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构建兔软骨脱落细胞三维支架及与干细胞相容性评价的实验研究
2024年
目的制备不同浓度的兔软骨脱落细胞支架,并评估其理化性能和干细胞相容性,为软骨修复提供实验依据。方法Percoll密度分离法培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并进行流式细胞学鉴定和成骨、成软骨分化能力检测。从兔膝、股关节中切取软骨片,进行物理粉碎、反复冻融以及各种酶混合消化脱细胞。为比较并观察不同浓度脱细胞支架的理化性能差异,设计3组支架,浓度分别为100%(A组)、50%(B组)、30%(C组),每组3只。将第3代PKH26示踪的BMSCs接种于最适浓度支架上培养1周,观察细胞生长情况。结果流式技术检测BMSCs表面抗原,CD44、CD90呈阳性表达,CD45阴性表达;成骨诱导茜素红染色可见红色钙结节;软骨诱导阿利新蓝染色见软骨结节呈蓝色;3组支架经苏木素-伊红(HE)、甲苯胺蓝染色后未观察到明显细胞形态。样本脱细胞后的DNA浓度与未脱支架的指标均值差异具有显著性(P<0.05)。糖胺聚糖含量较正常值稍偏低。3组支架两两比较孔径、吸水膨胀率、孔隙率、支架断裂强度、杨氏模量差异具有显著性(P<0.05);干细胞与支架共培养后细胞附着良好。结论Percoll密度分离法可获取高纯度的兔BMSCs;应用混合脱细胞方法脱细胞较彻底。B组支架可作为构建组织工程软骨修复的最适方案。体外培养的BMSCs在B组支架生长良好。
徐菊菊谢燕燕郭志义马雨凯王霖虹杨美荣邓昭玲华宝来闫振宇
关键词:骨髓间充质干细胞共培养
抗菌透明细胞相容性良好的水凝胶创面敷料制备研究
2024年
以黄原胶、丙烯酰胺、过硫酸铵等为主要材料,采用一锅法制备了水凝胶XG/PAM/AE.研究结果表明,该水凝胶具有145.6 kPa的最大断裂应力,450~700 nm波长的透光率为80%且具有短期抑制S.aureus生长的能力,细胞活力大于96.7%,细胞相容性优异.
王琴马力群曹婕杨智明李玉琴梁修毓
关键词:水凝胶细胞相容性伤口敷料
可控释氧兼具细胞相容性的水凝胶及其制备方法和应用
本发明公开了一种可控释氧兼具细胞相容性的水凝胶及其制备方法和应用,涉及生物特种新材料研究技术领域。所述水凝胶由微藻水凝胶前驱体与CaCl<Sub>2</Sub>溶液交联而得,所述微藻水凝胶前驱体由灭菌后的海藻酸钠溶液与小...
魏桂花李熙李仔奇王浩俨代月娥吴雅婷黄梦琪王惠芫
静电纺丝聚偏氟乙烯压电仿生骨膜的细胞相容性被引量:1
2024年
背景:聚偏氟乙烯具有压电性能、良好的生物相容性和无毒性,使其成为骨膜修复合适的候选材料。目的:评价掺锌镁离子静电纺丝聚偏氟乙烯压电仿生骨膜的体外细胞毒性。方法:采用静电纺丝技术分别制备纯聚偏氟乙烯、掺锌离子聚偏氟乙烯、掺镁离子聚偏氟乙烯、掺锌镁离子聚偏氟乙烯压电仿生骨膜,依次命名为PVDF、PVDF-Zn、PVDF-Mg和PVDF-Zn-Mg,其中锌、镁离子的质量分数均为1%。将成骨细胞、血管内皮细胞分别与4组仿生骨膜共培养,通过碱性磷酸酶染色、CD31免疫荧光染色、扫描电镜观察与CCK-8法检测仿生骨膜的细胞相容性。结果与结论:①成骨细胞:培养7 d的碱性磷酸酶染色显示,PVDF-Zn组碱性磷酸酶分泌多于其他3组。扫描电镜下可见,培养1 d时,细胞在PVDF-Mg和PVDF-Zn-Mg仿生骨膜表面得到了一定的铺展,伪足向四周伸展;到3 d时,各组细胞边缘向材料伸出伪足;到第5,7天时,细胞铺展充分、生长形态良好且牢牢地覆盖在纤维表面,细胞伪足向四周及纤维空隙中伸展。CCK-8检测显示,随着时间的推移,各组仿生骨膜上的细胞增殖呈上升趋势,培养1,3,5,7 d的细胞相对增殖率均≥75%,细胞毒性≤1级。②血管内皮细胞:培养3 d的CD31免疫荧光染色显示,细胞在各组仿生骨膜上良好地黏附和铺展,彼此连接,其中PVDF-Zn-Mg组细胞数量多于其他3组。扫描电镜下可见,培养1,3 d时,细胞开始黏附在各组纤维表面;到5 d时,细胞在纤维表面均铺展良好并伸出明显的伪足;到7 d时,PVDF-Mg、PVDF-Zn-Mg仿生骨膜上的细胞呈复层生长,并伸展伪足至纤维空隙内。CCK-8检测显示,随着时间推移,各组仿生骨膜上的细胞增殖呈下降趋势,培养1,3,5,7 d的细胞相对增殖率均≥125%,细胞毒性为0级。③结果表明:掺锌镁离子静电纺丝聚偏氟乙烯压电仿生骨膜具有良好的细胞相容性
