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基于Vero E6细胞的水痘-带状疱疹病毒抗膜抗原荧光抗体试验的建立与评价被引量：1: 2022年; 目的建立并评价基于非洲绿猴肾细胞(Vero E6)的水痘-带状疱疹病毒(VZV)抗膜抗原荧光抗体(FAMA)试验方法。方法在VZV-Oka减毒活疫苗株在Vero E6细胞中的适应培养毒株VZV-Oka-E6的基础上,首先使用3个不同感染剂量(10、10和10TCID)的VZV-Oka-E6病毒株感染Vero E6细胞,于显微镜下观察病变情况确定最佳的VZV-Oka-E6病毒株感染量;然后对比使用不同固定液固定感染细胞后制备的固定抗原片可检测到的灵敏度确定最优的固定液,从而建立基于Vero E6细胞的中和抗-VZV检测FAMA试验方法;采用建立的FAMA法,检测不同效价的VZV免疫球蛋白国际标准品,确定该方法的敏感性;检测人单纯疱疹病毒(HSV)1、2型特异性抗体,评价该方法的特异性;分别使用同一批次制备和4个不同批次制备的VZV感染细胞固定抗原片检测VZV免疫球蛋白国际标准品的中和抗-VZV,确定该方法的批内和批间重复性;检测已知的3种效价的VZV免疫球蛋白国际标准品,评价该方法的相对准确性。分别应用新建立FAMA法和ELISA法检测20(人)份单采血浆样品的抗-VZV效价,对2种试验检测结果做Spearman相关性分析。结果通过优化确定了FAMA试验中最佳的VZV-Oka-E6病毒株感染量为10TCID,-20℃预冷的丙酮作为固定液。FAMA试验检测中和抗-VZV效价的灵敏度为31.25 mIU/mL;检测HSV 1、2型特异性抗体时结果为阴性;使用同一批次和4个不同批次制备的VZV感染细胞固定抗原片检测VZV免疫球蛋白国际标准品,变异系数分别为29.95%和26.71%;对3种效价VZV免疫球蛋白国际标准品的检测(值)与其理论值一致;FAMA法和ELISA法对20份单采血浆样品检测抗-VZV结果的相关系数为0.268。结论所建立的FAMA试验检测中和抗-VZV效价具有良好的敏感性、特异性、重复性和相对准确性,可用于单采血浆和水痘-带状疱疹免疫球蛋白(VZIG)产品的中和抗-VZV效价检测。; 袁典王卓贾俊婷杨姝孙珍珠汪琳王蕊章金刚马玉媛

水痘-带状疱疹病毒膜抗原荧光抗体试验的建立与评价被引量：2: 2018年; 目的建立用于检测血清中水痘一带状疱疹病毒（varicella-zoster virus，VZV）特异性抗体的膜抗原荧光抗体（fluorescent antibody to membrane antigen，FAMA）试验并对其进行验证和评价。方法用VZV感染细胞作为抗原制备抗原载玻片，以异硫氰酸荧光素标记的羊抗人IgG为二抗建立FAMA试验。对试验的灵敏度、特异性和重复性进行验证。用FAMA试验和市售ELISA试剂盒对200份血浆样品中的抗VZV抗体进行检测。采用Spearman秩相关检验对两种方法的检测结果进行比较。结果FAMA试验的灵敏度为0．04IU／ml，与常见的人疱疹病毒（单纯疱疹病毒1和2型、人巨细胞病毒）没有交叉反应且重复性良好。经FAMA试验检测，200份血浆样品的抗体阳性率为93．5％，抗体几何平均效价为1：18．1，检测结果与市售ELISA试剂盒的符合率为90．0%。两种方法的检测结果具有相关性，Spearman秩相关系数为0．49，P〈O．0001。结论建立的方法具有良好的灵敏度、特异性和重复性，可用于血清中抗VZV抗体的检测。; 袁萍徐水民应通峰王月红费哲颖王明丽兰永发张林亚朱为; 关键词：荧光抗体技术免疫球蛋白G

