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活化的脾细胞联合基因免疫共同诱导甲状腺相关性眼病动物模型的研究: 2024年; 目的应用表达人促甲状腺素受体(hTSHR)重组质粒介导的基因免疫,联合pcDNA3.1/hTSHR基因免疫活化的脾细胞,共同免疫BALB/c小鼠,构建甲状腺相关眼病(TAO)小鼠模型。方法选择BALB/c雌性小鼠35只,随机分为空白质粒组(A组)、基因免疫组(B组)和活化脾细胞联合基因共同免疫组(C组),每组10只。分别给予空白质粒pcDNA3.1、重组质粒pcDNA3.1/hTSHR、重组质粒pcDNA3.1/hTSHR+重组质粒pcDNA3.1/hTSHR免疫活化脾细胞干预处理。所有小鼠均于免疫第22周行眼眶MRI检查后处死,应用光学显微镜和透射电子显微镜观察眼眶组织和甲状腺组织,酶联免疫吸附法检测血清T3、T4、TSH、TPOAb及TRAb的表达水平。结果外观:与A组相比,50%的B组小鼠和80%的C组小鼠表现出不同程度的眼球突出,且C组小鼠眼球突出程度更明显。影像学:B组和C组小鼠眼外肌体积较A组增大,且以C组增大更为明显。组织病理学形态:A组小鼠眼眶及甲状腺组织均未见异常改变;B组小鼠眼眶肌纤维变性断裂、粗细不均,纤维结缔组织,肌间少量胶原纤维增生,甲状腺滤泡间及纤维中见少量淋巴细胞浸润;C组小鼠眼眶肌纤维变性断裂、粗细不均、横纹模糊、肌浆凝聚,纤维结缔组织明显水肿伴粘液变性,肌间大量胶原纤维及脂肪组织增生,甲状腺滤泡间及纤维中见少量淋巴细胞浸润。血清学指标:与A组相比,B、C组均出现T3、T4、TRAb升高及TSH降低,且以C组改变更为明显;三组之间TPOAb数值相比无明显差异。结论本研究成功建立了一种改良的TAO动物模型,为进一步研究该病的病理特征和开发新的治疗方法提供了有用的工具。; 孙宝琪孙增刚刘凯峰王晓琳史明明张艳辉张金梅邵光东; 关键词：甲状腺相关眼病基因免疫

CytochalasinH对小鼠脾细胞增殖的抑制作用及其对Ca^(2+)/CaN/NFAT信号通路的影响被引量：1: 2023年; 【目的】研究红树林植物大红树内生真菌Phomopsis asparagi DHS-48得到的次级代谢产物cytochalasin H对小鼠(Mus musculus)脾细胞的免疫抑制活性及其作用机制。【方法】用不同浓度(3、6、12、25、30μmol/L)cytochalasin H处理小鼠脾细胞,通过CCK-8活力测定法检测其对刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)诱导小鼠脾细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测cytochalasin H对小鼠脾细胞凋亡的影响;免疫荧光实验检测cytochalasin H对细胞中NFAT入核及钙离子内流的影响;酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)和免疫蛋白印迹法(Western blotting)测定cytochalasin H对脾细胞中NFAT信号通路的影响。【结果】CCK-8实验表明,cytochalasin H对于正常小鼠脾淋巴细胞的毒性比环孢菌素(Cyclosporin A,Cs A)弱,半抑制浓度IC_(50)=(35.07±1.16)μmol/L;流式细胞术显示,cytochalasin H对ConA刺激的脾淋巴细胞无促凋亡作用;cytochalasin H对ConA诱导增殖的小鼠脾淋巴细胞具有显著的抑制效果,IC_(50)=(14.81±0.81)μmol/L,且呈剂量依赖性;免疫荧光结果表明,cytochalasin H在浓度为15μmol/L时显著地抑制了钙离子内流;Western Blotting结果显示cytochalasin H对脾淋巴细胞中CaN、NFAT蛋白(nuclear factor of activated T-cells,NFAT)的表达具有显著的抑制作用;免疫荧光结果显示,cytochalasin H抑制细胞浆内的NFAT转移到细胞核;ELISA测试结果证明,cytochalasin H能显著抑制下游细胞因子白介素-2(IL-2)的分泌(α=0.05)。【结论】Cytochalasin H通过抑制Ca^(2+)/CaN/NFAT信号通路转导显著抑制T细胞增殖和活化。; 邓小林饶乐怡徐静; 关键词：T细胞增殖细胞凋亡免疫抑制剂

