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肺纤维化模型及其构建方法和用途
本发明涉及一种肺纤维化模型及其构建方法和用途。本发明提供的肺纤维化模型稳定性和可控性好、成熟度高,可以更好地模拟泡——毛细血管屏障的功能及其结构特征,具有仿真性高的优点,在疾病模拟、药物检测、筛选、评估和研发等方面具有...
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病理性肺纤维化模型及其构建方法和用途
本发明涉及一种病理性肺纤维化模型及其构建方法和用途。本发明提供的病理性肺纤维化模型稳定性和可控性好、成熟度高,不仅可以更好地模拟泡——毛细血管屏障的功能及其结构特征,还具有肺纤维化病变的病理特征以及免疫微环境,具有仿真...
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一种单侧组织博来霉素原位注射以建立特发性肺纤维化模型的方法
本发明涉及一种单侧组织博来霉素原位注射以建立特发性肺纤维化模型的方法。该方法是以外科手术的方式直接暴露组织,以直接注射的方式导入博来霉素溶液入。其中外科手术暴露组织的方式相较于传统气管暴露组织难度显著降低,这将...
廖国强陈正礼黄圣健毛旭华陈备中
过表达NUFIP1特发性肺纤维化模型
本发明公开了过表达NUFIP1特发性肺纤维化模型。本发明模型包括IPF细胞模型和动物模型,本发明通过在纤维细胞或者上皮细胞水平过表达NUFIP1基因,可以成功诱导纤维细胞活,构建成纤维细胞纤维化模型;动物水平...
娄月妍蒋捍东郑宇 赵丽芳薛珊
一种改良的博来霉素诱导的肺纤维化模型造模方法
2024年
目的建立博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型,比较经气管滴注和经气管吸入两种不同给药方式的成模差异。方法选择6~8周C57BL/6雄性小鼠46只,取6只小鼠随机分为经气管滴注组和经气管吸入组,每组3只。小鼠麻醉后分别经气管滴注和吸入亚甲蓝,观察小鼠双和胃内亚甲蓝的分布。取另40只小鼠随机分为经气管滴注+生理盐水组、经气管吸入+生理盐水组、经气管滴注+博来霉素组、经气管吸入+博来霉素组。观察各组小鼠造模后的精神状态、体质量变和生存状况,并在第21日取组织用于组织学、羟脯氨酸和TGF-β、α-SMA和COL1A1等蛋白水平Western blotting检测。结果经气管滴注组,亚甲蓝不均匀且局限地分布于双,伴不同程度胃内残留。经气管吸入组,亚甲蓝较均匀且弥散地分布于双,无明显胃内残留。与两对照组相比,两模型组小鼠精神状态欠佳,体质量下降明显,死亡率升高;小鼠组织泡结构破坏严重,伴大量胶原沉积,羟脯氨酸含量显著升高(P<0.05),Western blotting显示组织TGF-β、α-SMA和COL1A1等蛋白的表达显著增多(P<0.05)。结论经气管吸入+博来霉素组小鼠纤维化病灶分布更加均匀,各项指标相对稳定,是建立肺纤维化模型理想的方法。
李乔王苗风田宇赵峰
关键词:肺纤维化博来霉素疾病模型
小动物X射线辐照仪与小鼠放射性肺纤维化模型的构建
2024年
目的探讨采用小动物X射线辐照仪构建小鼠放射性肺纤维化(RIPF)模型的方法。方法将24只C57BL/6J小鼠随机分为4组(对照组、20 Gy照射组、22 Gy照射组和24 Gy照射组),每组6只,3个照射组使用小动物X射线辐照仪进行单次右照射,于照射后120 d取材。观察小鼠照射后的体重、右组织经苏木精-伊红和马松三色染色后的部组织病理学改变;采用Western blot和逆转录实时定量聚合酶链式反应检测小鼠组织纤维黏连蛋白1(FN1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)纤维化相关蛋白的表达;检测组织中羟脯氨酸含量和转生长因子β1(TGF-β1)信号通路的变。计量资料的组间比较采用单因素方差分析。结果对照组小鼠照射2周后的体重为(28.8±3.3)g,20、22、24 Gy照射组小鼠的体重分别为(26.2±4.6)、(26.4±3.3)、(26.6±3.3)g,差异无统计学意义(F=0.654,P>0.05)。与对照组相比,照射组小鼠右组织出现泡结构破坏,泡间隔增厚,伴有明显的胶原纤维沉积。照射组小鼠组织中FN1和α-SMA纤维化相关蛋白的表达水平较对照组明显升高,24 Gy照射组小鼠FN1基因的转录水平(2-ΔΔCt:2.1±0.6)明显高于对照组(2-ΔΔCt:0.6±0.1),20 Gy照射组小鼠α-SMA基因的转录水平(2^(-ΔΔCt):2.1±0.7)明显高于对照组(2-ΔΔCt:1.1±0.3),差异均有统计学意义(F=12.470、4.320,均P<0.05)。对照组小鼠右组织的羟脯氨酸含量为(500.2±17.1)μg/mg,20、22、24 Gy照射组小鼠右组织的羟脯氨酸含量分别为(1199.7±159.2)、(1357.1±36.8)、(1649.3±213.4)μg/mg。与对照组相比,不同剂量X射线照射组小鼠右组织的羟脯氨酸含量均明显增加,且差异有统计学意义(F=13.170,P<0.001),并伴有TGF-β1信号通路的激活。以上结果表明小鼠RIPF模型构建成功。结论采用小动物X射线辐照仪进行单次右照射(剂量20~24 Gy)120 d后小鼠出现明显肺纤维化,可成功构建小鼠RIPF模型
