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桃响应葡萄座腔菌侵染的转录组学分析
2024年
为探讨桃响应葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)侵染的分子机制,本研究以‘丰光’油桃作为研究材料,采用高通量测序技术对被B. dothidea侵染的桃枝干组织进行转录组测序,共筛选到1 463个差异表达基因(DEGs),其中上调911个,下调552个。差异表达基因注释到GO、KEGG数据库中的数目分别为1 231、255。GO功能分类结果显示DEGs主要富集在细胞组成、分子功能和生物学过程三个方面。细胞组成主要包括细胞组分、细胞、细胞器、膜等;分子功能主要集中于催化活性、核酸结合转录因子活性、转运活性、受体活性等;生物学过程主要富集在细胞过程、代谢过程、应激反应、生物调节等。KEGG分析结果表明差异表达基因涉及66个代谢途径,且主要富集在植物与病原互作、植物激素信号转导代谢通路。大量与植物抗病性、乙烯信号途径、钙信号途径相关的基因被B. dothidea侵染所激发。随机选取16个基因进行RT-qPCR定量分析,发现RT-qPCR结果与转录组测序结果趋势一致。本研究结果明确了桃响应B. dothidea侵染过程中相关基因的表达情况,为深入研究病原物的致病机理提供参考依据。
刘勇王富荣王会良艾小艳朱炜孙中海吕亮龚林忠何华平
关键词:流胶病转录组测序差异表达基因
茶树病害病原菌Botryosphaeria dothidea生物学特性研究
2024年
采用皿内测定方法,研究了河南省信阳市茶树叶部病害病原菌Botryosphaeria dothidea生物学特性。实验结果表明:Botryosphaeria dothidea能正常生长于PDA、OA和MEA培养基上,在MEA培养基上的生长速率较前两者略慢,产孢情况于OA培养基上相对较好。在不同营养因子影响下,病原菌的生长速度不相同,在以葡萄糖为碳素的培养基上菌株生长速度最快,以蛋氨酸作为氮素的培养基中生长速度最快。菌株生长的最适温度为25℃。菌株在液体培养基中可正常生长,菌落呈球形,并伴随新菌落的产生。最适pH值为6,能够适宜微酸环境,当pH值为8时菌株几近停止生长。
王谦尹舒蕾尹慧存占欣如苗方愉赵丹
关键词:茶树叶部病害生物学特性
3种葡萄座腔菌的检测方法比较
2024年
为精准检测葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的果树病害,基于B.dothidea的ITS序列设计常规PCR、巢式PCR和LAMP引物,对3种检测方法的灵敏度进行比较分析,依据研究结果选用巢式PCR和LAMP反应检测田间病样。结果表明,常规PCR、巢式PCR和LAMP检测方法均能特异性检测出B.dothidea。普通PCR检测到的DNA最低浓度为10^(-1)ng/μL,巢式PCR的检测限为10^(-4)ng/μL,LAMP方法的检测限为10^(-5)ng/μL。灵敏度较高的巢式PCR和LAMP方法都可用于检测B.dothidea引起的田间病害样品。LAMP方法检测田间疑似病害样品的检出率为65.0%、常规PCR为58.8%、巢式PCR为62.5%,而常规分离鉴定方法的检出率仅为27.5%。
王丽王丽侯珲涂洪涛柳友亮袁洪波
关键词:果树病害葡萄座腔菌聚合酶链式反应环介导等温扩增技术
茉莉酸甲酯对猕猴桃果实抗葡萄座腔菌过程中能量代谢和膜脂代谢的影响
2024年
【背景】由葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的软腐病是猕猴桃果实贮藏期的重要病害,对猕猴桃产业造成了严重的经济损失。茉莉酸甲酯(MeJA)是一类广泛存在于植物体内的生物信号分子,前期研究发现MeJA能够有效诱导猕猴桃果实抵御B.dothidea的侵染。【目的】分析MeJA对果实能量代谢和膜脂代谢的影响,深入解析MeJA介导的猕猴桃果实抗病机理。【方法】以‘红阳’猕猴桃(Actinidia chinensis cv.Hongyang)为试验材料,分3组进行试验:接种组(Inoculation),果实不经过MeJA处理,但接种B.dothidea;MeJA+接种组(MeJA+inoculation),果实经过0.1 mmol·L^(-1)MeJA熏蒸处理24 h并接种B.dothidea;对照组(Control),不作任何处理,即未经MeJA处理且不接种B.dothidea。所有果实于培养箱((20±1)℃、相对湿度90%—95%)中贮藏8 d。利用2,7-二氯二氢荧光素乙酰乙酸(H2DCFDA)染色分析果实活性氧(ROS)积累情况,测定丙二醛(MDA)含量和相对电导率,分析磷脂酶D(PLD)、脂肪酶(LPS)、脂氧合酶(LOX)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、H^(+)-ATP酶(H+-ATPase)、Ca^(2+)-ATP酶(Ca^(2+)-ATPase)和细胞色素C氧化酶(CCO)活性及其相应基因的表达,利用高效液相色谱仪(HPLC)检测三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、单磷酸腺苷(AMP)、草酰乙酸和延胡索酸的含量,并对接种组和MeJA+接种组猕猴桃果实膜脂代谢和能量代谢指标进行相关性分析。【结果】与接种组相比,MeJA处理抑制了接种B.dothidea果实中活性氧(ROS)的过量累积,减缓了膜脂过氧化程度,并有效降低了PLD、LPS和LOX活性及AcLOXs、AcPLD和AcLPS的表达,但提高了SDH、MDH、H^(+)-ATPase、Ca^(2+)-ATPase和CCO的活性及AcSDH、AcMDH、AcH^(+)-ATPase、AcCa^(2+)-ATPase和AcCCO转录水平,促进了ATP、ADP、草酰乙酸和延胡索酸的产生,延缓了果实能荷的下降,保障了果实抵御病原菌所需的能量。相关性分析表明,猕猴桃果实膜脂代谢与
