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胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)抗辐射作用的研究进展被引量:3
2022年
电磁辐射、电离辐射、光辐射等辐射导致的组织器官损伤过程中常伴有活性氧(ROS)的激活和DNA损伤,而超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内广泛存在的一种抗氧化金属酶,在氧化-抗氧化平衡调控中发挥着重要的作用,并且参与了众多疾病的发生与发展,其中胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)主要分布于细胞外基质中。大量研究表明EC-SOD在多种组织器官的辐射损伤中发挥着抗辐射的作用,其主要通过降低ROS水平、抗血管生成,抗趋化和抗炎等方式防止细胞和组织的进一步损伤。因此,本文将对EC-SOD及其模拟物或类似物在辐射防护中的保护作用及其机制进行综述,为EC-SOD应用于辐射防护提供理论参考。
朱梦梅欧阳涛华天桢李琨于兵
关键词:抗辐射活性氧
EC-SOD基因修饰BMSCs移植治疗脑梗死大鼠的实验研究被引量:2
2020年
目的探究胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)基因修饰后的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗对脑梗死大鼠脑组织的保护作用及其机制。方法体外分离培养大鼠BMSCs,将在293T细胞中培养的含EC-SOD序列的载体转染至BMSCs细胞,免疫印迹法检测细胞中EC-SOD蛋白表达验证EC-SOD转染情况。Zea-longa线栓法建立脑梗死大鼠模型,建模成功后分为模型组(注射150 mmol/L PBS缓冲液10μL)、BMSCs组(注射BMSCs细胞悬液,细胞密度为1×10^5个/μL×10μL)、MSCs+EC-SOD组(注射转染EC-SOD表达载体的BMSCs细胞悬液1×10^5个/μL×10μL),对照组(不造模,仅结扎颈外远端动脉对照处理;注射150 mmol/L PBS缓冲液10μL),每组15只大鼠。以神经功能缺损(mNSSS)评分评定大鼠神经功能缺损情况,TTC染色法检测脑梗死面积,免疫荧光法检测脑组织中EC-SOD表达情况,Tunel染色检测脑组织细胞凋亡情况,免疫印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠mNSSS评分、脑梗死面积、脑组织细胞凋亡率升高,Caspase-3、Bax蛋白表达升高,EC-SOD表达阳性率、Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与模型组相比,BMSCs组、BMSCs+EC-SOD组大鼠mNSSS评分、脑梗死面积、脑组织细胞凋亡率降低,Caspase-3、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,BMSCs+EC-SOD组大鼠EC-SOD表达阳性率升高(均P<0.05);与BMSCs组相比,BMSCs+EC-SOD组大鼠mNSSS评分、脑梗死面积、脑组织细胞凋亡率降低,Caspase-3、Bax蛋白表达降低,EC-SOD表达阳性率、Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05)。结论EC-SOD基因修饰BMSCs可降低脑梗死大鼠脑梗死面积及脑组织细胞凋亡率,对神经功能损伤具有一定的改善作用。
陈鸿尤夏鹰曹作为陈达建
关键词:脑梗死骨髓间充质干细胞
太平洋牡蛎Ec-SOD同源基因开发
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)通过清除生物体内产生的超氧化物而发挥抗氧化作用。其中,胞外超氧化物歧化酶(Ec-SOD)是重要细胞外抗氧化蛋白。但存在于牡蛎血浆内的Ec-SOD蛋白已经证...
毛小伟
关键词:太平洋牡蛎基因鉴定抑菌活性
人源EC-SOD在毕赤酵母中的构建与表达被引量:1
2018年
利用基因工程技术构建表达载体并电转化至毕赤酵母中,成功实现人源EC-SOD在毕赤酵母X33中的表达.重组蛋白经盐酸羟胺法测得25 mL摇瓶发酵液上清酶活为508 U·mg^(-1),5 L发酵液上清酶活为909U·mg^(-1).发酵液上清用硫酸铵沉降后,使用DEAE弱阴离子交换树脂初步分离纯化出较纯的EC-SOD,测得比活为1 700 U·mg^(-1),并进行氯化硝基四氮唑蓝(NBT)活性定性染色.结果表明,毕赤酵母成功胞外表达具有一定活性的SOD蛋白.
