搜索到10808篇“ 荧光定量聚合酶链式反应“的相关文章
- 荧光定量聚合酶链式反应联合显色培养法在孕晚期孕妇B群链球菌筛查中的价值
- 2025年
- 目的 分析荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)联合显色培养法在孕晚期孕妇B群链球菌筛查中的价值,为临床提供参考。方法 选取2022年10月至2024年3月阳光融和医院孕35~37周行B群链球菌筛查的1 000例孕妇进行回顾性分析,分别采用B群链球菌显色培养法、qRT-PCR法对孕妇肛拭子或阴拭子B群链球菌进行检测。以肉汤增菌培养法为金标准,比较B群链球菌显色培养法、qRT-PCR法检测B群链球菌的一致性;评估B群链球菌显色培养法、qRT-PCR法对B群链球菌的检测效能;以B群链球菌显色培养法、qRT-PCR法任一检测方法阳性作为联合检测阳性,评估联合检测与肉汤增菌培养法对B群链球菌的检测一致性及检测效能。结果 1 000例标本经金标准检出阳性94例,阴性906例,阳性检出率为9.40%。B群链球菌显色培养法检出阳性89例,阴性911例,阳性检出率为8.90%,与金标准检测一致性中等(Kappa值=0.681,P<0.05);qRT-PCR法检出阳性98例,阴性902例,阳性检出率为9.80%,与金标准一致性较好(Kappa值=0.839,P<0.05);联合检测阳性148例,阴性为852例,阳性检出率为14.80%,与金标准检测一致性较好(Kappa值=0.881,P<0.05)。与B群链球菌显色培养法相比,qRT-PCR法检测灵敏度、准确率均较高,漏诊率较低,联合检测灵敏度较高,特异度、漏诊率均较低(均P<0.05);与qRT-PCR法相比,联合检测灵敏度较高,特异度、漏诊率均较低(均P<0.05),准确率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 B群链球菌显色培养法、qRT-PCR法联合检测可提高检测敏感度,提升B群链球菌阳性检出能力,可为临床诊断提供参考。
- 李虎虎王原媛冯树丽邓燕兰李运清
- 关键词：荧光定量聚合酶链式反应B群链球菌
- 实时荧光定量聚合酶链式反应在ABO亚型鉴定中的应用研究
- 2025年
- 目的探讨实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)在ABO亚型鉴定中的应用。方法选取2024年4—8月北京美中宜和妇儿医院、北京大学第三医院、北京积水潭医院以及中国医学科学院阜外医院四家医院送检的4份疑难ABO血型血液样本。应用血清学试管法进行ABO血型正反定型,应用实时荧光定量PCR法进行ABO血型基因分型,应用基因测序明确ABO基因的突变位点。结果4例患者血清学ABO血型正反定型反应格局相似,初步判定为A_(亚)B或B(A)。实时荧光定量PCR结果显示,患者1和患者2基因型为A/B,患者3和患者4基因型为B/O1。结合血清学结果和基因测序结果可明确患者1和患者2的ABO血型为A_(亚)B,患者3和患者4的ABO血型为B(A)。结论实时荧光定量PCR技术能够精准区分A_(亚)B与B(A)血型,有力保障输血安全。
- 刘婷婷李晓菲郑仲男许志远
- 关键词：实时荧光定量PCRABO亚型
- 实时荧光定量聚合酶链式反应仪
- 1.本外观设计产品的名称：实时荧光定量聚合酶链式反应仪。;2.本外观设计产品的用途：用于对检测样品进行荧光定量PCR检测。;3.本外观设计产品的设计要点：在于形状。;4.最能表明设计要点的图片或照片：立体图1。
- 陶毅张森吴杨罗明鸣
- 多重荧光定量聚合酶链式反应法检测水牛乳中黄牛源性成分
- 2025年
- 目的:建立多重荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)法同时检测水牛乳中水牛、黄牛这2种牛源性成分。方法:设计基于cytb基因的特异性引物和探针,通过优化反应体系的退火温度和循环参数,建立一种能在同一反应体系内快速检测水牛和黄牛源性成分的多重荧光定量PCR方法。同时,对该方法进行特异性、灵敏度、重复性等方法学验证。结果:该方法特异性强,能特异性检出水牛、黄牛源性成分;该方法灵敏度可达核酸浓度1.0×10^(-4) ng·μL^(-1),且重复性较好。结论:该方法操作简单,具有通量高、特异性强、灵敏度高和重复性好等优点,适用于水牛乳样品中水牛、黄牛源性成分的掺假鉴别和快速检测。
- 梁媛媛赵娇崔生熠刘鹏鹏
- 关键词：水牛乳
- 荧光定量聚合酶链式反应仪（实时）
- 1.本外观设计产品的名称：荧光定量聚合酶链式反应仪（实时）。;2.本外观设计产品的用途：本外观设计产品用于进行实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测。;3.本外观设计产品的设计要点：在于形状。;4.最能表明设计要点的图...