肖刘华康乃慧李树成郑致远罗绕绕陈金印陈明向妙莲
关键词:茉莉酸甲酯猕猴桃果实葡萄座腔菌诱导抗性能量代谢
山核桃茶藨子葡萄座腔菌全基因组的分泌蛋白预测和功能分析
2024年
茶藨子葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea是一种世界性分布真菌,能引起山核桃干腐病,导致严重经济损失。为研究该病害的致病机理及筛选致病基因,通过各类预测与分析工具,对13130条蛋白序列的山核桃Carya cathayensis茶藨子葡萄座腔菌BDLA16-7全基因组进行了分泌蛋白预测及其功能分析。结果表明,在BDLA16-7全基因组的编码蛋白序列中,有898条蛋白序列符合典型分泌蛋白的特征,占总蛋白数的6.84%;分泌蛋白组的氨基酸组成呈现以下特征:非极性、疏水性氨基酸的含量明显高于极性、亲水性氨基酸,分别占43.6%和27.7%;蛋白质长度主要分布在100至600个氨基酸之间;分泌蛋白序列中通常以19个氨基酸构成信号肽,丙氨酸(A)是最常见的非极性氨基酸,而带电侧链的天冬氨酸(D)和谷氨酸(E)的出现频率较低;信号肽的切割位点-3和-1位置上的氨基酸相对保守,典型的氨基酸组合为A-S-A,符合A-X-A型的特征。此外,分泌蛋白组中包含600个序列可以完整注释其功能,其中229个分泌蛋白主要涉及碳水化合物的运输和代谢。在BDLA16-7分泌蛋白组中,共存在271个潜在的效应蛋白,其中14个与其他病原菌致病相关的效应蛋白具有较高的相似性。此外,BDLA16-7分泌蛋白组中包含293个碳水化合物活性酶,以糖苷水解酶家族成员为最多。明确了茶藨子葡萄座腔菌BDLA16-7分泌蛋白的长度分布特征,功能分类、信号肽切割位点的氨基酸组成、切割位点的类型和CAZymes数目,以及CAZymes中纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶的亚家族组成,并筛选到14个与致病性紧密联系的潜在效应蛋白。
吴怡豪诸葛君昊张立华周乐杜盛楠杜世平苏秀
关键词:分泌蛋白
Genome-wide identification and characterization of the PbrATG family in Pyrus bretschneideri and functional analysis of PbrATG1a in response to Botryosphaeria dothidea
2024年
The pear is an economic fruit that is widely planted around the world and is loved by people for its rich nutritional value. Autophagy is a self-protection mechanism in eukaryotes, and its occurrence often accompanied by the degradation of damaged substances in cells and the recycling of nutrients. Autophagy is one of the mechanisms through which plants respond to environmental stress and plays an important role in plant development and stress resistance. Functional studies of autophagy-related genes (ATGs) have been performed on a variety of plant species, but little information is available on the ATG family in pear (Pyrus bretschneideri Rehd). Therefore, we analyzed the evolutionary dynamics and performed a genome-wide characterization of the PbrATG gene family. A total of 28 PbrATG members were identified.Phylogenetic analysis showed that PbrATGs were more closely related to ATGs of European pear and apple. Evolutionary analysis revealed that whole-genome duplication (WGD) and dispersed duplication events were the main driving forces of PbrATG family expansion.Expression analysis of different pear tissues showed that all the genes were expressed in different pear tissues, and different PbrATGs are expressed at different times and in different locations. Moreover, all PbrATGs also responded to different abiotic stresses, especially salt and drought stress, which elicited the highest expression levels. Pear seedlings were subsequently infected with Botryosphaeria dothidea (B.dothidea). The results showed that different PbrATGs had different expression patterns at different infection stages. According to the gene expression data, PbrATG1a was selected as a key autophagy gene for further analysis. Silencing of PbrATG1a reduced the resistance of pear to B. dothidea, which resulted in increased lesions, reactive oxygen species (ROS) contents, antioxidant enzyme activity, and gene expression levels in the silenced pear seedlings after B. dothidea inoculation. In this study, a comprehensive bioinformatic analysis of
Yun WangXun SunZhenwu ZhangZhihua XieKaijie QiShaoling Zhang
关键词:AUTOPHAGYPEAR
苹果轮纹病拮抗真菌Pa2的分离与鉴定
2024年
为了分离和筛选对苹果轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)有抑制效果的拮抗真菌,通过组织分离法从苹果轮纹病抗性品种的枝条上分离出内生真菌。结果从40个分离菌株中得到5个拮抗真菌菌株,其中鉴定为砖红镰刀菌(Fusarium lateritium)的Pa2菌株对苹果轮纹病的抑制效果最好,抑制率为77.49%。菌株Pa2上清液不仅可以破坏B.dothidea菌丝细胞膜,还可以诱导果实中致病相关基因MdPR1的表达。在苹果接种B.dothidea后5 d,菌株Pa2对苹果轮纹病的控制效果为63.63%。
史冰柯王卓妮覃艮红黄天祥王丽涂洪涛袁洪波侯珲
关键词:苹果轮纹病拮抗真菌防效
葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)Bd00836、Bd00795和Bd07306基因对病菌生物学特性的影响
吴琪琪
梨轮纹病菌弱毒株携带产黄青霉病毒水平传染力测定
2023年
梨轮纹病是由葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起。前期获得了感染葡萄座腔菌产黄青霉病毒(Botryosphaeria dothidea chrysovirus 1,BdCV1)引起弱毒的梨轮纹病菌菌株LW-C和LW-1,为进一步明确BdCV1介导弱毒菌株是否具有作为候选田间生防资源的潜力,将LW-C和LW-1分别与地理来源不同的梨轮纹病菌(B.dothidea)分离株和危害梨树严重的梨腐烂病菌(Valsa pyri)分离株XJ-28进行对峙培养试验,测定获得携带病毒的衍生菌株生长速率及致病力。研究结果显示轮纹病菌菌株弱毒因子BdCV1均能以一定频率水平传染至不同种类致病菌株中,可引起部分受体菌株生长速率下降,不同程度地抑制其生长。接种梨枝条和果实,原始受体菌株所形成病斑扩展长度约为带毒衍生菌株的2倍至4倍,表明病毒可抑制其受体菌株致病力。以上研究结果揭示了BdCV1可水平传染至不同种类受体菌株中,寄主范围广,具有作为生防因子应用于梨真菌病害中的可行性。
高云静王天好胡旺成洪霓王国平王利平
关键词:轮纹病菌腐烂病菌生物防治
山核桃干腐病菌对甲基硫菌灵等4种杀菌剂的抗性
2023年
甲基硫菌灵、戊唑醇、咪鲜胺和苯醚甲环唑4种杀菌剂用于防治山核桃干腐病多年,为明确山核桃干腐病菌Botryosphaeria dothidea对其抗性发展现状,指导山核桃干腐病防治的精准用药,采用区分剂量法测定了山核桃干腐病菌对甲基硫菌灵、戊唑醇、咪鲜胺和苯醚甲环唑的抗性频率以及部分菌株对上述药剂的敏感性(EC_(50)),评价了甲基硫菌灵抗性菌株和敏感菌株在菌丝生长速率、产分生孢子器数量和致病力等方面的差异,分析了抗性菌株对甲基硫菌灵的抗性分子机制。结果表明:山核桃干腐病菌对甲基硫菌灵已经表现出严重抗性,抗性频率达到84.37%。随机选择4株敏感菌株的平均EC_(50)值为0.263μg/mL,而5株抗性菌株的相对抗性水平在49.9~84.8之间。供试所有菌株对戊唑醇、咪鲜胺和苯醚甲环唑均表现敏感。戊唑醇、咪鲜胺和苯醚甲环唑对随机选取的6个菌株的平均EC_(50)值分别为0.148、0.023和0.091μg/mL。在适合度方面,甲基硫菌灵敏感菌株的菌丝生长速率显著高于抗性菌株,产分生孢子器数量显著少于抗性菌株;在致病力方面,甲基硫菌灵敏感菌株与抗性菌株无显著差异。在甲基硫菌灵抗性菌株的β-tubulin序列中,未发现与苯并咪唑类杀菌剂抗性有关的氨基酸突变。
施心成李涛张传清
关键词:甲基硫菌灵抗性适合度

相关作者

张英
作品数:39被引量:128H指数:6
供职机构:北京林业大学
研究主题:常规PCR 试剂盒 植物组织 引物 枯病
张星耀
作品数:211被引量:1,403H指数:22
供职机构:中国林业科学研究院
研究主题:松材线虫 松材线虫病 杨树 赤松 溃疡病
王宇
作品数:42被引量:36H指数:3
供职机构:北京林业大学
研究主题:常规PCR 试剂盒 植物组织 引物 枯病
梁军
作品数:164被引量:1,017H指数:19
供职机构:中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
研究主题:杨树 赤松 杨树溃疡病 溃疡病 松材线虫
王璠
作品数:29被引量:130H指数:6
供职机构:江西省农业科学院
研究主题:流胶病 BOTRYOSPHAERIA 病害 假眼小绿叶蝉 果树