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- 干细胞修复受损组织在组织工程和再生医学领域受到广泛的关注与研究。人牙髓干细胞(hDPSCs)来源于神经嵴细胞迁移分化的外胚层,具备快速增殖、自我更新和特定条件下分化的能力。LIM{1}蛋白1(LMP-1)是与骨发育相关的因...
- 穆睿
- 关键词:LIM矿化蛋白1人牙髓干细胞氧化石墨烯
- 文献传递
- 研究两种干细胞体外矿化过程中{1}矿化蛋白1的表达被引量:1
- 2017年
- 目的 LIM{1}蛋白1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)是一种胞内非分泌型蛋白,广泛存在于各种组织中,它不仅影响骨基质的{1}而且还是成骨细胞分化和骨形成过程中重要的调节因子。本实验通过检测LMP-1在牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞体外{1}过程中的表达情况,来研究胞内信号转导分子LIM{1}蛋白1对牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞体外{1}的作用,为LMP-1作为成骨调节因子,影响骨基质{1}方面的研究提供参考。方法酶消化法体外培养牙髓干细胞,用挑克隆细胞团的方法对牙髓干细胞进行纯化传代培养。密度梯度离心法体外培养骨髓间充质干细胞。两种细胞分别设置实验组和对照组。实验组培养液中加入{1}诱导液,对照组不加{1}诱导液。分别于培养3、5、7、14天检测碱性磷酸酶的活性。培养21天茜素红染色检测{1}结节形成。培养期间,采用荧光定量PCR方法检测LIM{1}蛋白1、骨形态发生蛋白BMP-2、牙本质涎磷蛋白DSPP和Ⅰ型胶原蛋白COL-1、核心结合因子RUNX-2等成骨标志基因的表达,用SPSS 17.0对结果进行统计学分析。结果培养3、5、7、14天碱性磷酸酶的活性逐渐提高,且实验组碱性磷酸酶的活性显著高于对照组。培养21天实验组可见{1}结节形成。荧光定量PCR检测到实验组及对照组各个基因均表达,且实验组表达显著高于对照组。结论发现LIM{1}蛋白1与牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞体外{1}过程相关,推测LIM{1}蛋白1可能作为检测牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞{1}的一个指标。
- 费腾孙艳艳周妍袁梦桐刘明月史欣胡伟平
- 关键词:牙髓干细胞骨髓间充质干细胞LIM矿化蛋白1
- LIM{1}蛋白1在牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞中的研究进展被引量:2
- 2016年
- LIM{1}蛋白1(LMP-1)是一种胞内信号转导分子,体内外研究表明它在成骨细胞分化过程中起到促进骨形成的重要作用。目前认为LMP-1是通过刺激某些诱导骨形成的因子如骨形态发生蛋白(BMP)的合成及分泌发挥作用,从而提高骨形态发生蛋白及其他成骨因子的成骨活性。该文围绕LMP-1的作用及在牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞{1}方面的研究现状作一综述。
- 费腾胡伟平袁梦桐
- 关键词:LIM矿化蛋白1骨形态发生蛋白牙髓干细胞骨髓间充质干细胞
- LIM{1}蛋白1在大鼠牙髓损伤修复中的时空表达被引量:1
- 2016年
- 目的 :探讨LIM{1}蛋白1(LIM mineralization protein 1,LMP-1)在大鼠磨牙牙髓损伤修复中的表达。方法 :建立大鼠磨牙牙髓损伤修复动物模型,用免疫组织化学染色方法观察LMP-1在大鼠牙髓损伤修复中的表达,并用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件及单因素方差分析比较各组间的差异。结果 :在正常大鼠牙髓组织中LMP-1表达阴性;在大鼠牙髓损伤后1 d,LMP-1表达于成牙本质细胞及部分牙髓成纤维细胞;术后3 d,LMP-1表达于坏死牙髓下方的细胞增殖层;术后7 d,LMP-1显著表达于增殖活跃的牙髓细胞及部分成牙本质细胞中。结论:LMP-1在牙髓损伤修复过程中呈时空特异性表达,可能参与成牙本质细胞及牙髓细胞的增殖、分化及修复性牙本质的形成。
- 方平娟潘乙怀孙仁义赵瑜孙瑜
- 关键词:LIM矿化蛋白1
