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人胰腺癌细胞株及其应用: 本发明涉及生物医学领域，公开了一种人胰腺癌细胞株及其应用。该胰腺癌细胞株为生物保藏编号为CCTCC NO：C2022354的人胰腺癌细胞株Pahz‑1R1。该细胞株的成瘤率高达100％，能够用于建立动物胰腺癌模型，以研究...; 左朝晖郑金海樊小莉彭名菁

稳定表达Cas9蛋白质、荧光蛋白质和荧光素酶的胰腺癌细胞株的建立及鉴定: 2024年; 目的构建Cas9蛋白质、绿色荧光蛋白质、红色荧光蛋白质、荧光素酶-红色荧光蛋白质稳定表达的人和小鼠胰腺癌细胞株,并验证荧光素酶的活性和Cas9的基因编辑功能,以便利用荧光素酶和CRISPR/Cas9系统开展胰腺癌的研究。方法在人胰腺癌细胞系(AsPC-1、CFPAC-1、HPAC、BxPC-3、HS 766T、MIA PaCa-2、PANC-1和SW 1990)、小鼠胰腺癌细胞系(Pan02)中,感染Cas9表达质粒pLv-EF1α-Cas9m1.1-Puro,挑选单细胞克隆培养扩增,提取总蛋白质后,Western blot验证Cas9的表达水平;感染荧光蛋白质表达质粒pLv-EF1α-EGFP、pLv-EF1α-mCherry、pLv-EF1α-tdTomato、pLv-EF1α-Luc2-tdT,荧光显微镜下挑选荧光蛋白质稳定表达的单克隆培养扩增;选取每种细胞Cas9稳定表达的一个克隆感染pLv-EF1α-Luc2-tdT,荧光显微镜下挑选荧光蛋白质稳定表达的单克隆培养扩增;选取其中2个细胞株感染Lv-EF1a-mCherry,流式细胞术分选出mCherry阳性的细胞,再通过慢病毒感染靶向mCherry基因的向导RNA,细胞扩增后,通过荧光显微镜下观察和流式细胞术检测mCherry被敲除的情况;5只BALB/c Nude小鼠皮下接种MIA PaCa-2-Luc2-tdT细胞(1.0×10^(7)个/只),36 d后活体成像。结果筛选到48个Cas9稳定表达的胰腺癌细胞株(其中表达Cas9m1.1的细胞23株,表达Cas9m1.1-Luc2-tdT的细胞25株),筛选到33个荧光蛋白质稳定表达的胰腺癌细胞株(表达EGFP的细胞8株,表达mCherry的7株,表达Luc2-tdT和tdTomato的各9株)。表达mCherry和Cas9的细胞感染mCherry gRNA后,mCherry被敲除。活体成像显示,表达Luc2-tdT的MIA PaCa-2细胞生物发光和荧光发光均存在。结论成功建立了33个荧光蛋白质稳定表达的人和小鼠胰腺癌细胞株,其中表达Luc2-tdT的细胞株具有荧光素酶活性;成功建立了48个Cas9稳定表达的人和小鼠胰腺癌细胞株,Cas9具有基因编辑活性,基因编辑活性因原始细胞系不同而存在差异。; 代娣杨振丽夏雨佳卞晓翠刘玉琴; 关键词：荧光素酶胰腺癌活体成像

人胰腺癌细胞株及其应用: 本发明涉及生物医学领域，公开了一种人胰腺癌细胞株及其应用。该胰腺癌细胞株为生物保藏编号为CCTCC NO：C2022354的人胰腺癌细胞株Pahz‑1R1。该细胞株的成瘤率高达100％，能够用于建立动物胰腺癌模型，以研究...; 左朝晖郑金海樊小莉彭名菁

