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- 基于生物合成的胆绿素可视化检测镉离子的质粒载体及其生物传感器和定量检测方法
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- NLRP3、NLRP12基因突变质粒载体构建及应用
- 2025年
- 目的:根据家族性寒冷性自身炎症综合征(familial cold autoinflammatory syndrome,FCAS)家族的NLRP3(p.V72M,c.214G>A)、NLRP12(p.R754H,c.2261G>A)基因突变位点,构建携带Wistar大鼠NLRP3、NLRP12突变的基因质粒载体。方法:依据氨基酸同源性,设计大鼠NLRP3、NLRP12基因突变质粒,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法扩增目的基因并回收,双酶切并连接在pCMV-mCherry-MCS-Neo载体上,连接产物转化感受态细胞,菌落PCR鉴定阳性转化子,质粒小提电泳并测序鉴定。结果:琼脂糖凝胶电泳显示,成功扩增出NLRP3、NLRP12突变基因,基因突变质粒经酶切电泳及DNA测序证实,基因序列完全正确,重组质粒载体构建成功。结论:成功构建NLRP3、NLRP12基因突变的质粒载体,为进一步探讨NLRP3、NLRP12基因突变导致FCAS发病的机制研究以及NLRP3、NLRP12基因的功能性研究提供生物学基础。
- 黄毓娴郝金奇余艳琴贾喜梅张宏佳王利全裘瑞泽王秀春石继海
- 关键词:NLRP3基因突变
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