- LIM{1}蛋白1/低氧诱导因子1α慢病毒载体转染脂肪源性干细胞的成骨分化被引量:3
- 2015年
- 背景:LIM{1}蛋白1及低氧诱导因子1α作为胞内蛋白,可分别从诱导成骨分化及促进血管再生两个方面促进成骨,联合二者高效诱导脂肪源性干细胞成骨分化具有重要的意义。目的:探讨慢病毒载体介导的LIM{1}蛋白1及低氧诱导因子1α双基因转染的脂肪源性干细胞成骨分化的情况。方法:应用反转录PCR技术克隆目的基因LIM{1}蛋白1及低氧诱导因子1α片段,并分别克隆于慢病毒骨架质粒p LVX-EF1α-DsR ed-Hyg和p LVX-EF1α-IRES2-AcG FP1中,构建慢病毒载体主体质粒p LVX-EF1α-DsR ed-Hyg-RLMP-1和p LVX-EF1α-AcG FP-RHIF-1α,随即与辅助质粒和包装质粒共转染Lenti-X 293T细胞,包装慢病毒载体;采用组织块加酶消化法分离培养大鼠脂肪源性干细胞,使用流式细胞仪对其进行鉴定。分别在慢病毒转染脂肪源性干细胞3,7,14 d后,应用反转录PCR方法检测脂肪源性干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、Runx-2、碱性磷酸酶、骨钙蛋白表达水平的同时检测血管内皮生长因子的表达水平。结果与结论:pL VX-EF1α-DsR ed-Hyg-RLMP-1和p LVX-EF1α-Ac GFP-RHIF-1α可有效地转染入大鼠脂肪源性干细胞;反转录PCR结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、Runx-2、碱性磷酸酶、骨钙蛋白在LIM{1}蛋白1及低氧诱导因子1α双基因转染后第7天都开始明显过表达,并且可持续到14 d。说明LIM{1}蛋白1及低氧诱导因子1α双基因转染脂肪源性干细胞可提高其成骨活性。
- 潘玮敏刘民杨建昌段春光黄悦
- 关键词:干细胞脂肪干细胞低氧诱导因子1Α脂肪源性干细胞LIM矿化蛋白1慢病毒载体成骨分化
- LIM{1}蛋白1慢病毒载体转染后大鼠骨髓基质干细胞的分化
- 2015年
- 目的探讨慢病毒转染大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)过表达LIM{1}蛋白1(LMP-1)对BMSCs分化能力的影响。方法构建LMP-1基因慢病毒载体,转染原代培养的大鼠MSCs,荧光显微镜下观察转染效果,MTT法检测转染后细胞增殖,常规方法诱导过表达LMP-1的BMSCs成骨和成软骨分化,以免疫组织化学染色观察成骨诱导后细胞分泌骨钙素的情况以及用阿利新蓝染色鉴定成软骨诱导后细胞分泌氨基多糖的情况。结果感染复数(MOI)值为12时即可获得良好的转染效果,细胞转染后增殖正常,成骨诱导后,骨钙素染色阳性;成软骨诱导后,阿利新蓝染色阳性。结论lv-lmp-1可以有效转染大鼠BMSCs,转染后细胞的多向分化能力没有受到影响。
- 张姝江谭丽陈艺白波
- 关键词:慢病毒属LIM矿化蛋白1细胞分化骨髓
- LIM{1}蛋白1在成骨分化前后人牙囊细胞中的表达被引量:3
- 2014年
- 目的:研究人牙囊细胞成骨分化前后LIM{1}蛋白-1的表达。探讨LIM{1}蛋白-1在牙囊细胞向牙周组织分化过程中的作用。方法:组织块加酶消化法分离培养人牙囊细胞,实验组培养液中加入{1}诱导剂,对照组不加{1}诱导剂。培养4周后,免疫细胞化学检测骨涎蛋白的表达;Von Kossa染色检测{1}结节的形成。{1}诱导前后,采用RT-PCR技术检测LIM{1}蛋白-1。结果:培养4周,实验组{1}结节形成,骨涎蛋白免疫细胞化学呈阳性表达,Von Kossa染色阳性;对照组未形成{1}结节,骨涎蛋白表达弱阳性,Von Kossa染色阴性。RT-PCR结果显示LIM{1}蛋白-1在实验组强阳性表达,对照组弱表达。结论:LIM{1}蛋白-1与胚胎期人牙囊细胞的体外{1}过程相关,提示LIM{1}蛋白-1可能在胚胎期牙囊细胞的分化、{1}中发挥一定作用。
- 常秀梅张克荣王书文齐香微
- 关键词:牙囊细胞分化矿化LIM矿化蛋白-1
- LIM{1}蛋白1过表达对骨肉瘤细胞系OS-9901细胞增殖的影响
- 2013年