低氧诱导因子-1α对胶原诱导关节炎小鼠脾细胞中T细胞亚群的调控作用: 2023年; 目的:探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)载体对胶原诱导关节炎(collagen induced arthritis,CIA)小鼠脾细胞中T细胞亚群的调控作用。方法:DBA/1小鼠采用牛Ⅱ型胶原建立类风湿关节炎的动物模型CIA小鼠,尾静脉注射HIF-1α-siRNA腺病毒和阴性对照腺病毒,每周1次,共4周,实验分为空白组、模型组、阴性对照组和HIF-1α-siRNA组。实验结束后处死小鼠。流式细胞术检测小鼠脾脏中Th1和Th2、Th17和Treg比例的变化;HE染色观察小鼠踝关节的病理变化。结果:与空白组比较,模型组小鼠脾细胞中Th1细胞和Th17细胞的比例升高,差异有统计学意义(P<0.05);Treg的比例是下降的,但没有明显的统计学差异;而Th2细胞的变化并不明显。与模型组和阴性对照组比较,HIF-1α-siRNA组小鼠脾细胞中Th1细胞和Th17细胞的比例降低,差异有统计学意义(P<0.05),Th2细胞和Treg虽然呈上升的趋势,但差异没有统计学意义;模型组小鼠踝关节出现滑膜增生及大量的淋巴细胞浸润,HIF-1α-siRNA作用后,CIA小鼠踝关节的滑膜增生和淋巴细胞浸润的情况明显减轻。结论:HIF-1α-siRNA可以降低脾细胞中Th1细胞和Th17细胞的比例,同时上调Th2细胞和Treg的比例,并减轻CIA小鼠滑膜增生和淋巴细胞浸润情况,提示HIF-1α-siRNA可以通过调控脾细胞中的T细胞亚群,进而发挥治疗CIA小鼠的作用。; 孟金康敏芦彦蓉郭煜庞春艳; 关键词：胶原诱导关节炎低氧诱导因子-1Α TREG TH1细胞 TH2细胞

纳米雄黄靶向PD-1/PD-L1通路调节MRL/lpr小鼠脾细胞增殖研究: 2023年; 目的:研究纳米雄黄对MRL/lpr鼠脾细胞的影响及是否是通过程序性死亡蛋白1(PD-1)/程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)作用于狼疮鼠。方法:将6只BABL/C小鼠用作正常组,将24只MRL/lpr狼疮鼠随机分为模型组,高、中、低剂量治疗组,每组6只。通过管饲法连续给药8周,脱颈法杀死所有小鼠。采用组织病理学切片观察脾脏损伤,Western Blot法检测PD-L1、PD-1蛋白表达,ELISA法检测血清IL-10水平。结果:正常组脾脏组织形态正常,血清IL-10水平正常。纳米雄黄各剂量治疗组PD-L1、PD-1蛋白表达均显著高于正常组及模型组(P<0.01,P<0.05),其脾脏组织形态较模型组明显改善,IL-10水平也显著降低(P<0.05)。结论:纳米雄黄通过PD-1/PD-L1信号通路抑制脾细胞活化,有益于狼疮鼠病情改善。; 谭燕娥范亚轩孙婧朱美芳吴志颖曹彩金徐卫东; 关键词：纳米雄黄 MRL/LPR 脾细胞

