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铝胁迫对酸性红壤古菌amoA基因 多样性的影响分析 被引量:2 2021年 通过PCR-RFLP技术构建红壤丘陵区土壤氨氧化古菌amoA基因 文库,比较分析典型森林土和农田土中氨氧化古菌种群结构对铝胁迫的响应。通过对628个amoA基因 克隆子进行了PCR-RFLP指纹图谱分析,共获得62个独特的基因 操作分类单元(operational taxanomical uints,OTUs),进一步对62个OTUs开展Blast和RDP分类分析(相似性97%-100%),结果表明:森林和农田土壤样品中100%的氨氧化古菌属于泉古菌门(Crenarchaeotes),分布于4个基因 族(Cluster1-4),Cluster 1在所有测试样品中占明显优势。农田土壤中氨氧化古菌的丰度和多样性要高于森林土壤,但随着铝胁迫浓度的增加,农田土壤中氨氧化古菌丰度和多样性降低更明显,均匀度却有所上升。可见,铝胁迫导致土壤氨氧化古菌群落结构改变,高铝胁迫能促使氨氧化古菌发生适应性变化,有可能演变出优势种群。 尹丽 刘仁绿 廖永辉 宋勇生 宋勇生关键词:红壤丘陵 铝胁迫 氨氧化古菌 水钠锰矿提高红壤性水稻土N2O释放速率和氨氧化细菌amoA基因 丰度 被引量:1 2020年 【目的】土壤中的氧化亚氮(N2O)来源于硝化与反硝化作用,锰可与硝化或反硝化作用产物反应产生N2O或氮气,已有研究表明土壤中锰含量高会影响硝化作用。因此,本试验以水钠锰矿(KMnO2·H2O)与土壤硝化作用与反硝化作用的生物化学耦合反应为切入点,研究水钠锰矿的添加对土壤N2O释放速率及微生物的影响,进一步认识N2O释放与土壤环境因子的相互关系。【方法】以红壤性水稻土为供试土壤,通过微宇宙培养试验,在土壤中添加不同质量百分比的水钠锰矿(0%、0.1%、0.3%、0.7%、1.5%),预培养7天后,加入硫酸铵N 100 mg/kg继续培养14天。在培养第1、3、7、14天,采用气密性注射器抽取10 mL气体样品,气相色谱仪测定N2O含量;同时取土壤样品,比色法测定铵态氮与硝态氮含量。培养结束时,测定土壤pH,采用实时荧光定量PCR测定土壤16S rDNA与氨氧化细菌(AOB)amo A基因 拷贝数,高通量测序技术分析微生物群落组成及多样性。【结果】水钠锰矿提高了土壤N2O释放速率,增加了土壤N2O累积释放量,以添加0.1%水钠锰矿的N2O累积释放量最高,添加1.5%的最低。土壤铵态氮含量随培养时间的延长而迅速降低,硝态氮含量则迅速增加。水钠锰矿显著提高了土壤pH与表观N2O产量(N2O-N/NO3--N),pH随着水钠锰矿添加量的增加整体提高,N2O-N/NO3--N则随着水钠锰矿添加量的增加呈降低趋势。适量水钠锰矿显著增加了土壤细菌16S rDNA与氨氧化细菌(AOB)amoA基因 拷贝数,并显著提高了土壤16S rDNA与AOB amoA基因 拷贝数的比值,但随着水钠锰矿添加量的增加,细菌16S rDNA和AOB amoA基因 拷贝数的增加量整体降低;放线菌、变形菌与拟杆菌是所有处理中的优势菌门,通过非度量多维尺度分析发现不同处理间的微生物群落结构差异显著,未添加水钠锰矿处理与添加水钠锰矿1.5%处理的微生物群落结构差异最大,其他处理的微生物群落� 邢志强 左继超 付庆灵 胡红青 朱俊关键词:水钠锰矿 氨氧化细菌 硝化作用 基于amoA基因 扩增子高通量测序的氨氧化古菌多样性分析方法 被引量:4 2018年 【背景】对于环境样品中氨氧化古菌(Ammonia-oxidizing archaea,AOA)多样性的研究,利用amoA功能基因 作为分子标记会比16SrRNA基因 有更强的特异性和更高的分辨率,能更准确地反映环境样品中氨氧化古菌的种群结构和分布特征。然而,目前对amoA基因 扩增子高通量测序的分析存在两大限制因素:一是缺乏相应的amoA基因 参考数据库;二是AOA amoA基因 在种水平上的相似性阈值未知,分析过程中没有明确的划分种水平操作分类单元(Operational taxonomic unit,OTU)的阈值。【目的】构建基于amoA功能基因 序列分析氨氧化古菌多样性的方法,为基于高通量测序的功能微生物多样性分析提供参考。【方法】基于目前已通过分离纯化或富集培养获得的34株氨氧化古菌及功能基因 数据库中收录的环境样品amoA基因 序列,构建氨氧化古菌amoA基因 参考数据库。通过菌株间两两比对获得的amoA基因 相似度与16SrRNA基因 相似度的相关性分析,确定amoA基因 在种水平上的相似性阈值。