- 徐怀远仇新然
- 实时荧光定量聚合酶链式反应快速检测4种食源性致病弧菌被引量：2
- 2024年
- 目的建立和优化4种食源性致病弧菌的实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)快速检测方法。方法基于副溶血性弧菌的toxR基因(GenBank ID:MH047287.1)、霍乱弧菌的ompW基因(GenBank ID:MF100046.1)、拟态弧菌的toxR基因(GenBank ID:EF693743)和创伤弧菌的vvhA基因(GenBank ID:KC821520.1)设计常规PCR引物和qPCR特异性引物和探针。分别建立副溶血性弧菌、霍乱弧菌、拟态弧菌和创伤弧菌4种食源性致病弧菌的单重qPCR检测体系,根据扩增曲线和Ct值对探针浓度进行优化,设置探针浓度梯度。结果4种弧菌的探针最适浓度均为0.1µmol/L。对设计的4种弧菌的引物分别进行常规PCR的扩增,其最低检出限均为1×10^(5) copies/µL,4种弧菌分别进行单重qPCR的最低检出限均为1×10^(1) copies/µL,扩增效率均接近100%。qPCR的灵敏度均高于常规PCR。特异性实验结果表明,4种目的弧菌DNA扩增出特异性曲线,其他的非目的基因未被扩增出扩增曲线。结论该方法准确度和灵敏度高,前处理简单快速,适用于4种食源性致病弧菌的荧光定量PCR快速检测。
- 马晨晨马晨晨宋昌彦彭国瑜刘平平李云峰许剑锋
- 关键词：副溶血性弧菌霍乱弧菌拟态弧菌创伤弧菌荧光定量聚合酶链式反应
- 猫疱疹病毒Ⅰ型荧光定量聚合酶链式反应检测方法的建立
- 2024年
- 研究旨在建立实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测猫疱疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus type Ⅰ,FHV-1)的方法,用于检测临床上猫的上呼吸道传染病样本。据GenBank已发表的猫疱疹病毒的gE基因序列的保守区域设计并合成一对特异性引物及探针,建立FHV-1的实时荧光定量PCR检测方法,对此方法进行特异性、灵敏度及重复性的验证,并对广东佛山某流浪猫基地猫疱疹病毒的流行情况进行调查,即对该基地的94份临床样品进行检测。结果表明:研究成功建立了FHV-1实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法,此方法特异性强,与大多流行的犬猫病毒均未出现交叉反应;敏感性高,最低检出限为10 copies·μL^(-1);重复性好,批内变异系数为0.29%~0.71%,批间变异系数为0.88%~1.38%。应用此方法在94份临床样品中检出28份FHV-1核酸阳性样品。综上所述,研究建立的FHV-1荧光定量聚合酶链式反应方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,为临床上FHV-1的快速检测提供了可行的解决方案。
- 陆媛倩姜骏飞程松郑晓峰李丕顺孙相鑫
- 关键词：聚合酶链式反应
- Taq Man探针实时荧光定量聚合酶链式反应检测低温酸乳中常见的霉菌和酵母被引量：1
- 2024年
