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抗阻运动诱导骨骼肌释放鸢尾素并改善2型糖尿病大鼠骨髓内皮祖细胞功能: 2025年; 目的:观察抗阻运动对2型糖尿病大鼠模型内皮祖细胞功能的影响并探讨肌因子鸢尾素在其间的作用机制。方法:40只6周龄健康雄性SD大鼠,取10只作为对照组,其余用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射进行糖尿病造模后随机分为模型组和模型运动组,每组15只。对照组和模型组动物于鼠笼内安静饲养,模型运动组进行12周(3次/周)尾部负重爬梯训练。末次训练后72 h,分离血浆、腓肠肌和股骨,测定各组织鸢尾素含量以及腓肠肌和股骨含纤连蛋白Ⅲ型结构域蛋白5(FNDC5)mRNA和蛋白表达量;分离培养骨髓内皮祖细胞,经外源性鸢尾素处理48 h后,利用CCK-8法、黏附实验分别检测细胞活力和黏附能力,通过裸鼠颈动脉损伤模型检测内皮修复能力,Western blot法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)/Akt/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路蛋白的表达量。结果:(1)在体实验:与对照组比较,模型组血浆、腓肠肌和股骨鸢尾素含量以及腓肠肌FNDC5 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05);与模型组比较,模型运动组血浆、腓肠肌和股骨鸢尾素含量以及腓肠肌FNDC5 mRNA和蛋白表达量升高(P<0.05);各组股骨FNDC5 mRNA和蛋白表达无显著性变化(P>0.05)。(2)细胞实验:①内皮祖细胞未经鸢尾素处理:与对照组比较,模型组内皮祖细胞活力、黏附功能以及内皮损伤修复能力降低(P<0.05),PI3-K、Akt、eNOS蛋白表达下调(P<0.05);与模型组比较,模型运动组内皮祖细胞功能改善(P<0.05),PI3-K、Akt、eNOS蛋白表达上调(P<0.05)。②内皮祖细胞经鸢尾素处理:与未经鸢尾素处理组比较,补充鸢尾素后模型组和模型运动组内皮祖细胞功能提升(P<0.05),PI3-K、Akt、eNOS蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论:规律抗阻运动能够改善2型糖尿病大鼠内皮祖细胞功能,其机制可能与骨骼肌释放的肌因子鸢尾素调控PI3-K/Akt/eNOS信号通路有关。; 寇猛胡好张勇陈亚东; 关键词：抗阻运动骨骼肌内皮祖细胞

银杏内酯B拮抗骨髓内皮祖细胞内质网应激损伤及其分子机制研究: 第一章银杏内酯B在体外对内质网应激介导的骨髓内皮祖细胞损伤拮抗作用【实验目的】探讨银杏内酯B(Ginkgolide B、GB)在体外对内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的人...; 马长淞; 关键词：银杏内酯B 骨髓内皮祖细胞线粒体功能障碍内皮损伤

