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拉萨某地犬细粒棘球绦虫的分离鉴定及驱虫效果评价: 2025年; 为鉴定拉萨某地犬细粒棘球绦虫的虫种或基因型,了解新型研制的犬细粒棘球绦虫驱虫药物——吡喹酮饼干和牛肉味吡喹酮咀嚼片的驱虫效果,选取拉萨市墨竹工卡县271只家犬,采用PCR方法检测驱虫前后犬只的粪便样本,对所得PCR阳性产物进行测序、BLAST比对及进化树构建,从而确定细粒棘球绦虫的虫种或基因型,并评价吡喹酮咀嚼片和吡喹酮饼干的驱虫效果。结果表明,从试验犬中检出的细粒棘球绦虫基因型均为G5型(奥氏棘球绦虫);吡喹酮饼干和吡喹酮咀嚼片两种驱虫药对犬细粒棘球绦虫的驱虫效果良好,投药后阳性率显著低于投药前;第二次投喂后,吡喹酮饼干组的驱虫效果不稳定,阳性率不降反升,吡喹酮咀嚼片组的驱虫效果较好,阳性率持续降低。; 冯青郝力力索朗晋美郝世钊袁东波杨涛; 关键词：家犬细粒棘球绦虫吡喹酮驱虫 PCR检测

细粒棘球绦虫EgBAL蛋白的生物信息学分析及原核表达: 2025年; [目的]探究细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)胆盐活化脂肪酶(EgBAL)的生物信息学特征并进行原核表达,检测EgBAL重组蛋白的免疫原性,为囊性棘球蚴病疫苗抗原筛选提供理论依据。[方法]从NCBI数据库获取细粒棘球绦虫EgBAL基因序列(GenBank登录号:HM748917),设计特异性引物,以细粒棘球绦虫原头蚴cDNA为模板,通过PCR扩增并克隆EgBAL基因。使用Mega 7.0软件,通过邻接法(NJ)构建系统进化树,运用生物信息学软件对EgBAL蛋白理化性质和结构特征进行预测分析。构建含EgBAL基因重组pET-22b质粒,并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞诱导表达EgBAL重组蛋白,通过SDS-PAGE检测蛋白表达情况,并进行纯化。利用Western blotting分析重组蛋白的免疫原性。[结果]细粒棘球绦虫EgBAL基因片段大小为1 020 bp。系统进化树显示,EgBAL蛋白与中华树鼩EgBAL蛋白处于同一分支,进化距离较近,相似性高达99.60%。生物信息学分析显示,EgBAL基因全长1 014 bp,编码337个氨基酸,EgBAL蛋白分子质量为37 089.59 u,理论等电点为4.77,不稳定指数为44.72,为不稳定蛋白,脂肪系数为66.11,亲水性为-0.429,为亲水性蛋白,无跨膜区域及信号肽。EgBAL蛋白具有14个潜在B细胞抗原表位,二级结构包括α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲,分别占27.90%、12.76%、12.76%和56.08%。此外,EgBAL蛋白含有35个磷酸化位点,其中包括12个丝氨酸磷酸化位点、16个苏氨酸磷酸化位点和7个酪氨酸磷酸化位点。本研究成功构建重组pET-22b-EgBAL质粒,诱导表达得到EgBAL重组蛋白大小约38 ku。Western blotting结果显示,该重组蛋白可被细粒棘球绦虫感染的昆明小鼠和犬的阳性血清识别,具有良好的免疫原性。[结论]本研究成功克隆了细粒棘球绦虫EgBAL基因、表达了EgBAL重组蛋白,并初步证实重组EgBAL蛋白具有较好的免疫原性,提示其有作为囊型棘球蚴病疫苗或诊断候选抗原的潜力,�; 赵文卿薄新文薄新文张玉霞陈旭珂张艳艳张艳艳孙艳齐萌; 关键词：细粒棘球绦虫生物信息学分析原核表达

一种抗细粒棘球绦虫的EgMDH DNA疫苗及制备方法和应用: 本发明公开了一种抗细粒棘球绦虫的EgMDH DNA疫苗及制备方法和应用，属于免疫学领域。所述DNA疫苗包括重组质粒PVAX1‑EgMDH和佐剂。所述DNA疫苗为所述重组质粒PVAX1‑EgMDH与所述佐剂按照质量体积比为...; 王正荣薄新文赵文卿齐萌张艳艳孙艳

