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原核表达dsRNA-StPPO发酵工艺优化及应用: 2025年; RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象,引发细胞内同源靶基因特异性抑制或沉默。RNAi技术已应用在害虫防治、抑菌、抗病毒等多个领域,但在控制农产品品质劣变中应用较少。该研究以大肠杆菌RNaseⅢ缺陷型菌株HT115(DE3)为发酵平台,以L4440载体为骨架构建重组载体,进行马铃薯多酚氧化酶StPPO编码基因的dsRNA表达与发酵条件优化,并进行dsRNA-StPPO生物学功能验证。结果表明,异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl thiogalactoside,IPTG)诱导剂浓度为0.6 mmol/L,诱导时间为6 h,外加酵母浸粉0.48%,温度为39℃,装瓶量为45 mL/250 mL,转速为189 r/min时,目标dsRNA的产量最高,达3.95μg/mL。浸泡dsRNA-StPPO溶液后,处理组鲜切马铃薯较对照组有较高的L、较低的a和褐变指数,且组织中的多酚氧化酶酶活力较低,说明施用dsRNA-StPPO可以抑制马铃薯polyphenol oxidase StPPO基因表达有效控制鲜切褐变现象。; 余金兰何倩李欣茹谭红晓路来风; 关键词：双链RNA 多酚氧化酶

一种dsRNA标准品及其制备方法和应用: 本发明属于生物技术领域，公开了一种dsRNA标准品及其制备方法和应用。在dsRNA标准品的制备方法中，通过对体外转录模版制备过程中所使用的引物组合物进行特殊的设置，在正链引物组和反链引物组中的正向引物的5’端均引入转录启...; 曹琼李惠杨鹏张莉莉方涵郭晴

一种抑制HBV基因表达的dsRNA分子及其应用: 本公开提供了一种抑制HBV基因表达的dsRNA分子及其应用。具体而言，本公开提供了抑制乙肝病毒(HBV)基因表达的dsRNA分子或ddsRNA分子，包括互补形成双链区的有义链和反义链，所述有义链和/或所述反义链包括15‑...; 张雪艳石延君王凌宇苏晓晔钟强邵昱王明晓

一种靶向谷蠹RDNCM基因的dsRNA及其应用: 本发明提供一种靶向谷蠹<I>RDNCM</I>基因的dsRNA及其应用，属于粮食储备害虫防控技术领域。该靶向谷蠹<I>RDNCM</I>基因的dsRNA，采用包括如下步骤的方法制备：将谷蠹的总RNA反转录为cDNA，以所...; 吴学友唐培安徐宏磊

一种抑制C5基因表达的dsRNA分子及其应用: 本发明公开了一种修饰的dsRNA分子及其应用。具体而言，本发明提供了一种抑制C5基因表达的dsRNA分子，包括互补形成双链区的正义链和反义链，所述正义链和/或所述反义链包括15‑25个核苷酸或由15‑25个核苷酸组成，该...; 张雪艳王凌宇苏晓晔石延君邵昱陈慧瑜

飞蝗肌球蛋白重链基因的dsRNA及其应用: 本发明涉及飞蝗肌球蛋白重链基因的dsRNA及其应用，本发明通过将合成飞蝗肌球蛋白重链基因干扰序列片段的dsRNA注入飞蝗体内，可以特异性的沉默飞蝗的肌球蛋白重链基因的mRNA表达，昆虫产卵时的挖掘频率显著减少，挖掘深度明...; 王慧敏杨美玲韩蕊

一种飞蝗钙调蛋白基因片段及其dsRNA和应用: 本发明涉及一种飞蝗钙调蛋白(Cam)基因片段及其dsRNA和应用，本发明依据飞蝗的Cam基因序列，获取了序列为SEQ ID NO:1的基因片段，并以此片段合成dsRNA。通过在飞蝗体内注射dsRNA，可以特异性沉默飞蝗钙...; 杨美玲王慧敏刘士理

高粱蚜MsCYP1基因、其编码蛋白、dsRNA及应用: 本发明申请公开了一种高粱蚜MsCYP1基因、其编码蛋白、dsRNA及应用，旨在解决当前利用RNA干扰技术进行高粱蚜生物防治时缺乏关键基因的技术问题。本申请筛选到了能够分泌到高粱细胞内的高粱蚜蛋白MsCYP1，该蛋白及其编...; 吴迪王道文雷康魏明舒李永邦胡志强牛梦迪张坤普

一种大肠杆菌不需要使用诱导剂表达dsRNA的方法: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种大肠杆菌不需要使用诱导剂表达dsRNA的方法。为了解决大肠杆菌表达dsRNA仍使用诱导剂IPTG的问题，本发明通过对骨架载体进行改造，将诱导型T7启动子替换为组成型启动子，在不添加...; 王艳丽李帅任秋蓉李涛张建珍包明繁梅凤月

一种靶向二斑叶螨GABA基因的dsRNA及其应用: 本发明涉及二斑叶螨防治技术领域，尤其涉及一种靶向二斑叶螨GABA基因的dsRNA及其应用。本发明的靶向二斑叶螨GABA基因的dsRNA，所述dsRNA是由如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列作为正义RNA和其反向互补...; 魏朋张谦余建新杨明何林

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