应用膜抗原荧光抗体试验检测人群水痘-带状疱疹病毒血清抗体阳性率被引量：12: 2009年; 目的应用膜抗原荧光抗体试验（FAMA）方法调查广州地区正常人群水痘-带状疱疹病毒（VZV）的流行现状。方法采用以VZV感染细胞作为抗原、异硫氰酸荧光素（FITC）标记的羊抗人IgG作为二抗的FAMA试验，对随机抽取的592份正常人血清标本进行特异性VZV抗体检测。结果FAMA试验检测VZV抗体与其他的疱疹类病毒的相应抗体不产生交叉反应。应用此法检测592份血清标本中，VZV抗体总体阳性率为76．52％；1～、4～、7～、14～、20～、30～、40～及≥50岁年龄组血清抗体阳性率分别是14．67％、51．56％、73．91％、91．26％、92．78％、95．65％、98．11％和100％。1～3岁年龄组血清抗体阳性率最低，血清抗体阳性率随年龄的增大而升高；不同性别间阳性率差异无统计学意义（P〉0．005），不同年龄组间阳性率差异有统计学意义（P〈0．001）。结论采用FAMA法检测人群中VZV抗体与其他疱疹类病毒的相应抗体不产生交叉反应，是VZV抗体检测的可靠方法。应以1～3岁儿童为VZV疫苗免疫的首选对象.; 刘静静王明丽甘霖廖伟娇陈敬贤; 关键词：水痘-带状疱疹病毒

苏州市流动人口疟疾间接荧光抗体试验监测被引量：1: 2008年; 汪树铭钱金凤吴秀珍吴敬之胡一河; 关键词：间接荧光抗体试验流动人口疟疾本地儿童

应用间接荧光抗体试验调查黄淮流域不同媒介地区当前疟疾流行水平的研究被引量：4: 2008年; 目的通过对黄淮流域居民进行间接荧光抗体试验(IFAT)调查,评价黄淮流域不同媒介地区疟疾流行水平。方法2006和2007年选择沿黄淮流域单一中华按蚊为媒介的安徽省宿州、怀远和砀山县、河南省永城县,嗜人按蚊与中华按蚊复合媒介地区的河南省桐柏县和湖北省广水县,每县分别选择2个自然村,采用重复横向调查方法,连续两年于疟疾流行季节末期对调查点居民(≥1.5岁)采制滤纸干血滴,用IFAT检测人群疟疾抗体水平,计算人群疟疾抗体阳性率与阳性几何平均滴度倒数(GMRT);分别以20岁以下年龄组的抗体阳性率通过可逆催化模型估算这些地区的疟疾感染概率,并与当年疟疾发病率进行比较。结果2006和2007年安徽、河南和湖北等3省6县12个自然村的平均抗体阳性率分别为6.1%(153/2489)和12.0%(295/2458),其中单一中华按蚊媒介地区2007年的平均抗体阳性率12.0%(194/1624)]明显高于2006年的4.1%(69/1670)(χ2=69.9,P<0.01);而嗜人按蚊和中华按蚊复合媒介地区平均抗体阳性率分别为10.3%(84/819)和12.1%(101/834),两年的差异无统计学意义(χ2=0.17,P>0.05)。2007年12个自然村平均阳性GMRT为26.2,略高于2006年的22.7。可逆催化模型估算结果显示,单一中华按蚊媒介地区和复合媒介地区年感染概率均明显高于当地疫情报告的疟疾发病比率,前者平均分别为后者的117.3倍和17.2倍。在抗体阳性者中,有87.8%为疟疾无症状者,表明黄淮流域地区存在一定比例的无症状潜在传染源。结论黄淮流域地区疟疾实际发病远较报告疫情为高,单一中华按蚊为媒介地区疟疾发病呈回升趋势,嗜人按蚊与中华按蚊复合媒介地区疟疾传播相对稳定。; 郑香房文黄芳沈毓祖苏云普黄光全周水森; 关键词：疟疾间接荧光抗体试验抗体阳性率