魏岁艳曹怡静赵帅李冬瑶魏琴许燕徐国强
关键词:静电纺丝聚偏氟乙烯骨缺损细胞相容性骨组织工程
纳米晶仿生钙磷颗粒的理化性质及细胞相容性
2024年
背景:临床上人工合成的羟基磷灰石陶瓷颗粒被广泛用于修复大体积骨缺损,但制备过程中的高温烧结会降低羟基磷灰石陶瓷颗粒的可降解性和生物活性,限制其骨修复效果。目的:采用新型低温沉积技术制备纳米晶仿生钙磷颗粒,表征其理化性能与细胞相容性。方法:采用改良后的过饱和钙磷矿化液和重复静置重悬洗涤方式制备纳米晶仿生钙磷颗粒,以羟基磷灰石生物陶瓷颗粒为对照,通过扫描电镜、X射线衍射仪、傅里叶变换红外光谱仪表征两种颗粒的形貌和物相组成,通过BET-N2法、硬度和接触角测试表征两种颗粒的比表面积、孔隙度分布、硬度和亲水性行为,利用BCA法检测两种颗粒对牛血清白蛋白和胎牛血清蛋白的吸附性能。将两种颗粒或颗粒浸提液分别与人脐带间充质干细胞共培养,采用MTT法检测细胞增殖。结果与结论:①扫描电镜显示两种颗粒表面略微粗糙并伴有微小颗粒存在,羟基磷灰石生物陶瓷颗粒表面致密光滑,纳米晶仿生钙磷颗粒主要由不均匀纳米尺寸的针/板状晶体组成,并在晶体之间形成纳米孔结构。X射线衍射、傅里叶变换红外光谱显示,相较于羟基磷灰石生物陶瓷颗粒,纳米晶仿生钙磷颗粒的结晶粒小、结晶度低,含有更多的结合水和碳酸根基团。与羟基磷灰石生物陶瓷颗粒相比,纳米晶仿生钙磷颗粒具有更高的比表面积、更好的亲水性、更低的硬度与更高的蛋白吸附能力。②MTT检测结果显示,两种颗粒浸提液基本无细胞毒性,人脐带间充质干细胞在两种颗粒表面存活良好,并且纳米晶仿生钙磷颗粒表面的细胞增殖活性更强。③结果表明与羟基磷灰石生物陶瓷颗粒相比,纳米晶仿生钙磷颗粒具有更好的理化性能与细胞相容性
陈明学牛建华林海燕吴刚万奔
钛表面氧化石墨烯涂层的抗菌性和细胞相容性研究
2024年
目的:探讨钛表面氧化石墨烯涂层的抗菌性和细胞相容性。方法:将氧化石墨烯水分散液作为电解液,在浓度分别为20、60、100、140μg/mL的条件下,通过电泳沉积在钛表面构建氧化石墨烯涂层,作为实验组,钛片作为对照组;采用激光拉曼光谱对涂层进行表征,利用多功能纳米力学测试仪对涂层的杨氏模量、维氏硬度和摩擦力进行分析;通过对变形链球菌和牙龈卟啉单胞菌的抗菌率检测来评价涂层的抗菌性能;采用CCK-8法评价涂层对人牙龈成纤维细胞细胞增殖的影响。结果:经电泳沉积后的钛片表面形成一层均匀的棕黄色薄膜,且颜色随浓度增加而加深;拉曼光谱显示各实验组均检测到氧化石墨烯的特征峰;各组试件的杨氏模量和维氏硬度均表现为对照组最高,实验组数值随氧化石墨烯浓度增高而增高,但不具有统计学差异;划痕曲线表明,G140组最先出现转折点,G100组最后出现转折点;各组试件对变形链球菌和牙龈卟啉单胞菌的抗菌率均随氧化石墨烯浓度的增高而增高;CCK-8检测结果显示,G140组的细胞增殖率明显低于对照组。结论:通过电泳沉积技术可在钛表面成功制备氧化石墨烯涂层,不同浓度均未对钛片的机械性能造成明显影响,当制备浓度为100μg/mL时,对变形链球菌和牙龈卟啉单胞菌具有良好的抗菌活性,且对人牙龈成纤维细胞无明显细胞毒性。
程倩陈溯
关键词:氧化石墨烯电泳沉积细胞相容性
一种基于二级交联体系制备增韧及高细胞相容性生物蛋白纤维的方法
本发明公开一种基于二级交联体系制备增韧及高细胞相容性生物蛋白纤维的方法。该方法包括:S1:向蛋白溶液中逐滴加入交联剂,进行一级交联;S2:将蛋白纺丝液通过注射泵挤出,经过多通道微流控/湿法纺丝芯片挤入到凝固浴中,进而二级...