章登峰李科君徐畅杜利清
关键词:放射性肺纤维化C57BL小鼠动物模型
基于肺纤维化模型的五味参芩汤配比筛选及提取工艺研究
2024年
目的:研究五味参芩汤的最佳提取工艺,基于肺纤维化模型研究最佳配伍。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)和正交实验法探究五味参芩汤的最佳提取工艺,使用博来霉素诱导建立肺纤维化大鼠模型,研究五味参芩汤最佳配比。通过HE染色观察各组组织病理变;采用DSI/BUXCO气道阻力和顺应性监测系统仪器,计算机实时监测并记录大鼠潮气量、气道阻力及动态顺应性;试剂盒检测肺纤维化模型大鼠血清中III型前胶原氨基端前肽(PIIINP)、基质金属蛋白酶7(MMP-7)、表面活性蛋白A(SP-A)、表面活性蛋白-D(SP-D)、涎液糖链抗原6(KL-6)、血红素氧酶-1(HO-1)及组织中相关指标羟脯氨酸(HYP)含量,计算各组综合评分以此从16组配比组合中筛选出最优配比。以五味参芩汤中人参皂苷Rg1、黄芩苷、五味子醇甲、阿魏酸、桔梗皂苷D的含量以及出膏率为综合考察指标,以乙醇浓度、液料比、煎煮时间和煎煮次数为考察因素设计出L9(3^(4))正交实验表,计算各组综合评分以此初步优选五味参芩汤的提取工艺。结果:与正常对照组比较,模型对照组潮气量、动态顺应性功能指标显著降低(P<0.01),气道阻力及PIIINP、MMP-7、SP-A、SP-D、KL-6、HO-1及HYP含量显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,五味参芩汤给药16组潮气量、动态顺应性增加(P<0.05,P<0.01),气道阻力及PIIINP、MMP-7、SP-A、SP-D、KL-6、HO-1以及HYP含量明显降低(P<0.05或P<0.01)。五味参芩汤最佳配比为:人参9 g,黄芩15 g,五味子6 g,川芎12 g,桔梗9 g。最佳提取工艺为:10倍量90%乙醇,煎煮1.5 h,提取1次。结论:以博来霉素成功复制了肺纤维化大鼠模型,且五味参芩汤可以用于肺纤维化的治疗;筛选出了五味参芩汤最佳配比;建立了此方中主要成分含量测定的液相方法,且优选的提取工艺方法重现性、稳定性、精密度、加样回收均良好,方法稳定可靠。
杨慧聪王克婧张飞宇孙梦迪卢芳王宇陈平平刘树民
关键词:肺纤维化正交实验高效液相色谱法
二甲双胍对肺纤维化模型小鼠炎症反应的影响
2024年
目的探讨二甲双胍对盐酸博来霉素诱导肺纤维化模型小鼠的抗炎作用。方法将6~8周龄,体重为23~25 g的48只雄性C57BL/6J小鼠(无特定病原体等级),按随机数表法分为对照组、模型组、吡非尼酮组、二甲双胍组、吡非尼酮联合二甲双胍组和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧酶4(NOX4)活性抑制剂(DPI)组,每组各8只。以盐酸博来霉素诱导肺纤维化小鼠为模型,观察各组小鼠组织病理改变,检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果组织HE和Masson染色显示盐酸博来霉素诱导的小鼠出现明显的肺纤维化模型组、吡非尼酮组、二甲双胍组、吡非尼酮联合二甲双胍组和DPI组Ashcroft评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);吡非尼酮联合二甲双胍组小鼠肺纤维化模型组有减轻趋势(P<0.05)。二甲双胍可减轻盐酸博来霉素诱导的小鼠肺纤维化。当与吡非尼酮联用后,比单药干预进一步降低小鼠TNF-α水平。结论二甲双胍与吡非尼酮联用后抗炎效应增强,可在小鼠肺纤维化发生时期发挥效应,具有一定的延缓肺纤维化进展的作用。
马晖刘婷宋衍秋张永祥李月川刘娜娜
关键词:特发性肺纤维化二甲双胍吡非尼酮炎症反应
博来霉素多次给药诱导小鼠肺纤维化模型的建立及评价
2024年
目的:建立多次气管滴注博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的肺纤维化小鼠模型。方法:随机将C57BL/6J小鼠分为空白(control)组(5只)、BLM多次高剂量(BLM-MH)组(10只)、BLM多次中剂量(BLM-MM)组(8只)、BLM多次低剂量(BLM-ML)组(7只)、BLM单次中剂量(BLM-SM)组(6只);采用单次和多次气管滴注BLM的方法制备肺纤维化小鼠模型,并在第56天绘制生存曲线,收集组织,计算系数,观察苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,H&E)和Masson染色的组织病理变,检测羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量。利用GEO数据库筛选特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)患者的差异表达基因,并对差异基因进行KEGG通路富集分析,以确定与IPF发生相关的通路。