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原核表达dsRNA-StPPO发酵工艺优化及应用
2025年
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象,引发细胞内同源靶基因特异性抑制或沉默。RNAi技术已应用在害虫防治、抑菌、抗病毒等多个领域,但在控制农产品品质劣变中应用较少。该研究以大肠杆菌RNaseⅢ缺陷型菌株HT115(DE3)为发酵平台,以L4440载体为骨架构建重组载体,进行马铃薯多酚氧化酶StPPO编码基因的dsRNA表达与发酵条件优化,并进行dsRNA-StPPO生物学功能验证。结果表明,异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl thiogalactoside,IPTG)诱导剂浓度为0.6 mmol/L,诱导时间为6 h,外加酵母浸粉0.48%,温度为39℃,装瓶量为45 mL/250 mL,转速为189 r/min时,目标dsRNA的产量最高,达3.95μg/mL。浸泡dsRNA-StPPO溶液后,处理组鲜切马铃薯较对照组有较高的L、较低的a和褐变指数,且组织中的多酚氧化酶酶活力较低,说明施用dsRNA-StPPO可以抑制马铃薯polyphenol oxidase StPPO基因表达有效控制鲜切褐变现象。
余金兰何倩李欣茹谭红晓路来风
关键词:双链RNA多酚氧化酶
一种抑制LP(a)基因表达的dsRNA分子及其应用
公开了一种修饰的dsRNA分子及其应用。具体而言,提供了一种抑制Lp(a)基因表达的dsRNA分子,包括互补形成双链区的正义链和反义链,所述正义链和/或所述反义链包括15‑25个核苷酸或由515‑25个核苷酸组成,该ds...
陈慧瑜王凌宇苏晓晔任家凤邵昱钟强
一种靶向谷蠹RDNCM基因的dsRNA及其应用
本发明提供一种靶向谷蠹RDNCM基因的dsRNA及其应用,属于粮食储备害虫防控技术领域。该靶向谷蠹RDNCM基因的dsRNA,采用包括如下步骤的方法制备:将谷蠹的总RNA反转录为cDNA,以所述cDNA为模板,采用SEQ...
吴学友唐培安徐宏磊
飞蝗肌球蛋白重链基因的dsRNA及其应用
本发明涉及飞蝗肌球蛋白重链基因的dsRNA及其应用,本发明通过将合成飞蝗肌球蛋白重链基因干扰序列片段的dsRNA注入飞蝗体内,可以特异性的沉默飞蝗的肌球蛋白重链基因的mRNA表达,昆虫产卵时的挖掘频率显著减少,挖掘深度明...
王慧敏杨美玲韩蕊
一种飞蝗钙调蛋白基因片段及其dsRNA和应用
本发明涉及一种飞蝗钙调蛋白(Cam)基因片段及其dsRNA和应用,本发明依据飞蝗的Cam基因序列,获取了序列为SEQ ID NO:1的基因片段,并以此片段合成dsRNA。通过在飞蝗体内注射dsRNA,可以特异性沉默飞蝗钙...
杨美玲王慧敏刘士理
高粱蚜MsCYP1基因、其编码蛋白、dsRNA及应用
本发明申请公开了一种高粱蚜MsCYP1基因、其编码蛋白、dsRNA及应用,旨在解决当前利用RNA干扰技术进行高粱蚜生物防治时缺乏关键基因的技术问题。本申请筛选到了能够分泌到高粱细胞内的高粱蚜蛋白MsCYP1,该蛋白及其编...
吴迪王道文雷康魏明舒李永邦胡志强牛梦迪张坤普
一种靶向二斑叶螨GABA基因的dsRNA及其应用
本发明涉及二斑叶螨防治技术领域,尤其涉及一种靶向二斑叶螨GABA基因的dsRNA及其应用。本发明的靶向二斑叶螨GABA基因的dsRNA,所述dsRNA是由如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列作为正义RNA和其反向互补...
魏朋张谦余建新杨明何林
飞蝗Par-1基因及其dsRNA在飞蝗防治中的应用
本发明属于生物技术领域,涉及飞蝗的防治,特别是指飞蝗Partitioning defective 1(Par‑1)基因及其dsRNA在飞蝗防治中的应用。通过将合成的Par‑1基因的dsRNA注射入雌飞蝗体腔后,可以特异性...
曾保娟化梦轲席玉玺周树堂郑洪远
一种高效防治黄曲条跳甲的dsRNA及其应用
本发明涉及生物技术领域,公开了一种高效防治黄曲条跳甲的dsRNA及其应用。一种高效防治黄曲条跳甲的dsRNA,所述dsRNA由芳基烷基胺n‑酰基转移酶基因转录得到,dsRNA具有如SEQ ID NO.1所示的RNA序列。...
张毅刘方乾徐冬冬李宏达
美国白蛾HcARNT、HcCncC基因dsRNA及其在防治美国白蛾中应用
本发明提供美国白蛾HcARNT、HcCncC基因dsRNA,所述HcARNT、HcCncC基因全长cDNA分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2所示。所述dsHcARNT或dsHcCncC分别可以沉默美国白...
汤方王明宇

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