马蔺子甲素对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、迁移、侵袭的影响及其机制被引量：1: 2023年; 目的观察马蔺子甲素(IQ)对人胰腺导管腺癌(PDAC)细胞株PANC-1增殖、侵袭、迁移的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期的PANC-1细胞置于基础培养基中,将细胞分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、对照组,高剂量组、中剂量组、低剂量组分别加入25、20、15μmol/L的IQ,对照组加入等量0.9%NaCl溶液。采用MTT比色法检测细胞增殖能力(细胞OD值),划痕愈合实验检测细胞迁移能力(细胞迁移距离),Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力(穿膜细胞个数),qPCR法检测细胞Rho信号通路关键分子RhoA、Rac1、ROCK1、CDC42、ROCK2。结果与对照组比较,中剂量组和高剂量组培养24、48、72 h的OD值减小(P均<0.05);与同组0 h比较,低剂量组及中剂量组和高剂量组培养24、48、72 h的OD值增加(P均<0.05)。与对照组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞迁移距离短,穿膜细胞个数少(P均<0.05);与低剂量组比较,中剂量组、高剂量组细胞迁移距离短,穿膜细胞个数少(P均<0.05);与中剂量组比较,高剂量组细胞迁移距离短,穿膜细胞个数少(P均<0.05)。与对照组比较,低剂量组及中剂量组和高剂量组RhoA、Rac1、ROCK1相对表达量减小(P均<0.05);与低剂量组比较,中剂量组、高剂量组ROCK1相对表达量减小(P均<0.05)。结论IQ可抑制PANC-1细胞增殖、侵袭及转移,其作用机制可能为抑制Rho信号通路介导的上皮间质转化进程,当药物浓度为25μmol/L时可达到最大抑瘤效应。; 张思宇王超陈炼王嘉铭董适毓程玉鑫彭利张萌; 关键词：胰腺癌胰腺导管腺癌马蔺子甲素细胞增殖能力细胞侵袭能力

姜黄素对胰腺癌细胞株BxPC-3凋亡作用的影响: 2022年; 目的探讨姜黄素对NF-κB通路和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)通路的调控作用,及对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法通过浓度梯度姜黄素处理人胰腺癌细胞BxPC-3,采用CCK-8细胞活力法检测细胞活力并确定最适浓度,通过RT-PCR法检测Bax、Bcl-2、Cyclin D1 mRNA相对表达量,Western blot法检测Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase3、p-NF-κB等蛋白的表达量。结果与对照组比较,不同浓度的姜黄素处理均使细胞活力明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且呈剂量依赖性。Bcl-2、Cyclin D1的mRNA表达量明显降低,Bax的mRNA表达量明显升高,Bcl-2、Cyclin D1、p-NF-κB蛋白表达量明显降低,Bax、Cleaved Caspase 3蛋白表达量明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论姜黄素可诱导胰腺癌细胞凋亡,其作用机制与下调CyclinD1、抑制NF-κB活化有关。; 张衡以挺; 关键词：姜黄素胰腺癌细胞凋亡

白藜芦醇对人胰腺癌细胞株放疗敏感性的影响: 2022年; 以体外培养的胰腺癌细胞为研究对象,探讨白藜芦醇对胰腺癌PANC-1 细胞株放疗敏感性的影响及其机制。方法:体外培养胰腺癌 PANC-1 细胞株,显微镜下观察细胞形态,定期更换培养基及传代,取对数生长期细胞实验。设置空白对照组 A、单纯用药组 B(白藜芦醇 50μmol/L)、单纯照射组 C(6MV 直线加速器照射剂量 2Gy)、白藜芦醇联合照射组 D(白藜芦醇 50μmol/L + 6 MV 直线加速器照射剂量 2Gy)(1)采用 CCK-8 法测定各组 OD 值,计算细胞抑制率。(2)Hoechst 33258荧光染色观察细胞核形态学变化。(3)蛋白印迹法检测各组Beclin1蛋白的表达。结果:(1)联合照射组 D 与单因素干预组(B 组与 C 组)相比,细胞抑制率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05),金正均法表明两种干预因素联合对胰腺癌 PANC-1 细胞有协同抑制作用。(2)B 组、C 组中细胞核呈现染色质边集、核固缩、核片断化,伴随典型凋亡小体的形成,A组阴性对照组细胞数较多,凋亡细胞少,细胞核呈弥散、均匀蓝色荧光,经联合处理后,D组细胞数逐渐减少,凋亡细胞明显增多,甚至出现大片细胞脱落形成的细胞脱失区。(3)Western blotting 检测发现 B、C、D 三组均可使Beclin1 蛋白表达增加,且D组蛋白表达更为明显,免疫荧光后细胞挛缩,Beclin1 在胞浆中所占比例更高,与 B 组、C 组灰度值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。; 蔺佳; 关键词：白藜芦醇胰腺癌 PANC-1 细胞放射增敏

miR--613在胰腺癌细胞株耐吉西他滨中的机制研究: 目的:胰腺癌是消化道常见的恶性肿瘤之一,但因其恶性程度较高且易产生化疗耐药,预后极差。目前对于胰腺癌的治疗处于瓶颈期,亟待探索胰腺癌化疗耐受的可能机制。作为一种微小RNA,有研究表明miR-613在多种恶性肿瘤中存在异常...; 杨晏; 关键词：胰腺癌吉西他滨药物敏感性