黄芪甲苷促糖尿病皮肤溃疡大鼠骨髓内皮祖细胞动员的机制: 2024年; 目的探讨黄芪甲苷(AS-IV)调控基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号轴对糖尿病皮肤溃疡(DSU)大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)动员至外周血的影响。方法选取24只SPF级SD雄性大鼠腹腔注射30 mg/kg 1%(质体比)链脲佐菌素,制成2型糖尿病大鼠模型,再于腰背部两侧各剪取直径为2 cm的圆形全层皮肤,制成糖尿病大鼠皮肤溃疡模型,后随机分为AS-IV组(50 mg/kg AS-IV)、阻滞剂组(50 mg/kg AS-IV+5 mg/kg AMD3100)和模型组,同时设置空白组(n=8),采用腹腔注射给药,模型组和空白组用等体积0.9%的NaCl处理,采集第10天大鼠外周血、股骨骨髓和创面新生组织,流式细胞术检测各组大鼠外周血EPCs数量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠外周血、股骨骨髓和创面新生组织SDF-1α和CXCR4的蛋白表达情况;同时检测各组创面愈合率。结果造模后第10、21天各组大鼠创面愈合率比较,空白组愈合最快,模型组愈合最慢,AS-IV组愈合情况优于模型组和阻滞剂组,差异有统计学意义(均P<0.05)。造模后第10天空白组、AS-IV组、阻滞剂组外周血EPCs阳性率均显著高于模型组(均P<0.05),阻滞剂组外周血EPCs阳性率均显著低于AS-IV组(P<0.05)。造模后第10天模型组创面、血清、骨髓SDF-1α和CXCR4的蛋白表达均为最少,空白组的蛋白表达最高(均P<0.05),AS-IV组创面、血清、骨髓SDF-1α和CXCR4的蛋白表达显著高于阻滞剂组和模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芪甲苷通过调控SDF-1α/CXCR4信号轴,促进糖尿病溃疡大鼠内皮祖细胞从骨髓动员和迁移至外周血,可作为种子细胞参与糖尿病溃疡创面血管新生,以促进糖尿病皮肤溃疡愈合。; 张璐瑶蔡诗敏张熙宋小琴邹晓玲肖郁婷杨莹危洋黄鸿宇熊武; 关键词：黄芪甲苷皮肤溃疡内皮祖细胞基质细胞衍生因子1Α

DCE-MRI联合脂肪酸代谢组学评价兔糖尿病重症肢体缺血骨髓内皮祖细胞功能: 2024年; 目的探究动态对比增强磁共振成像(dynamic contrast enhanced magnetic resonance imaging,DCE-MRI)微血管渗透性参数和脂肪酸代谢组学评价糖尿病(diabetes mellitus,DM)重症肢体缺血(critical limb ischemia,CLI)兔股骨上段骨髓内皮祖细胞(bone marrow endothelial progenitor cells,BMEPCs)功能。材料与方法 36只雄性新西兰大白兔中随机选取18只兔静脉注射四氧嘧啶构建DM模型兔,其中造模成功的DM兔12只,6只DM造模失败兔处以安乐死。12只DM兔和12只非DM兔行右侧股动脉结扎术分别作为DM合并CLI(DM+CLI)组和单纯CLI组,术后两组各存活10只。6只非DM兔手术暴露右侧股动脉不结扎作为假手术对照(Control)组(n=6),全部存活。各组在术后第0、4周行右侧股骨上段DCE-MRI检查,于术后第4周检测外周血内皮祖细胞和右侧股骨上段BMEPCs数量、BMEPCs迁移和血管生成功能以及骨髓液相色谱-质谱脂肪酸代谢组学,并计算骨髓微血管密度(microvessel density,MVD)。结果与CLI组和Control组相比较,DM+CLI组术后第4周股骨上段骨髓Ktrans、Kep、Ve值增加(P<0.05),骨髓MVD减少,骨髓棕榈油酸、单不饱和脂肪酸/多不饱和脂肪酸比值以及硬脂酰辅酶A去饱和酶1活性指数减少(P<0.05),延长酶活性指数增加(P<0.05)。DM+CLI组BMEPCs动员、迁移和血管生成能力受损(P<0.05)。术后第4周右侧股骨上段骨髓Ktrans、Kep、Ve值、骨髓脂肪酸合成代谢相关指标均与BMEPCs迁移和血管生成功能存在相关性(P<0.05),对DM+CLI组和CLI组相关参数进行相关性分析,BMEPCs动员能力与Ktrans、Kep、Ve值呈负相关(P<0.05)。结论 DCE-MRI联合脂肪酸代谢组学评价DM+CLI兔骨髓BMEPCs功能是可行的,可以为调脂改善BMEPCs功能和预防截肢的病理生理机制提供定量影像学证据。; 费紫嫣高宇凡李亮刘昌盛查云飞; 关键词：糖尿病重症肢体缺血内皮祖细胞代谢组学