通过Western blot检测各组小鼠组织中与IPF相关通路的变。结果:BLM-MH组与BLM-MM组小鼠在第56天的生存率分别为50%和87.5%,其他组无死亡。与control组相比,模型组的系数显著升高(P<0.05或P<0.01),组织损伤、炎症水平和肺纤维化程度显著增加(P<0.05或P<0.01),HYP含量呈升高趋势。与BLM-SM组相比,BLM-MH组和BLM-MM组的泡炎、纤维化程度和HYP含量均显著升高(P<0.05或P<0.01)。GEO数据库及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析结果显示,细胞外基质-受体相互作用通路(extracellular matrix-receptor interaction pathway,ECM-RIP)可能参与IPF的发生。Western blot结果显示,与空白组相比,模型组织中ECM-RIP通路相关蛋白,如磷酸聚焦粘附激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,p-FAK)和磷酸Src蛋白(phosphorylated Src,p-Src)的表达水平均升高。与BLM-SM组相比,BLM-MH组小鼠组织中p-FAK和p-Src蛋白水平均显著升高(P<0.05)。结论:多次气管滴注BLM建立的小鼠肺纤维化模型能够模拟肺纤维化的疾病特征,为IPF机制研究和药物开发提供了有价值的实验模型
桑星洁张琴关庆洲赵鹏邢小香白云苹
关键词:肺纤维化博来霉素动物模型
天龙竭胶囊对肺纤维化模型大鼠α-SMA和E-Cadherin的影响被引量:1
2024年
目的:观察天龙竭胶囊对博来霉素诱导肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)大鼠的影响,探讨天龙竭胶囊改善PF的作用机理。方法:60只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、天龙竭胶囊低剂量组(0.51 g·kg^(-1))、天龙竭胶囊中剂量组(1.01 g·kg^(-1))、天龙竭胶囊高剂量组(2.02 g·kg^(-1))、吡非尼酮组(0.12 mg·kg^(-1))。除空白组外,其余各组大鼠采用气管内滴注博来霉素(5 mg·kg^(-1))复制肺纤维化模型。造模14d后,各组大鼠灌胃给予相应药物干预,空白组和模型组灌胃给予等体积生理盐水,每日1次,连续28 d。取大鼠腹主动脉血进行血气分析;采用试剂盒检测组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)的含量;HE染色和Masson染色观察大鼠组织病理改变;RT-PCR和Western blot检测组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL-Ⅰ)及COL-Ⅲ蛋白和mRNA的表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠指数、组织HYP水平显著升高(P<0.01),氧分压(partial pressure of oxygen,PO 2)、血氧饱和度(oxygen saturation,SO 2)显著降低(P<0.01),组织中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、E-Cadherin mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.05);与模型组比较,天龙竭胶囊可显著降低大鼠指数、组织HYP水平(P<0.05),显著升高PO 2、SO 2水平(P<0.05),显著降低组织COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、E-Cadherin mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。HE染色和Masson染色显示,模型组大鼠泡结构破坏,大量炎性细胞浸润,间质扩张,泡间隔增厚,组织胶原沉积明显增多,纤维沉积形成纤维化病灶;天龙竭胶囊可明显改善模型大鼠的组织病变,以高剂量效果最为明显。结论:天龙竭胶囊可明显改善PF大鼠病理损伤,改善功能及肺纤维化,其作用可能与调节α-SMA/E-Cadherin的表达进而参与上皮-间质转相关。
罗婷袁德政李天纲王月付义袁嘉丽
关键词:肺纤维化上皮-间质转化

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宋建平
作品数:138被引量:701H指数:18
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研究主题:肺纤维化 瓜蒌薤白汤 肺纤维化模型 大鼠肺组织 中医体质
田黎
作品数:34被引量:107H指数:6
供职机构:广州中医药大学
研究主题:《金匮要略》 瓜蒌薤白汤 肺纤维化 肺纤维化模型 麦门冬汤