关键词：骨生成血管化骨缺损

基于多孔水凝胶材料构建的血管化组织工程骨及其应用: 本发明涉及一种基于多孔水凝胶材料构建的血管化组织工程骨及其应用。首先将水溶性高分子溶于生物相容性介质，通过一定的制备技术，经一定的交联方式，制备多孔水凝胶材料。然后将成骨细胞或干细胞包裹于多孔水凝胶支架材料，经体外诱导分...; 周广东华宇杰吴晓娣郝俊祥白宝帅

三维打印羟基磷灰石/二氧化锆支架复合诱导多能干细胞来源间充质干细胞构建新型组织工程骨的实验研究: 2024年; 目的:运用3D打印技术制备羟基磷灰石/二氧化锆(HA/ZrO_(2))支架,复合诱导性多能干细胞(iPSC)来源的间充质干细胞(MSC)构建新型组织工程骨,观察其修复犬股骨干骨缺损的能力。方法:运用CT扫描数据结合3D打印技术构建犬股骨干缺损部位HA/ZrO_(2)支架,电镜及力学试验分析支架生物力学性能。诱导性多能干细胞通过诱导分化为间充质干细胞形态细胞,构建支架材料与诱导性多能干细胞来源的间充质干细胞体外共培养体系,行细胞毒性等级测定,电镜观察细胞在支架上黏附、生长情况。12只比格犬根据植入材料的不同随机分为3组,每组4只。A组截取犬股骨中段25 mm后空置,B组截骨后植入HA/ZrO_(2)支架,C组截骨后植入复合诱导性多能干细胞来源的间充质干细胞的HA/ZrO_(2)支架。术后X线、CT、力学试验分别观察新生骨长入情况、骨结合能力及力学性能。结果:通过CT扫描精准数据转化为3D打印数据,个体化制备HA/ZrO_(2)复合支架,支架抗压强度为(48.94±0.65)MPa;免疫荧光检测示诱导性多能干细胞来源的间充质干细胞表达Vimentin,不表达OCT4和Nestin;支架材料与诱导性多能干细胞来源的间充质干细胞体外共培养细胞毒性等级为0级;扫描电子显微镜可见梭形的诱导性多能干细胞来源的间充质干细胞在HA/ZrO_(2)支架表面黏附、生长。动物实验术后X线影像学观察显示A组骨缺损断端吸收,骨不愈合;B组和C组支架与宿主骨结合牢固,支架内新生骨填充,有连续性骨痂通过。术后12周CT检测示B组单位体积骨量为(219.45±3.15)mm^(3)/cm^(3),C组为(222.99±5.97)mm^(3)/cm^(3),两组差异无统计学意义(P>0.05)。术后12周抗压试验显示B组抗压强度为(52.21±2.41)MPa,C组抗压强度为(52.51±1.35)MPa,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3D打印制备的HA/ZrO_(2)支架符合临床个体化治疗原则,具备较强生物力学性能及良好生物相容性,�; 王拓黄小龙吴奕江杜伟斌韩雷汪灿锋全仁夫; 关键词：诱导多能干细胞骨组织工程

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