目的评估2012—2022年陕西省脊髓灰质炎(简称“脊灰”)实验室所用细胞系对脊灰病毒细胞敏感性(cell sensitivity,CS)的监测,为保持无脊灰状态提供质量保证。方法选择陕西省脊灰实验室2005年制备的实验室质量控制(laboratory quality control,LQC)标准Sabin株Ⅰ﹑Ⅱ﹑Ⅲ型,以及国家脊灰实验室(National Polio Laboratory,NPL)提供的转人脊灰病毒受体的小鼠肺细胞(mouse L cells expressing the human Poliovirus receptor,L20B)系、人横纹肌肉瘤(human rhabdomyosarcoma,RD)细胞,采用96孔微量培养板滴定法测定陕西省疾病预防控制中心脊灰实验室2012—2022年所用细胞系对脊灰病毒敏感性,使用Karber公式计算病毒滴度,并对检测结果进行分析描述。结果RD细胞均数±标准差:Ⅰ型(7.57±0.19),Ⅱ型(7.55±0.11),Ⅲ型(7.78±0.17);L20B均数±标准差:Ⅰ型(6.80±0.25),Ⅱ型(6.83±0.25),Ⅲ型(6.74±0.23)。与陕西省疾病预防控制中心脊灰实验室的LQC株的参考值相比其滴度均在±0.5log 10CCID_(50)/0.1ml以内波动。结论2012—2022年陕西省脊灰实验室所用细胞系对脊灰病毒敏感性较好,敏感性未下降,为陕西省维持无脊灰状态提供了坚强的保障。
目的评价2015—2020年黑龙江省脊髓灰质炎(以下简称脊灰)实验室细胞系质量控制情况。方法采用巢氏聚合酶链式反应(PCR)方法对细胞支原体进行检测,采用96孔微量板病毒滴定法对脊灰病毒的敏感性进行检测,并对检测结果进行分析。结果黑龙江省脊灰实验室在2015—2020年使用的细胞系支原体检测均为阴性,3个型别的脊灰病毒敏感性分别为:Sabin 1在人横纹肌肉瘤细胞系(rhabdomyosarcoma,RD)细胞上滴度为108.23±0.23,在表达人脊灰病毒的小鼠肺细胞系(Mouse Lung Cells that Express Receptors for HumanPolioviruses,L20B)细胞上滴度为10^(6.97±0.37);SabinⅡ在RD细胞上滴度为10^(8.27±0.47),在L20B细胞上滴度为10^(6.92±0.17);SabinⅢ在RD细胞上滴度为10^(8.10±0.40),在L20B细胞上滴度为10^(6.60±0.40),均在有效范围内波动。结论2015—2020年,黑龙江省脊灰实验室细胞质量状况良好,未出现细胞支原体污染,并且RD细胞、L20B细胞对脊灰病毒及肠道病毒的敏感性均在正常范围内波动。支原体检测和细胞敏感性监测作为质量控制的重要指标,保证了实验室检测脊灰病毒的敏感性。
目的观察N-α乙酰基转移酶(Naa10)表达对顺铂(DDP)抑制人食管鳞癌ECA109细胞敏感性的影响。方法利用小干扰RNA(siRNA)构建低表达Naa10的人食管鳞癌ECA109细胞株,实验分为ECA109-siRNA-Naa10组、ECA109-siRNA-NC组(转染无效干扰片段),并设立空白ECA109细胞为ECA109-空白组。通过荧光显微镜及Western印迹法鉴定干扰效率,使用CCK-8法检测各处理组细胞经过药物处理后对DDP的敏感性。结果成功构建低表达Naa10的人食管鳞癌ECA109细胞株;3组转染后48 h及72 h Naa10表达及半数抑制浓度(IC50)差异均有统计学意义(P<0.05)。结论下调Naa10表达可增强人食管鳞癌ECA109细胞对DDP的敏感性。