基于MOTHUR软件平台,利用建立的参考数据库和确定的阈值对南海一个垂直水体剖面样品的amoA基因 序列进行多样性分析。【结果】构建了含有26 091条序列信息的古菌amoA基因 参考数据库,确定了89%作为分析过程中古菌amoA基因 划分种水平OTU的阈值,对南海水体样品氨氧化古菌的多样性分析结果很好地显示了南海不同深度水层水体中氨氧化古菌的种群结构和系统发育关系,有效揭示了南海氨氧化古菌的垂直分布差异。【结论】建立了基于amoA基因 高通量测序的氨氧化古菌多样性分析方法,此方法可以有效分析环境样品中氨氧化古菌的多样性。 何翔 吴佳鹏 焦黎静 温晓梅 王岩 欧林坚 洪义国关键词:功能基因 AMOA基因 氨氧化古菌 辽河口沉积物中16S rRNA和amoA基因 的丰度和多样性研究 近年来,全球人为来源活性氮的过量排放破坏了河口及海洋近岸生态系统,造成了部分生态功能丧失、生物多样性减少、水体富营养化、有害赤潮频发等现象。氮是生物地球化学循环中的重要生源要素,是限制河口生态系统生物生产力的元素之一,河... 张慧珍关键词:表层沉积物 古菌 AMOA基因 典范对应分析 辽河口沉积物16S rRNA和amoA基因 的丰度和多样性研究 近年来,全球人为来源活性氮的过量排放破坏了河口及海洋近岸生态系统,造成了部分生态功能丧失、生物多样性减少、水体富营养化、有害赤潮频发等现象。氮是生物地球化学循环中的重要生源要素,是限制河口生态系统生物生产力的元素之一,河... 张慧珍关键词:表层沉积物 氨氧化古菌 氨氧化细菌 三种因素对海水生物流化床启动期间营养盐去除及amoA基因 表达的影响 2017年 在实验室规模下,以旋转式生物流化床(CB-FSB)为研究对象,研究了初始总氨氮(TAN)、水温及滤料膨胀率3种条件下,海水生物流化床生物过滤功能启动期间TAN和亚硝酸盐氮(NO-2-N)去除及amoA基因 数量的变化。结果显示:生物流化床生物过滤功能启动所需时间随着水温的升高而缩短,在水温为15℃、20℃和25℃时,启动所需时间分别为27 d、25 d和23 d;初始TAN质量浓度的升高也会缩短生物流化床生物过滤功能启动所需要的时间,在初始TAN质量浓度为1 mg/L、2 mg/L、4 mg/L时,启动所需时间分别为24 d、22 d和21 d;在膨胀率为100%和150%时,启动所需时间无明显差别,分别为21 d和20 d,明显好于膨胀率为50%时启动所需时间27 d;amoA基因 的数量变化与TAN去除率的变化有一定的相关性,并随着初始TAN浓度的升高而增多,在4 mg/L时数量最多,达到2.76×10~7copies/g。 宋协法 王学超 董登攀关键词:循环水养殖 生物流化床 营养盐 功能基因 玉米秸秆深翻还田土壤氨氧化细菌amoA基因 多样性分析 被引量:5 2015年 以常规旋耕无秸秆还田(对照)、1年秸秆深翻还田、2年秸秆深翻还田土壤总DNA为模板,采用氨氧化细菌(Ammonia-oxidizing bacteria,AOB)的氨单加氧酶α亚基(amo A)基因 特异性引物扩增AOB amo A基因 ,构建amo A基因 文库。运用BLAST程序进行序列比较发现,玉米秸秆深翻还田土壤中分布有亚硝化弧菌属(Nitrosovibrio)、亚硝化螺菌属(Nitrosospira)和亚硝化单胞菌属(Nitrosomonas)微生物菌群,秸秆深翻还田土壤AOB amo A基因 序列主要与保护性耕作、长期施肥、间作、温室和植被恢复土壤中的amo A基因 序列相似;常规旋耕无秸秆还田土壤AOB amo A基因 序列主要与秸秆焚烧大田土壤和内蒙古草原土的amo A基因 序列相似。玉米秸秆深翻还田2年处理(SF-Ⅱ)AOB amo A基因 多样性指数最高,其次是玉米秸秆深翻还田1年处理(SF-I),常规旋耕无秸秆还田(CK)最低。 萨如拉 高聚林 于晓芳 闹干朝鲁 青格尔 赵吉睿关键词:氨氧化细菌 AMO A基因 枣树棉花间作与单作土壤氨氧化细菌amoA基因 多样性的比较与分析 被引量:2 2015年 以编码氨单加氧酶基因 amoA作为氨氧化细菌的功能基因 标志物,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和扩增产物序列分析方法,研究南疆枣树与棉花间作和单作不同栽培模式下土壤氨氧化细菌群落结构和多样性差异以及与土壤理化因子的相关性。结果表明,枣树与棉花间作改变了土壤氨氧化细菌群落结构组成,与纯枣林、单作棉田差异显著,相似性低于60%。