细粒棘球绦虫EgM123表面展示型酿酒酵母菌株的构建及免疫原性初步评价: 2025年; 旨在构建并制备细粒棘球绦虫EBY100/pYD1-EgM123表面展示型酿酒酵母口服活载体菌株,并初步评价其免疫效果,以期为细粒棘球绦虫终末宿主酿酒酵母活载体口服疫苗的研发提供理论基础。克隆细粒棘球绦虫EgM123基因,构建EBY100/pYD1-EgM123表面展示型酿酒酵母菌株。诱导培养表面展示型酿酒酵母EBY100/pYD1-EgM123,并进行体外分析,通过免疫荧光分析以及BCA蛋白定量法对EgM123蛋白进行定位鉴定及定量分析。诱导表达表面展示型酿酒酵母EBY100/pYD1-EgM123菌株并免疫BALB/c小鼠。通过检测小鼠血清中抗体及细胞因子水平变化评价细粒棘球绦虫EgM123口服酵母活载体菌株的免疫效果。结果成功克隆了细粒棘球绦虫EgM123的ORF序列,长度为594 bp。PCR检测以及酶切鉴定结果表明,成功构建EBY100/pYD1-EgM123表面展示型酿酒酵母菌株。免疫荧光结果显示,EBY100/pYD1-EgM123表面具有绿色荧光,BCA蛋白定量法测定50 OD_(600 nm)EBY100/pYD1-EgM123诱导72 h后蛋白的表达量为15.59μg,浓度为0.31μg/OD_(600 nm)。抗体水平检测结果表明,EBY100/pYD1-EgM123免疫组特异IgG、IgA、IgM抗体的分泌均高于PBS组、EBY100组及EBY100/pYD1组(P<0.05)。细胞因子检测发现,EBY100/pYD1-EgM123免疫组对小鼠细胞因子IL-17、IFN-γ的分泌量显著加强(P<0.001)。综上所述,通过对细粒棘球绦虫EBY100/pYD1-EgM123表面展示型酿酒酵母口服活载体菌株免疫效果的初步评价,发现该口服活载体菌株具有免疫原性,可以刺激小鼠产生特异性免疫应答,进一步说明其具有成为终末宿主抗囊型包虫候选疫苗的潜力。; 贾新月马静普娜赵文卿陈旭珂张艳艳孙艳薄新文王正荣; 关键词：细粒棘球绦虫口服疫苗

一种RAA-LFD检测细粒棘球绦虫终末宿主粪便中细粒棘球绦虫虫卵的方法及其引物探针组合物: 本发明公开了一种RAA‑LFD检测细粒棘球绦虫终末宿主粪便中细粒棘球绦虫虫卵的方法及其引物探针组合物。一种用于RAA‑LFD检测细粒棘球绦虫虫卵的引物探针组合物，上游引物如SEQ ID NO.4所示，下游引物如SEQ I...; 严若峰李祥瑞阿木吉拉塔宋小凯陆明敏徐立新张思雨

犬细粒棘球绦虫的驱虫试验: 2024年; 为了进一步做好包虫病防控工作,开展了犬细粒棘球虫驱虫试验,以观察吡喹酮片对犬细粒棘球绦虫的驱除效果。选择当地土种犬作为试验犬,分为试验组和对照组,按5 mg/kg剂量分别直接投喂试验药品和对照药品,连续进行三次投药,试验投药前后对犬粪便分别采取犬细粒棘球绦虫抗原检测;同时在犬投药前后,分别采取羊粪便进行细粒棘球绦虫抗原检测。试验组和对照组的驱虫效果均为100%,但对照组犬的主动吞食率较低为0.38%,而试验组犬主动吞食率达到89.22%;在犬驱虫试验区域,羊只的细粒棘球绦虫感染率也大幅度下降,其中试验组感染率下降到了10%;对照组下降到23.33%。试验药品中加入天然成分掩盖吡喹酮的苦味,使犬的主动吞食率增高,且该药品相对松软有助于分割使用。因此该试验药品是比较理想的抗寄生虫药物,用于驱除犬细粒棘球绦虫效果较好,推荐剂量为5 mg/kg。; 孙栎张金宝高悦; 关键词：细粒棘球绦虫驱虫试验