RT-PCR和免疫荧光抗体试验检测猪瘟病毒的比较研究被引量：5: 2007年; 根据已发表的CSFV序列合成1对引物，以猪瘟病毒（CSFV）兔化弱毒株为模板，建立并优化了检测CSFV的RT—PCR方法，并与直接荧光抗体试验（DFA）进行比较，检测了15份临床疑似病料。结果如下：应用RT—PCR对CSFV兔化弱毒株RNA进行扩增，获得与预期大小相符长为509bp的特异性目的片段，敏感性达到10Pg的CSFV—RNA，对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病毒（PRV）和猪2型圆环病毒（PCV2）进行同条件扩增均为阴性，RT—PCR产物测序结果与文献报道的CSFV不同毒株的核苷酸序列同源性达到95％～99％；15份临床疑似病料应用RT—PCR的检出率为66．7％，而应用免疫荧光试验的检出率为60．0％，二者的总符合率为80％。表明RT—PCR方法比DFA更敏感，两种方法均可用于猪瘟的快速诊断。; 俞伏松车勇良江斌吴胜会林琳陈少莺林天龙; 关键词：猪瘟病毒

牛瑟氏泰勒虫病动物模型及间接荧光抗体试验的建立: 本试验首先选择了严重免疫缺陷(SCID)鼠作为实验动物模型研究对象，按Arai等方法给SCID小鼠置换正常牛红细胞，结果SCID鼠体内有90％左右红细胞被牛红细胞所置换。给SCID小鼠人工感染牛瑟氏泰勒虫，通过血液涂片镜...; 姜铁民; 关键词：动物模型间接荧光抗体试验血红蛋白减少; 文献传递

鸭疫里默氏菌不同血清型在直接和间接荧光抗体试验中的交叉反应被引量：8: 2006年; 秦春雷张大丙; 关键词：鸭疫里默氏菌间接荧光抗体试验血清型鸭传染性浆膜炎鸭大肠杆菌病

小鹅瘟病毒荧光抗体试验的建立与应用被引量：1: 2005年; 将小鹅瘟病毒（GPV）分离毒接种成年健康家兔，获得兔抗GPV高免血清，由此制备兔抗GPV荧光抗体．采用直接荧光抗体试验对人工感染鹅胚、雏鹅及自然病例进行检测．结果表明：该方法可以用于病毒抗原的检测，快速准确且肠的含毒量高于肝脏．; 郑大恒; 关键词：小鹅瘟病毒荧光抗体

建立膜抗原荧光抗体试验评价北京株冻干水痘疫苗免疫效果被引量：8: 2005年; 为了建立用于水痘疫苗接种后血清中特异性抗体检测的膜抗原荧光抗体(FAMA)法,并对接种水痘疫苗后儿童血清中水痘特异性抗体进行检测,评价北京株水痘疫苗的免疫效果。以水痘带状疱疹病毒(VZV)感染细胞作为抗原制备成固定抗原玻片,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人IgG作为二抗建立FAMA法,并对该法的敏感性、特异性进行验证。运用此法对不同剂量北京株水痘疫苗接种后儿童血清中特异性抗体进行检测,分析儿童血清中水痘特异性抗体水平以及免后抗体阳转率,并与Oka株水痘疫苗进行比较。结果显示,FAMA法敏感性可达0.0196IU/ml,特异性好。应用此法检测300名观察者免前免后双份血清样本中抗VZVIgG,易感者中北京株水痘疫苗原苗(39810PFU/0.5ml)、2000PFU/0.5ml、500PFU/0.5ml接种组儿童血清免后抗体阳转率分别为100%、98.77%、85.42%,抗体几何平均滴度(GMT)分别为36.4、34.3、18.6,原苗与2000PFU间的抗体阳转率和GMT均无显著性差异(P>0.05),但原苗与500PFU、2000PFU与500PFU间的抗体阳转率和GMT均有显著性差异(P<0.05)。对照国产、进口Oka株水痘疫苗接种后抗体阳转率分别为95.35%、96.97%,抗体GMT分别为13.3、16.0,不同剂量北京株疫苗抗体阳转率与国产、进口Oka株疫苗相比,差别无显著性(P>0.05),但北京株疫苗原?; 谢云李秀玲刘立新何薇薇张中洋张晨宋衍燕陈海平周铁群; 关键词：水痘疫苗免疫效果

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