- 目的探讨骨肉瘤细胞系OS-9901细胞中LIM{1}蛋白1(LMP-1)过表达对该细胞增殖的影响。方法构建LMP-1过表达慢病毒载体,通过脂质体转染进骨肉瘤细胞系OS-9901细胞。通过荧光定量PCR和Western blot检测LMP-1过表达情况,并通过BrdU掺入实验比较LMP-1过表达前后细胞增殖情况。结果转染了LMP-1过表达慢病毒载体6 h后细胞内LMP-1 mRNA和蛋白表达均无显著变化(P>0.05),且DNA合成量无显著变化。而当LMP-1过表达慢病毒载体转染细胞12、24和48 h后细胞内LMP-1 mRNA和蛋白表达量均显著提高的同时,DNA合成量显著降低(P<0.05)。结论 LMP-1过表达可抑制骨肉瘤细胞系OS-9901细胞增殖。
- 严广斌余楠生卢伟杰卢永辉钱东阳
- 关键词:LIM矿化蛋白1骨肉瘤细胞慢病毒载体
- LIM{1}蛋白1在人牙髓及根尖牙乳头中的表达被引量:1
- 2013年
- 目的比较人年轻恒牙牙髓、根尖牙乳头及成熟恒牙牙髓组织中LIM{1}蛋白1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)的表达,探寻LMP-1在牙髓牙本质复合体发育和成熟中的作用。方法收集48颗因正畸拔除的健康前磨牙,其中年轻和成熟恒牙各24颗,样本来源对象的年龄分别为11~14岁和18~30岁。拔除后即刻分离获得年轻恒牙的牙髓和根尖牙乳头组织(各24个样本)以及成熟恒牙的牙髓组织(24个样本)。实验分组如下:第1组为牙根形成2/3的年轻恒牙的根尖牙乳头组织;第2组为牙根形成2/3的年轻恒牙的牙髓组织;第3组为成熟恒牙的牙髓组织。每组12个样本用于反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT—PCR)检测,另12个样本用于蛋白质印迹法检测,以β-肌动蛋白做内参。图像分析软件(Meta Morph6.2.6)对阳性条带进行灰度值测定,目的条带与内参的灰度值比值为LMP-1的表达强度。应用SPSS13.0对数据进行统计学分析,LMP-1在年轻恒牙根尖牙乳头与牙髓组织之间的表达强度的两两比较采用两配对样本的t检验,年轻恒牙牙髓与成熟恒牙牙髓组织之间的表达强度的两两比较采用两独立样本的t检验,以双侧P〈0.05为差异有统计学意义。结果LMP-1 mRNA在年轻恒牙的根尖牙乳头、牙髓和成熟恒牙的牙髓组织中的表达强度分别为0.25±0.09、0.46±0.24和0.31±0.10,经两样本t检验分析,LMP-1的基因表达在第2组年轻恒牙牙髓组织明显高于其在第1组年轻恒牙根尖牙乳头组织(t=2.92)以及第3组成熟恒牙牙髓组织的表达强度(t=2.31,P〈0.05)。LMP-1蛋白在3组中的表达强度分别为0.33±0.08、0.82±0.10和0.52±0.19,LMP-1的蛋白表达在第2组显著高于第1组(t=3.33)及第3组中的表达强度(t=3.11,P〈0.05)。结论无论是在mRNA水平还是在蛋白水平,LMP-1在人年轻恒牙牙�
- 陈旭张珍丽孙鲁雁郭艳
- 关键词:牙髓牙乳头LIM矿化蛋白1年轻恒牙
- 六白菖砂粒剂对颈椎病动物模型骨形态发生蛋白2及{1}矿化蛋白1的影响
- 2012年
- 背景:骨形态发生蛋白2与{1}矿化蛋白1在成骨细胞分化、成熟中有重要作用,与颈椎病的发生有很大联系。目的:观察六白菖砂粒剂对家兔颈椎病模型外周血清中骨形态发生蛋白2、{1}矿化蛋白1的影响。方法:将50只成年健康雄性大耳白兔随机分为5组。除正常对照组外采用蹲坐低头位制作颈椎病动物模型。颈复康对照组每天以颈复康0.25g灌胃,六白菖砂粒剂高剂量组和低剂量组每天分别以0.5g、0.25g灌胃,正常对照组和模型对照组予同等容量的蒸馏水灌胃。与4周、12周测量动物颈椎骨密度,12周时取椎体检测离体骨密度,并检测外周血清中骨形态发生蛋白2、{1}矿化蛋白1因子水平。结果与结论:六白菖砂粒剂高剂量组中骨形态发生蛋白2、{1}矿化蛋白1水平显著高于空白对照组、颈椎病模型对照组和六白菖砂粒剂低剂量组(P<0.05);颈椎病模型对照组中骨形态发生蛋白2、{1}矿化蛋白1水平明显低于正常对照组、颈复康颗粒对照组和六白菖砂粒剂高剂量组(P<0.05),而与六白菖砂粒剂低剂量组相比差异无显著性意义(P>0.05)。提示六白菖砂粒剂是通过提高家兔血清骨形态发生蛋白2、{1}矿化蛋白1水平对颈椎病产生疗效。
- 史栋梁杨豪贺自克王子华
- 关键词:颈椎病骨质疏松症骨形态发生蛋白2LIM矿化蛋白1
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- 陈智

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- 王效英

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