林士森刘玮洁林靖颖杨楠楠刘树滔
关键词:毕赤酵母
EC-SOD的体外分子检测方法及引物
本发明涉及一种ECSOD的体外分子检测引物,正向引物序列见序列1,反向引物序列见序列2。与权利要求1所述的ECSOD的体外分子检测引物配合使用的内参引物,正向引物序列见序列3,反向引物序列见序列4。本发明开发一种以荧...
孙麟马洁刘宇
文献传递
EC-SOD在肾缺血再灌注损伤大鼠脑内的表达变化被引量:2
2017年
目的观察细胞外超氧化物歧化酶(extracellular superoxide dismutases,EC-SOD)在肾缺血再灌注损伤(renal ischemia reperfusion injury,RIRI)大鼠脑内的表达变化,探讨EC-SOD在脑抗氧化应激反应中的作用。方法选用健康雄性Wistar大鼠12只,随机分为对照组和RIRI组各6只,RIRI组切除大鼠右肾后,用无损伤动脉夹夹闭大鼠左肾动脉,45min后移去动脉夹,恢复大鼠左肾血液供应,建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型。待左肾动脉再灌注24h后麻醉大鼠取材(血、肾、脑)。对照组大鼠只分离左肾动脉并不夹闭。选用苦味酸和酶偶联速率法,检测2组大鼠血清中血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)浓度;苏木精-伊红染色光镜观察实验大鼠肾组织形态变化;采用硫代巴比妥酸比色法检测2组大鼠脑内丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;应用逆转录聚合酶链反应和western blot法,测定大鼠脑内EC-SOD mRNA与蛋白的表达水平。结果RIRI组大鼠血清中BUN和SCr浓度明显高于对照组,RIRI组大鼠脑内MDA含量、H2O2浓度、EC-SOD mRNA水平相对表达量以及EC-SOD蛋白水平相对表达量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。RIRI组脑组织MDA、H2O2含量与EC-SOD mRNA水平以及EC-SOD蛋白水平表达呈正相关。结论大鼠RIRI后,脑内出现过氧化损伤;EC-SOD在RIRI大鼠脑内的表达升高,可能发挥了抗氧化应激的作用。
郝斌王切王素玲王磊
关键词:再灌注损伤超氧化物歧化酶丙二醛
超氧阴离子自由基检测与清除相关蛋白cpYFP、EC-SOD的发酵工艺研究
人体中最主要的清除超氧阴离子自由基的物质就是超氧化物歧化酶(SOD),它有三种亚型,其中胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)含量最少。目前对重组EC-SOD蛋白的发酵工艺研究较少,重组蛋白表达量也很低。本研究工作目标是通过...
刘玮洁
关键词:毕赤酵母重组蛋白响应面优化
EC-SOD在同型半胱氨酸致单核细胞源性巨噬细胞氧化应激中的作用研究被引量:2
2017年
目的探讨细胞外超氧化物岐化酶(EC-SOD)在同型半胱氨酸(Hcy)致巨噬细胞氧化应激中的作用及机制。方法将THP-1单核细胞用佛波酯刺激48 h后演变成巨噬细胞,用0、50、100、200、500μmol/L Hcy作用细胞72 h,并加设叶酸+维生素B12(Vit B12)干预组(100μmol/L Hcy+30μmol/L叶酸+30μmol/L Vit B12)。微板法检测氧化应激指标(H_2O_2、O_2^-、OH-)的变化;实时荧光定量PCR检测巨噬细胞中EC-SOD的mRNA表达水平;Western blot检测巨噬细胞中EC-SOD的蛋白表达水平;EC-SOD测定试剂盒检测EC-SOD活性。分别构建EC-SOD重组质粒和干扰质粒转染细胞,检测EC-SOD的mRNA及蛋白的表达水平以及超氧阴离子的表达。结果与对照组相比,100、200、500μmol/L Hcy组H_2O_2、OH-活性显著增高(P<0.01),EC-SOD mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。与对照组相比,100、200、500μmol/L Hcy组EC-SOD活性分别下降了13.92%、8.62%、10.32%(P<0.05,P<0.01)。与100μmol/L Hcy组相比,叶酸+Vit B12干预组EC-SOD mRNA的表达升高了47%。分别转染EC-SOD重组质粒和干扰质粒后,与100μmol/L Hcy组相比,EC-SOD重组组O_2^-含量降低了63.89%,干扰片段-596组O_2^-含量则增加了33.59%(P<0.05,P<0.01)。结论 EC-SOD参与了Hcy导致的单核细胞源性巨噬细胞的氧化应激。在抑制Hcy诱导动脉粥样硬化的过程中,EC-SOD可能发挥着重要的作用。