微小RNA-200c对人胰腺癌细胞株PANC-1中转化生长因子-β诱导基因-克隆3表达的影响被引量：1: 2022年; 目的观察微小RNA-200c(miR-200c)对人胰腺癌细胞株PANC-1中转化生长因子-β诱导基因-克隆3(βig-h3)表达的影响。方法将miR-200c前体片段和阴性对照片段分别转染到PANC-1细胞中。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后的PANC-1细胞中miR-200c和βig-h3的表达。应用Transwell实验检测转染后PANC-1细胞的侵袭能力。采用t检验。结果转染miR-200c前体片段和阴性对照片段的PANC-1细胞中miR-200c的相对表达值分别为1.00±0.12和0.17±0.06,差异有统计学意义(t=3.008,P<0.05)。βig-h3的相对表达值分别为0.21±0.16和0.71±0.23,差异有统计学意义(t=2.236,P<0.05)。转染miR-200c前体片段和阴性对照片段的PANC-1细胞平均穿膜细胞数分别为(65.00±18.19)和(308.00±5.73)个,差异有统计学意义(t=2.107,P<0.05)。结论miR-200c可以抑制胰腺癌细胞的侵袭能力,可能与下调βig-h3的表达有关。; 马超丁月超张锴郑鹏黄涛; 关键词：胰腺癌微小RNA 侵袭性

靶向Neuropilin-2单克隆抗体对胰腺癌细胞株PANC-1生物学功能的影响及其分子机制的探究: 目的　　胰腺癌是常见的恶性消化道实体肿瘤之一，其起病隐匿，预后差，致死率高且易转移及复发等特点，严重威胁着全球人类的健康安全。手术治疗在胰腺癌的治疗策略中处于重要地位，外科手术治疗是目前公认的最佳治疗方法，然而由于胰腺癌...; 周宗浪; 关键词：胰腺癌神经纤毛蛋白单克隆抗体分子机制

8种人胰腺癌细胞株常见肿瘤相关基因突变特征分析被引量：1: 2020年; 目的分析8种人胰腺癌细胞株中常见肿瘤相关基因突变,为胰腺癌基础研究中选择合适的细胞株提供依据。方法体外培养8种人胰腺癌细胞株(AsPC-1、BxPC-3、Capan-1、Capan-2、MIA PaCa-2、PANC-1、Patu8988和T3M4,均购自美国模式培养物集存库),采用二代测序技术检测113个肿瘤相关基因突变情况,结合京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对突变基因进行功能分析。结果二代测序结果显示,8种人胰腺癌细胞株中共确定36个基因、79个位点发生突变。鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)、肿瘤蛋白P53(TP53)、细胞周期依赖性激酶抑制基因(CDKN2A)和胰腺癌缺失基因(DPC4/SMAD4)在8种胰腺癌细胞株中的突变率分别为87.5%(7/8)、100.0%(8/8)、50.0%(4/8)和37.5%(3/8)。AsPC-1和Capan-1细胞中同时存在上述4个基因的突变,BxPC-3细胞株是KRAS野生型胰腺癌,CDKN2A基因在AsPC-1、Capan-1、Capan-2和Patu8988细胞中检测到突变,而DPC4/SMAD4在AsPC-1、Capan-1和T3M4细胞中发生突变。其他发生率较高的突变基因包括AT丰富结合域1A(ARID1A)基因(AsPC-1、Capan-1、Capan-2、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREBBP)基因(Capan-1、Capan-2、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)、NOTCH1(BxPC-3、Capan-2、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)、腺瘤性息肉病(APC)基因(AsPC-1、Capan-1和Patu8988发生突变)和E1A结合蛋白P300(EP300)基因(BxPC-3、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)。突变基因功能主要涉及Ras/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、细胞周期调控、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路、NOTCH信号通路、染色质重塑复合物家族、转化生长因子β(TGF-β)信号通路、DNA损伤修复、Hedgehog和磷脂酰肌醇3激酶丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-Akt)信号通路等。结论 8种胰腺癌细胞株具备人胰腺癌组织的基因学特征,不同细胞株具有不同的基因突变特点,实验研究中应根据不同细胞的基因突变情况合理选择细胞株�; 王琦陈凯金博杨尹默田孝东; 关键词：胰腺癌细胞株

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