ABCC1/S1P3介导血小板生成素修复ITP骨髓内皮祖细胞的作用及机制研究: 研究背景:原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)是一种获得性出血性疾病,目前治疗主要为免疫抑制剂和促血小板生成两大类。临床上常用的促血小板生成素(thrombop...; 王钰; 关键词：ITP

骨髓内皮祖细胞HIF-1α低表达在异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病中的作用及机制研究: 目的:探究异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)患者骨髓(BM)内皮祖细胞(EPC)内缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达水平是否参与介导BMEPC损伤,探究其生物学机制,基于机制研...; 张温凯; 关键词：造血干细胞急性移植物抗宿主病骨髓内皮祖细胞线粒体代谢

敲减ATR基因对大鼠骨髓内皮祖细胞衰老及其功能的影响被引量：1: 2022年; 背景:内皮祖细胞在血管内皮更新及修复中发挥重要作用,利用体外扩增的自体内皮祖细胞移植促进缺血部位血管新生,现已成为防治缺血性心血管疾病的新策略,但取自老年机体的内皮祖细胞在体外扩增中会出现细胞衰老迹象,难以发挥修复能力,研究表明DNA损伤与细胞衰老关系密切,DNA损伤检测点是调控DNA损伤的重要关卡。目的:通过慢病毒RNA干扰技术敲减大鼠骨髓内皮祖细胞中的ATR基因,探讨其在内皮祖细胞衰老进程中的作用。方法:将大鼠骨髓源内皮祖细胞进行分离、培养并鉴定,将分离出的内皮祖细胞继续培养至第3代,随机分为3组:未转染组(空白组)、阴性对照组、基因敲减组(ATR-RNAi组)。未转染组正常培养,阴性对照组、基因敲减组分别予以慢病毒RNAi及慢病毒ATR-RNAi稳定转染至第3,6天,通过qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中ATR mRNA和蛋白表达水平,β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞的衰老情况,MTT比色法检测各组细胞的增殖能力,Transwell实验和体外血管生成试剂盒分别检测各组细胞迁移能力及成血管功能,流式细胞术检测各组细胞周期变化。结果与结论:(1)与未转染组比较,ATR-RNAi组内皮祖细胞表达ATR mRNA和蛋白水平明显降低(P<0.01),表明ATR基因表达被有效敲减;(2)与未转染组比较,ATR-RNAi组蓝染细胞数量减少,表明衰老程度明显减轻(P<0.01);(3)与未转染组相比,ATR-RNAi组细胞增殖、迁移和成血管功能明显增强(P<0.05);(4)与未转染组比较,ATR-RNAi组处于G_(1)、G_(2)期的细胞百分率明显减少,S期细胞百分率显著增多(P<0.05);(5)结果表明,敲减ATR基因表达可以延缓内皮祖细胞的衰老进程,同时增强内皮祖细胞的功能,减轻细胞周期的停滞。; 唐蜜秦臻韦正新倪鸣柴小康; 关键词：内皮祖细胞慢病毒转染细胞衰老细胞功能