和杨杨马胜超刘现梅孔繁琪郭伟王楠贾月霞杨晓明金少举姜怡邓曹军
关键词:同型半胱氨酸巨噬细胞氧化应激
EC-SOD基因真核表达载体的构建与鉴定
2016年
目的:构建携带EC-SOD基因和增强绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体,并观察其在人脐带间充质干细胞(hu MSCs)细胞中的表达。方法:从人外周血中提取总RNA,逆转率制备c DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)中获取EC-SOD基因,其与真核表达载体p CS2+经Cla I/Eco RI双酶切后;经T4 DNA连接酶连接,获得重组质粒p CS2+-EC-SOD,用菌液PCR、Cla I/Eco RI双酶切及测序鉴定正确后,将其与经PCR获取的EGFP基因用Eco RI/xba I双酶切;经T4 DNA连接酶连接,获得p CS2+-EC-SOD-EGFP重组质粒,用菌落PCR、Eco RI/xba I双酶切及测序鉴定。用纳米试剂法转染hu MSCs细胞,用倒置荧光显微镜观察EGFP的表达。结果:成功获取了EC-SOD基因和EGFP基因,重组质粒p CS2+-ECSOD-EGFP经菌落PCR和双酶切均得到大小一致的目的条带,经测序鉴定该序列与Gen Bank中人EC-SOD基因、EGFP基因序列的同源性达100%,基因插入方向正确;重组质粒转染hu MSCs细胞后可见EGFP增强绿色荧光蛋白表达。结论:成功构建了EC-SOD的真核表达重组质粒p CS2+-EC-SOD-EGFP,且能在hu MSCs细胞中表达。
吴西军董智慧舒莉萍何志旭
关键词:转染
ECSOD基因甲基化与脑梗死的相关性被引量:4
2016年
目的研究细胞外超氧化物歧化酶(extracellular superoxide dismutase,EC-SOD)基因的甲基化状态与脑梗死的相关性。方法入选83例脑梗死患者和94名对照者,根据颅脑磁共振结果记录患者梗死灶的大小,并评估颅内动脉的硬化程度,进行NIHSS评分及Barthel指数评定。应用甲基化特异性PCR检测外周血ECSOD基因的甲基化状态,并分析其与脑梗死的相关性。结果脑梗死组EC-SOD基因启动子区甲基化检出率(30.1%)较对照组低(53.2%),差异有统计学意义(P〈0.05)。以梗死灶直径4cm为界,大面积脑梗死患者甲基化检出率(0)低于小面积脑梗死患者(39.1%),差异有统计学意义(P〈0.05)。57例患者行颅脑MRA检查,无脑动脉硬化、轻度脑动脉硬化、中度脑动脉硬化、重度脑动脉硬化患者的ECSOD基因的甲基化检出率有下降趋势(分别为45.5%、42.9%、23.8%、14.3%),但差异无统计学意义(P〉0.05)。脑梗死组中,甲基化程度高者的NIHSS评分较低,差异有统计学意义(P〈0.05);而Barthel指数较高,但差异无统计学意义(P〉0.05)。结论脑梗死患者ECSOD基因甲基化程度较正常对照低,其程度与患者梗死灶大小、脑动脉硬化程度及神经功能缺损严重程度相关。
周晓艳徐营营谢兆宏许顺良毕建忠
关键词:脑梗死表观遗传学甲基化特异性PCR

相关作者

朱希强
作品数:115被引量:328H指数:10
供职机构:山东大学
研究主题:普鲁兰 发酵 EC-SOD 黄原胶 透明质酸酶
袁勤生
作品数:328被引量:1,827H指数:24
供职机构:华东理工大学生物工程学院
研究主题:超氧化物歧化酶 SOD 纯化 大肠杆菌 海藻糖
柴智
作品数:6被引量:10H指数:1
供职机构:吉林大学
研究主题:EC-SOD 活性中心 化学领域 重组酶 低分子量
曲和之
作品数:12被引量:20H指数:2
供职机构:吉林大学
研究主题:活性中心 EC-SOD 超氧化物歧化酶 分子改造 纯化及性质
郝东云
作品数:92被引量:219H指数:8
供职机构:吉林省农业科学院
研究主题:玉米 转基因玉米 性状 基因 核酸分子