- 为提高低温酸乳中霉菌和酵母菌检测效率,根据保守基因延伸因子1α(elongation factor 1α,EF-1α)序列分别针对霉菌与酵母菌设计引物与探针,利用实时荧光定量聚合酶链式反应,基于TaqMan探针分别建立霉菌和酵母菌检测方法。以低温酸乳中常见真菌与乳酸菌基因组DNA为扩增模板进行特异性检验,并对方法灵敏度与重复性进行检验,同时构建标准曲线。结果表明:根据EF-1α基因设计的引物与探针特异性良好;所构建的标准曲线相关系数均大于0.99;该方法检测酵母菌的灵敏度为101 CFU/mL,检测霉菌的灵敏度为102 CFU/mL;重复性检验中组内与组间的变异系数均小于2%,表明方法具有良好的可靠性与稳定性,适用于低温酸乳中霉菌与酵母菌的快速检测。
- 张捷陈勃旭杜海宽张子仑严陶陶陈佳周巍
- 关键词：TAQMAN探针霉菌酵母
- 实时荧光定量聚合酶链式反应检测石蜡样本结核DNA时有关切片量的控制及优化
- 2024年
- 目的:探索实时荧光定量检测石蜡样本组织结核DNA时满足实验和诊断需要的切片量。方法:收集2022年11月—2023年5月病理科就诊患者的结核DNA检测标本。分析不同大小的石蜡样本组织在不同切片厚度和不同切片数量影响下的样品DNA浓度和纯度,以及聚合酶链式反应(PCR)结果和抗酸的符合率。结果:通过实时荧光定量PCR检测216例病理诊断疑似为结核患者的石蜡样本,发现规范前DNA浓度波动范围为2.25~1373.00 ng/μL,纯度波动范围为1.10~2.20;规范后DNA浓度波动范围为6.20~1380.00 ng/μL,纯度波动范围为1.80~2.27。结论:实时荧光定量PCR检测石蜡样本结核DNA时,严格规定的切片厚度、切片数量有利于确保样本DNA的浓度和纯度,确保实验的有效性,提升结核DNA检测结果和抗酸染色结果的一致性,对结核病理诊断有重要价值。
- 蒋鸿雁何姣王浩君陈忠宜
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 多重实时荧光定量聚合酶链式反应在芝麻酱掺假鉴别中的应用
- 2024年
- 目的研究基于分子生物学技术,建立多重实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测芝麻酱中的植物源性成分,实现芝麻酱的快速掺假鉴别,突破单标准单物种检测的局限性。方法该研究以芝麻2S albumim mRNA基因、花生Ara b2基因、大豆Lectin基因、玉米adh1基因设计特异性引物和探针,优化反应体系,建立多重实时荧光定量PCR技术检测芝麻酱中的芝麻源性成分、花生源性成分、大豆源性成分、玉米源性成分,并应用于市售的芝麻酱样本检测分析。结果该方法高效低成本,特异性好,对小米、绿豆等10种非目标源性成分无特异性扩增;对芝麻源性成分、花生源性成分、大豆源性成分、玉米源性成分的最低检出限为100 pg/μL,具有较高的灵敏度;应用建立的方法,对市售21份芝麻酱样本进行检测分析,检测结果与标签标注不符合的有4份,标签标注符合率为80.95%,与参比方法检测结果一致。结论建立的多重实时荧光定量PCR技术对加工成品的检测具有较好的适用性,为芝麻酱的掺假鉴别提供了一种新的分子生物学方法。
- 陈茵茵梁颖思陈宝欣丁清龙苏章庭韩志杰陈玥郑玥
- 关键词：芝麻酱