刘凯屠红斌童涛张洪杰
超声协同SDS-Na_(2)CO_(3)提取丝素蛋白及高强韧纳米纤维膜的制备与细胞相容性研究
2024年
为解决提取过程中丝素蛋白极易受损的问题,提出以Na_(2)CO_(3)和表面活性剂SDS(十二烷基磺酸钠)的复合体系为脱胶剂,再结合超声处理的一体化天然蚕丝脱胶方案。采用该方案所得丝素蛋白纤维表面更加光洁平整,纤维损伤显著减少;相比传统的100℃碱液脱胶(30min完全脱胶),该方案在75℃下仅用10min即完成脱胶。以该方案所得脱胶纤维为原料,通过静电纺丝技术制备丝素蛋白纳米纤维膜,所得纤维膜经乙醇处理后,β折叠链片晶含量增至49.58%,展现出高达5.27MPa的断裂应力和123.49%的断裂应变。在5d的细胞培养试验中,丝素蛋白纳米纤维膜支持细胞的黏附、铺展和增殖,表现出良好的细胞相容性。这些研究成果将为制备高性能丝素蛋白纳米纤维膜提供解决方案,并有望推动丝素蛋白材料在生物医用领域的进一步应用和发展。
牛佳杰寿万刘雍
关键词:丝素蛋白细胞相容性
钙锶镁锌交联藻酸盐水凝胶的制备及其细胞相容性研究
2024年
目的:制备4组含不同种类二价金属离子Ca^(2+)、Sr^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)交联的藻酸盐凝胶支架,检测其理化性能,观察MC3T3-E1细胞在各组凝胶表面的黏附、增殖及成骨分化情况。方法:配制4组离子总浓度为6.5g/L且含不同种类Ca^(2+)、Sr^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)的混合溶液作为交联剂,与海藻酸钠溶液发生螯合反应制备多离子交联水凝胶,依据所含离子种类分为Ca组、Ca-Sr组、Ca-Sr-Mg组、Ca-Sr-Mg-Zn组,Ca组为对照组。使用扫描电镜观察凝胶冻干后的表面形态,检测其降解、溶胀性能及Sr^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)析出浓度。将MC3T3-E1细胞接种在水凝胶表面,观察细胞黏附形态,采用CCK-8法和活死染色法评价其生物安全性和细胞增殖能力。诱导MC3T3-E1细胞成骨分化,检测ALP活性,茜素红染色观察钙盐沉积情况,RT-qPCR检测成骨基因的表达。结果:与Ca组相比,Ca-Sr组、Ca-Sr-Mg组、Ca-Sr-Mg-Zn组水凝胶的孔隙更均匀致密,凝胶的降解速度与溶胀率均减小(P<0.05),细胞在凝胶表面的黏附形态由球形变为多角形;与Ca组比较,Ca-Sr组、Ca-Sr-Mg组、Ca-Sr-Mg-Zn组水凝胶表面的细胞增殖活性、细胞内ALP活性、钙结节生成面积及I型胶原、骨形态发生蛋白2、Runt相关转录因子2等成骨基因的表达量升高(P<0.05),且Ca-Sr组、Ca-Sr-Mg组、Ca-Sr-Mg-Zn组水凝胶表面的细胞增殖活力及成骨分化效果依次提高(P<0.05)。结论:较Ca^(2+)交联的海藻酸钙水凝胶相比,使用Ca^(2+)、Sr^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)混合金属阳离子作为交联剂,能改善藻酸盐水凝胶的理化性能,促进MC3T3-E1细胞在凝胶表面的黏附及成骨分化。
赵思楠宫宁张致浩徐磊谈飞
关键词:成骨
三维多孔丝素蛋白羟基磷灰石支架细胞相容性的实验研究
2023年
目的 探讨丝素羟基磷灰石(HA)复合支架的细胞相容性及其作为组织工程化软骨支架的潜力。方法 以丝素蛋白(SF)和HA为主要成分,通过乳液冷冻法研制出三维多孔丝素蛋白HA复合支架。在支架上接种人鼻中隔原代软骨细胞,通过扫描电镜和活细胞染色倒置相差显微镜观察细胞形态和活性,细胞计数试剂8(CCK8)检测细胞增殖情况。结果 制作的支架具有类似细胞外基质的孔隙相互连通的三维多孔结构,能为细胞的黏附和生长提供充分的三维空间。支架能促进人原代软骨细胞在其上粘附、生长、增殖,并保持良好的细胞活性。扫描电镜观察:培养14 d的细胞覆盖99%支架表面较培养3 d的细胞覆盖面积(74%)增大(P<0.01)。CCK8检测培养3 d和7 d较1 d时细胞明显增多(P<0.01)。结论 丝素HA复合支架具有良好的细胞相容性,是一种潜在的组织工程软骨修复材料。
陈仲春苗变梁谢幸巧姚晋荣赵霞
关键词:丝素蛋白羟基磷灰石软骨细胞细胞培养

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沈家骢
作品数:567被引量:2,142H指数:23
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李慕勤
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高长有
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郑玉峰
作品数:194被引量:677H指数:14
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龚逸鸿
作品数:81被引量:50H指数:3
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