细粒棘球绦虫CRISPR/Cas12a检测方法的建立: 囊型棘球蚴病(cystic echinococcosis,CE)是由带科棘球属的细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)幼虫寄生于肝脏等部位所引起的慢性寄生虫疾病,又称囊型包虫病。其在全球范围内广泛...; 李鑫; 关键词：细粒棘球绦虫 CRISPR 核酸检测串联重复序列

犬细粒棘球绦虫抗原ELISA检测方法的建立被引量：1: 2024年; 旨在建立敏感特异的犬细粒棘球绦虫(Eg)抗原ELISA检测方法。用细粒棘球绦虫表膜抗原(EgSfAg)免疫兔获得抗血清,同时利用抗EgSfAg杂交瘤细胞株4E8制备单抗,通过亲和层析获得纯化的多抗和单抗4E8,制备Eg、多房棘球绦虫、泡状带绦虫、多头绦虫和犬弓首蛔虫等5种蠕虫抗原作为特异性质控样品,利用单抗4E8进行Western blot检测,通过人工感染犬结合氢溴酸槟榔碱下泄法制备阳性对照样品,同时设置敏感性质控样品和阴性对照样品,构建样品盘,以多抗为捕捉抗体,HRP标记的单抗4E8为检测抗体,建立犬Eg抗原ELISA检测方法,并验证该方法的敏感性和特异性。结果:Western blot检测证明单抗4E8仅与EgSfAg有特异性反应;建立的ELISA检测方法最低检出量为1∶512;对130份阳性样品的平均检出率为95.38%;交叉试验结果显示仅EgSfAg结果为阳性;检测150份阴性样品的平均符合率为95.56%。综上,建立的ELISA方法具有较好敏感性和特异性,为终末宿主棘球蚴病的诊断和流行病学调查提供了一种安全、简便、高效的免疫学检测方法。; 班万里徐晶刘帅卡马力·吾力江潘星羽王冰洁王延塔力甫汗·古丽扎提特列吾汗·穆尼拉赵莉张壮志; 关键词：细粒棘球绦虫抗原单克隆抗体 ELISA

细粒棘球绦虫PCNA蛋白生物信息学分析及验证: 2024年; 【目的】分析细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus sensu lato,Eg)增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白的生物信息学特性,以及去氢骆驼蓬碱(HM)及其衍生物(H-2-168与H-2-104)对EgPCNA蛋白含量的影响,以期治疗囊型棘球蚴病并为药物靶点的筛选奠定基础。【方法】运用PCR扩增并克隆EgPCNA基因全长序列,采用生物信息学软件预测和分析EgPCNA蛋白相关生物学信息。利用Mega 7.0构建蛋白序列系统发育树,并运用Western blotting分析HM及其衍生物(H-2-168与H-2-104)对EgPCNA蛋白含量的影响。【结果】EgPCNA基因全长783 bp,编码260个氨基酸,EgPCNA蛋白分子质量为28.36435 ku,等电点为4.62,脂肪指数为96.81,亲水性值为-0.015,为亲水性蛋白,无跨膜结构域。亚细胞定位预测结果显示,蛋白分布于细胞质。该蛋白含有PCNA超家族结构与PCNA保守功能结构域,二级结构主要为无规则卷曲,其次是α-螺旋,有2条可靠的B细胞抗原表位,与人和家鼠等哺乳动物的亲缘关系较远。Western blotting分析结果显示,与DMSO组相比,HM组EgPCNA蛋白表达量极显著上调(P<0.01),H-2-168与H-2-104组EgPCNA蛋白表达量均显著下调(P<0.05)。【结论】本研究成功克隆了EgPCNA全长基因。EgPCNA蛋白对细粒棘球绦虫的DNA复制和修复具有调控作用,H-2-168与H-2-104具有下调EgPCNA蛋白含量的功能。; 许少全麦尔哈巴·麦麦提艾力吕国栋周润赵金龙李婧夏衣旦木·吐尼牙孜赵军; 关键词：细粒棘球绦虫增殖细胞核抗原克隆生物信息学

原头蚴小囊泡介导的细粒棘球绦虫肝脏寄生机制研究: 囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis,CE)是细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,EG)感染所引发的人畜共患病,隶属于我国二类动物疫病和丙类传染病。肝脏为EG中绦期幼虫最主要...; 华瑞其; 关键词：细粒棘球绦虫

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