高强度超声介入治疗对宫颈癌小鼠模型肿瘤增殖、免疫功能及脾细胞Th1/Th2亚群的影响被引量：4: 2023年; 目的探讨高强度超声介入治疗对宫颈癌小鼠模型肿瘤增殖、免疫功能及脾细胞Th1/Th2亚群的影响。方法 42只宫颈癌小鼠按随机数字表法分为3组-模型组、超声1组与超声2组,每组14只。超声1组与超声2组均给予进行局部高强度超声治疗,超声1组的单点单次治疗时间为10 s,超声2组的单点单次治疗时间为20 s,共治疗15次;模型组不给予超声治疗。所有小鼠均治疗观察4周,记录3组小鼠的体重、肿瘤体积、肿瘤增殖、免疫功能及脾细胞Th1/Th2亚群变化情况。结果超声1组与超声2组治疗第2周与第4周的小鼠体重均高于模型组,肿瘤体积均小于模型组,超声2组较超声1组变化更显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。超声1组与超声2组治疗第4周与第8周的小鼠肿瘤细胞增殖率均低于模型组,超声2组低于超声1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。超声1组与超声2组治疗第4周与第8周的CD4^(+)T细胞比例和CD8^(+)T细胞比例高于模型组,超声2组高于超声1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。超声1组与超声2组治疗第4周与第8周的Bcl-2、MMP-9蛋白相对表达水平低于模型组,超声2组低于超声1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高强度超声介入在宫颈癌小鼠的应用能抑制Bcl-2、MMP-9蛋白的表达,改善脾细胞Th1/Th2亚群功能,提高小鼠的免疫功能,抑制肿瘤增殖,从而发挥很好的抗癌作用。; 李强于晓霞范志刚; 关键词：宫颈癌脾细胞免疫功能肿瘤增殖

栀子苷元通过抑制内质网应激改善脾细胞凋亡治疗脓毒症的机制研究被引量：1: 2023年; 目的评估栀子苷元(Genipin)对盲肠结扎穿孔术(Cecal Ligation and Puncture,CLP)诱导的脓毒症小鼠模型的治疗效果,并探讨其潜在的作用机制。方法将雄性C57BL/6小鼠分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)、栀子苷元治疗脓毒症组(Genipin+CLP组)。栀子苷元治疗组在建模后0 h和20 h经尾静脉注射2.5 mg/kg栀子苷元,而Sham组和CLP组注射等体积生理盐水。实验1,观察栀子苷元对脓毒症小鼠120 h生存率的影响;实验2,基于生存率的结果选取建模后36 h为采样时间点,并行以下方法检测:利用酶联免疫吸附法(Enzym-linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factorα,TNF-α)和白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)含量;常规苏木精-伊红(Hematoxylin eosin,HE)染色法检测肺和肝组织病理损害;Western Blot法检测脾脏内质网应激相关蛋白的表达变化,包括葡萄糖调节蛋白78(Glucose Regulated Protein 78,GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(Protein Kinase R-like Endoplasmic Reticulum Ki‐nase,PERK)、磷酸化真核翻译起始因子2α(p-eukaryotic Initation Factor 2α,p-eIF2α)和C/EBP同源蛋白(C/EBP Homolo‐gous Protein,CHOP);脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal-deoxynucleotidyl Transferase-mediated dUTP Nick End-labeling,TUNEL)检测脾细胞凋亡变化。结果与CLP组相比,栀子苷元治疗提高了脓毒症小鼠120 h生存率(P<0.05),降低了血清TNF-α和IL-6含量(P<0.05),并减轻肺和肝脏组织病理学损伤。另外,栀子苷元显著下调了脾脏GRP78、PERK、p-eIF2α和CHOP蛋白的表达水平(P<0.05),并进而减少内质网应激诱导的脾细胞凋亡数量(P<0.05)。结论栀子苷元能够明显减轻脓毒症所导致的脏器损害和过度炎症反应,改善脓毒症预后。该效应的作用机制可能与栀子苷元减轻脾脏内质网应激导致其凋亡机制的启动被阻断,进而减轻脾细胞凋亡有关。; 罗宁陈贵兵张腾赵婕付靖楠逯宁马涛; 关键词：脓毒症内质网应激未折叠蛋白反应