间作复合系统内冠下区、近冠区及不同层次的土壤中氨氧化细菌群落结构具有水平和垂直方向的空间变异性。系统发育分析表明,枣树与棉花间作、纯枣林和单作棉田土壤中氨氧化细菌均隶属于β-变形菌纲(β-Proteobacteria)的亚硝化螺菌属(Nitrosospira)和不可培养的氨氧化细菌,以Nitrosospiracluster 3a为优势菌。间作土壤中还有cluster 3b、cluster 1和cluster 4,群落组成较单作丰富。典范对应分析结果显示,有机碳(TOC)、全磷(TP)、速效磷(RP)和硝态氮(NO3-N)含量对不同种植模式下氨氧化细菌的种群结构影响显著(P<0.05)。枣树与棉花间作显著提高了土壤氨氧化细菌的多样性,Shannon指数、均匀度指数和丰富度均高于纯枣林和单作棉田。土壤全磷、铵态氮、硝态氮、pH值和土壤含水量是显著影响多样性指数的关键理化因子(P<0.05)。 何贵伦 罗明 韩剑 徐金虹 王纯利 朱建雯关键词:农林复合系统 AMOA基因 黄东海泥质区沉积物氨氧化古菌和氨氧化细菌amoA基因 的空间分布 好氧氨氧化过程作为硝化作用的主要限速步骤,是氮的生物地球化学循环的关键环节,由氨氧化古菌(ammonia-oxidizing archaea,AOA)和氨氧化细菌(ammonia-oxidizing archaea,AO... 于少兰关键词:海洋沉积物 氨氧化古菌 氨氧化细菌 群落结构 文献传递 云南热泉中氨氧化古菌的accA基因 与amoA基因 丰度与环境因子NO_2^-和NO_3^-的相关性 被引量:2 2014年 【目的】氨氧化古菌(ammonia-oxidizing archaea,AOA)可能通过近期刚发现的3-羟基丙酸盐/4-羟基丁酸盐途径(3-hydroxypropionate/4-hydroxybutyrate cycle,HP/HB)来固定CO2,在海洋和土壤环境下进行化能自养型生长。云南热泉系统已被证明具有丰富的AOA多样性。本论文旨在调查云南不同热泉中,这种CO2固定途径的关健酶——乙酰辅酶A羧化酶基因 acc A和古菌氨单加氧酶基因 amo A,及原核微生物16S rRNA基因 的丰度变化,以及它们与环境因子的相关性。【方法】选择20处代表性热泉沉积物样品,通过荧光定量PCR技术,获得各目的基因 丰度;利用R软件包对各样点地化参数进行主成分分析(Principal Component Analysis,PCA),并通过Mantel test检验各目的基因 和地化参数间的相关性。【结果】细菌和古菌16S rRNA基因 的丰度范围分别在6.6×107至4.19×1011和1.27×106至1.51×1011拷贝/g沉积物;古菌acc A和amo A基因 的丰度范围为8.89×103至6.49×105和7.64×103至4.36×105拷贝/g沉积物,Mantel test结果显示acc A和amo A基因 丰度间具有极显著的相关性(R=0.98,P<0.001),两者又分别都与热泉内的NO2-和NO3-浓度存在显著相关,与p H值等其它环境因子没有明显统计学意义上的相关性。【结论】云南地区热泉间的细菌和古菌丰度,以及两者比例关系都存在较大差异;相关性的统计结果进一步证明了热泉环境下的氨氧化古菌是通过HP/HB途径进行CO2固定;本次研究并未发现氨氧化古菌的丰度与环境p H存在明显统计学意义上的相关性,这与常温土壤环境的相关研究结果存在不同。 宋兆齐 王莉 周恩民 王风平 肖湘 张传伦 李文均关键词:氨氧化古菌 AMOA基因 荧光定量PCR
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陈岭 作品数:2 被引量:15 H指数:2 供职机构:浙江大学生命科学学院 研究主题:AMOA基因 氨氧化细菌 AMOA 污水处理 种群分析 贾仲君 作品数:92 被引量:1,076 H指数:17 供职机构:中国科学院南京土壤研究所 研究主题:高通量测序 甲烷氧化 稻田 水稻土 土壤 朱亦君 作品数:13 被引量:161 H指数:9 供职机构:中国科学院亚热带农业生态研究所 研究主题:T-RFLP 红壤坡地 多样性 水稻土 AMOA基因 李君文 作品数:404 被引量:1,958 H指数:22 供职机构:军事医学科学院卫生学环境医学研究所 研究主题:饮用水 肠道病毒 大肠杆菌 三卤甲烷 聚合酶链反应 秦华 作品数:136 被引量:772 H指数:15 供职机构:浙江农林大学环境与资源学院 研究主题:丛枝菌根真菌 雷竹林 土壤 污染土壤 多氯联苯