回阳生肌膏抗小鼠骨髓内皮祖细胞功能损伤的研究被引量：4: 2022年; 目的观察回阳生肌膏对过氧化氢(H;O;)诱导的小鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)功能损伤的影响。方法通过密度梯度离心法联合差速贴壁法提取、分离、培养小鼠骨髓EPCs,观察细胞形态及采用FITC标记的荆豆凝集素-1联合Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)双摄取法鉴定EPCs。制备回阳生肌膏水提取物,采用细胞增殖/毒性试剂盒(CCK-8)筛选出最大无毒质量浓度(C)。针对回阳生肌膏水提取物进行化学成分定性分析。以0.12 mL/L H_(2)O_(2)刺激EPCs模拟糖尿病足溃疡氧化应激状态建立模型,将细胞密度调整至5×10^(8)L^(-1),分别种于培养板,5孔为1组。将细胞分为空白对照组,模型组,回阳生肌膏高、中、低剂量组。空白对照组与模型组不予干预,各给药组分别予回阳生肌膏水提取物高剂量(C)、中剂量(C/2)、低剂量(C/4)。采用CCK-8法、Transwell实验、小管形成实验分别检测细胞的增殖、迁移、小管形成功能,酶联免疫吸附测定(ELISA)及硝酸还原酶法分别检测细胞上清液中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)、一氧化氮(NO)的表达情况。结果提取的EPCs诱导培养至第7天经鉴定细胞为小鼠骨髓EPCs。确定C为50 mg/L,回阳生肌高、中、低剂量组的剂量分别为50、25、12.5 mg/L。回阳生肌膏水提取物中共有黄芪甲苷、人参皂苷、肉桂醛等35种成分。与空白对照组比较,模型组OD值降低(P<0.01),迁移细胞数减少(P<0.05),小管形成数量减少、总分支长度缩短(P<0.01),VEGF、SDF-1α、NO含量均降低(P<0.01);回阳生肌膏中、低剂量组OD值均升高(P<0.01),回阳生肌膏中剂量组迁移细胞数增多(P<0.01),VEGF、SDF-1α含量均降低(P<0.05,P<0.01),回阳生肌膏低剂量组VEGF、SDF-1α、NO含量均降低(P<0.01)。与模型组比较,回阳生肌膏高、中、低剂量组OD值均升高(P<0.01),小管形成数量均增多(P<0.01),SDF-1α含量均升高(P<0.01);回�; 周敏周敏谭崇赋徐旭英; 关键词：内皮祖细胞增殖迁移血管新生小鼠

PINK1介导的线粒体自噬对大鼠骨髓内皮祖细胞衰老及其功能的影响被引量：6: 2022年; 目的采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术敲减大鼠骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)中磷酸酶和张力蛋白同源物诱导激酶1(PTEN-induced putative kinase 1,PINK1),探讨PINK1介导的线粒体自噬对EPCs衰老及其功能的影响。方法分离培养大鼠骨髓EPCs并鉴定,EPCs计数后随机分为空白组、阴性对照组(NC siRNA)和PINK1转染组(PINK1 siRNA)。qRT-PCR与Western blot检测各组PINK1 mRNA与蛋白的表达情况;以最佳敲减时间为据点选择不同时间点模拟衰老进程,SA-β-半乳糖苷酶染色法及p16蛋白表达评估细胞衰老情况;CCK-8、Transwell小室、体外血管生成试剂盒检测细胞增殖、迁移、成血管功能;流式细胞术检测细胞ROS水平,Western blot检测PINK1、Parkin、LC3、p62的表达,透射电镜观察线粒体及自噬小体情况。结果转染PINK1 siRNA 48 h后,PINK1被有效敲减。转染48 h和96 h后,与空白组相比,PINK1 siRNA组衰老细胞蓝染阳性率和p16蛋白表达水平均明显上升;细胞增殖、迁移和成血管功能明显降低,ROS水平明显升高;PINK1、Parkin、LC3蛋白表达明显下调,而p62蛋白明显上调;透射电镜下PINK1 siRNA组线粒体肿胀变形,自噬小体减少。结论PINK1基因的下调会加剧EPCs的衰老,PINK1介导的线粒体自噬可能参与并调节了EPCs的衰老和功能。; 唐蜜石永芳肖珍梁梅秦臻; 关键词：内皮祖细胞细胞功能

骨髓内皮祖细胞的分离培养基和分离方法: 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及骨髓内皮祖细胞的分离培养和分离方法。通过本发明中提供的培养基配合本发明提供的方法来培养EPC，可以使EPC快速的生长增殖，5～10ml的骨髓，在20天左右便可得到5×10<Sup>7<...; 陈海佳葛啸虎王一飞张梦晨王小燕; 文献传递

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