红树林植物红茄苳内生烟曲霉代谢产物对小鼠脾细胞增殖的影响被引量：1: 2022年; 为了研究红树林植物红茄苳内生真菌烟曲霉次级代谢产物Af-8[16-O-deacetylhelvolic acid 21,16-lactone]对小鼠脾细胞中免疫抑制活性的影响,采用CCK-8细胞活力测定方法、体外钙调蛋白磷酸酶(calcineurin,CN)活性抑制方法、酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)和免疫蛋白印迹法(Western blot)研究Af-8对脾细胞中NFAT信号通路的影响。Af-8对于正常小鼠脾细胞显示较弱的细胞毒性,IC_(50)为(168.96±1.35)μmol/L;Af-8对钙调蛋白磷酸酶有显著的抑制作用,抑制率达到88.81%;随着Af-8浓度的增加,Af-8对ConA诱导脾细胞增殖也显示出明显的抑制效果,IC_(50)为(12.11±0.11)μmol/L;ELISA测试结果表明Af-8对细胞白介素-2(IL-2)的表达也起到显著抑制作用;Western Blot显示Af-8对NFAT1蛋白(nuclear factor of activated T-cells1,NFAT1)的去磷酸化也表现出显著的抑制作用。Af-8通过对CN酶的抑制进而影响NFAT信号通路,从而发挥免疫抑制效果。; 张雪侠徐志勇邓小林徐静

经空肠导入供体脾细胞对同种小鼠皮肤移植存活的影响: 目的:探讨经空肠导入供体脾细胞对同种小鼠皮肤移植存活的影响及其作用机制。方法:将36只雄性C57/B6小鼠受体随机分3组,分别为同系移植组（iso-Tx）、同种移植对照组（allo-Tx control）和同种移植实验组...; 曾位强; 关键词：脾细胞皮肤移植

金丝桃苷通过ROS/Nrf2/Cyt--c缓解玉米赤霉烯酮暴露诱导小鼠脾细胞凋亡的研究: 玉米赤霉烯酮是一种在自然界中广泛存在的霉菌毒素,对动物机体具有免疫毒性,可抑制免疫器官的发育,导致免疫器官损伤,进而影响免疫功能。氧化应激和细胞凋亡是其致动物机体损伤的重要机制。金丝桃苷作为一种黄酮醇苷类化合物,具有抗氧...; 朱炜凤; 关键词：玉米赤霉烯酮金丝桃苷小鼠细胞凋亡

阿魏菇粗多糖体外脾细胞调节功能及体内疫苗佐剂功能的研究被引量：1: 2022年; 为研究阿魏菇粗多糖(PFCP)体外对小鼠脾细胞增殖的作用和体内对口蹄疫灭活疫苗的佐剂功能,MTT法检测PFCP最大无毒浓度,PFCP与Con A、LPS联用刺激小鼠脾细胞增殖的能力,ELISA检测细胞培养上清中IL-4与IFN-γ含量。PFCP联合口蹄疫病毒灭活抗原皮下注射免疫接种小鼠,ELISA检测IgG生成情况,流式细胞术分析免疫后小鼠脾脏T淋巴细胞亚群比例。结果显示,PFCP安全性好,体外可协同ConA与LPS促进小鼠脾细胞的增殖,增加IL-4与IFN-γ的分泌量。体内可增强口蹄疫病毒特异性IgG的水平,增加CD3+CD4+T、CD3+CD8+T淋巴细胞的数量。表明PFCP对小鼠脾细胞增殖具有较好的促进作用,且具有作为口蹄疫灭活疫苗佐剂的潜力。; 史茜胡都斯·艾尔肯龙志新王科珂蒋刚强史向向张富春; 关键词：阿魏菇多糖脾细胞口蹄疫佐剂

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